"RT-4 Cell:人膀胱移行細(xì)胞乳頭瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
RIN-m細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-13細(xì)胞、DMS 53細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞
AMO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-AS-45-1細(xì)胞、MHCC 97-L細(xì)胞、OPM2細(xì)胞
GM2131細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-112細(xì)胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、PIEC細(xì)胞
HPB-ALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca 109細(xì)胞、H3396細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
RT-4 Cell:人膀胱移行細(xì)胞乳頭瘤細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時間對細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對于特別難消化的細(xì)胞和對胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細(xì)胞時把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細(xì)胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：４傳代，每周２-３次。
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
PLC/PRF5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 510細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞
H-1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTX TNA2細(xì)胞、OCI-AML-4細(xì)胞、SK-MEL24細(xì)胞
3T6-Swiss albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9/S1細(xì)胞、STC-1細(xì)胞、G361細(xì)胞
PC-3M-IE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231-GFP細(xì)胞、M059J細(xì)胞、CCK-81細(xì)胞
RCC-10RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2細(xì)胞、HCC0038細(xì)胞、NHLF細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
RT-4 Cell:人膀胱移行細(xì)胞乳頭瘤細(xì)胞系
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞形態(tài)特性：多角
Y3-Ag123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-1細(xì)胞、SK RC 20細(xì)胞、Hep-G2/C3A細(xì)胞
UO.31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134 VI細(xì)胞、GB-1細(xì)胞、NBL-1細(xì)胞
HUT 125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP a2細(xì)胞、TPC1細(xì)胞、SW260細(xì)胞
OKa-C-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-1788細(xì)胞、C33細(xì)胞、N-87細(xì)胞
WEHI231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-HN6細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞、VMRC-RCZ細(xì)胞
Monomac-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2228細(xì)胞、Panc 10.05細(xì)胞、SUM190細(xì)胞
HN-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ANA-1細(xì)胞、MDA-MB 453細(xì)胞、OSA細(xì)胞
RT-4 Cell:人膀胱移行細(xì)胞乳頭瘤細(xì)胞系
MAVER-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-193細(xì)胞、NCI-H2170細(xì)胞、SNU-520細(xì)胞
PANC3.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-B細(xì)胞、AU 565細(xì)胞、SNGM細(xì)胞
MDCK Type II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LMH細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞、HEC-1A細(xì)胞
JB6 [Mouse]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK49F細(xì)胞、CL1-5細(xì)胞、ST-2細(xì)胞
NuTu 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGE細(xì)胞、PT-K75細(xì)胞、HB611細(xì)胞
Z310細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI660細(xì)胞、NCI-H2122細(xì)胞、TE354.T細(xì)胞
COLO 320 HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DR2R1610細(xì)胞、E0771細(xì)胞、H-498細(xì)胞
COLO320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2110細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞、H2073細(xì)胞
H-735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/Ohkubo細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞
H-735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/Ohkubo細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞
P388細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG1細(xì)胞、H-378細(xì)胞、NH-6細(xì)胞
N-Tera-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-2H3細(xì)胞、IEC 18細(xì)胞、PC-3M IE8細(xì)胞
Hs 729.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-820細(xì)胞、KYSE-50細(xì)胞、WM115mel細(xì)胞
Hs-695-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H226細(xì)胞、JB6 Cl 30細(xì)胞、OVCA-420細(xì)胞
HCCLM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAEC細(xì)胞、Panc_03_27細(xì)胞、EB-3細(xì)胞
3T3J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMRC2細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞
HS5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：huH 1細(xì)胞、PLB985細(xì)胞、COLO829細(xì)胞
SUP-M2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1271細(xì)胞、D283MED細(xì)胞、Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞
OS-RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC2細(xì)胞、SF-767細(xì)胞、3T6細(xì)胞
VERO76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3CA細(xì)胞、SCC090細(xì)胞、CAKI.1細(xì)胞
MKN-45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHSY-5Y細(xì)胞、HPB/ALL細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞
HEK-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTPA細(xì)胞、VAESBJ細(xì)胞、NCIH747細(xì)胞
B16-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C6661細(xì)胞、COLO 357細(xì)胞、HLEC-B3細(xì)胞
M14-MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 361細(xì)胞、SW982細(xì)胞、CCD-966SK細(xì)胞
L5178-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas-299細(xì)胞、GM3190細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞
NK 10a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1734細(xì)胞、alpha TC1.6細(xì)胞、MPP-89細(xì)胞
PANC 813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT GEO細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞、PM6細(xì)胞
SKGT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEND細(xì)胞、HCC15細(xì)胞、CCRF SB細(xì)胞
TC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMBC細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞、A-72細(xì)胞
NCI-H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C 6細(xì)胞、BIC-1細(xì)胞、MDAMB134VI細(xì)胞
Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138-MG細(xì)胞、MDA-MB157細(xì)胞、Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞
NCTC 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc02.03細(xì)胞、HPMEC細(xì)胞、S3 HeLa細(xì)胞
H-2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-PAP細(xì)胞、GTL16細(xì)胞、NCTC 3960細(xì)胞
NCIH1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC5細(xì)胞、PLA801-95D細(xì)胞、HRA19細(xì)胞
NCI-H2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL28細(xì)胞、L1210細(xì)胞、SCC-4細(xì)胞
Swiss 3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 19細(xì)胞、624細(xì)胞、HNE2細(xì)胞
SUDHL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-10 Attached細(xì)胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞、RGC-5細(xì)胞
MA 104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHHA-1細(xì)胞、NCIH1876細(xì)胞、NCI-H1568細(xì)胞
OS-732細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：6T-CEM細(xì)胞、H-EMC-SS細(xì)胞、M-1細(xì)胞
SUDHL10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞、B16 BL6細(xì)胞、SW1271細(xì)胞
KBM-7/Hap8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEP3B2細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞
Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 354.T細(xì)胞、bEND.3細(xì)胞、QGY7703細(xì)胞
MILE SVEN 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3 CA細(xì)胞、Ha Fe細(xì)胞、GM04154細(xì)胞
RT-4 Cell:人膀胱移行細(xì)胞乳頭瘤細(xì)胞系
IGROV 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDF-a細(xì)胞、NCI-Hut 125細(xì)胞、OLN-93細(xì)胞
130T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 132細(xì)胞、HuPT4細(xì)胞、F81細(xì)胞
NCI-H1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA 104細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞、A-375SM細(xì)胞
KOPN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 94細(xì)胞、OE-19細(xì)胞、BS-C-1細(xì)胞
SJCRH30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-3細(xì)胞、RCC-10RGB細(xì)胞、NCI660細(xì)胞
ATDC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L23/P細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞
P3J-HR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFF1細(xì)胞、HIEC6細(xì)胞、MCF7-GFP細(xì)胞
SKRC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VA-ES-BJ細(xì)胞、Ly19細(xì)胞、Sci-1細(xì)胞
HEK/293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM5A細(xì)胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞
RPMI 7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63.Ag8.653細(xì)胞、BEAS 2B細(xì)胞、SU-DHL-4細(xì)胞
RMG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE-280細(xì)胞、NCI-H2110細(xì)胞、H82sclc細(xì)胞
HEK293-EBNA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE細(xì)胞、MCF 7B細(xì)胞、S3-HeLa細(xì)胞
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