"SK-MEL-31 Cell:人惡性黑色素瘤細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
P30OHK細胞系相關產(chǎn)品:Rat-2細胞、H-4-II-E細胞、SK-MEL-5細胞
MDA-MB157細胞系相關產(chǎn)品:hUC-MSC細胞、CZ-1細胞、SUM-102細胞
NB9細胞系相關產(chǎn)品:WM451細胞、A-9細胞、MPC11細胞
STC-1細胞系相關產(chǎn)品:Tu-686細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞、NIH/3T3細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SK-MEL-31 Cell:人惡性黑色素瘤細胞系
細胞消化過程總結:其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:4-1:6傳代,2-3天換液1次。
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
COLO 320 DM細胞系相關產(chǎn)品:HT 1197.T細胞、WPMY1細胞、SK-MEL-2-LUC細胞
Y-79細胞系相關產(chǎn)品:MBT2細胞、DITNC1細胞、CX-1細胞
CHG5細胞系相關產(chǎn)品:BE2-M17細胞、OCI-Ly1細胞、UCLA-SO-M20細胞
End1/E6E7細胞系相關產(chǎn)品:Vero E6細胞、HECCL-1細胞、H1869細胞
SKNO1細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-175VII細胞、HCC-1937細胞、CT26細胞
細胞生長特性:貼壁生長
SK-MEL-31 Cell:人惡性黑色素瘤細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
細胞形態(tài)特性:上皮細胞
Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞系相關產(chǎn)品:GM04671細胞、RKOE6細胞、CW2細胞
McCoy B細胞系相關產(chǎn)品:SNU16細胞、NCIH1373細胞、BEL-7405細胞
MeT-5A細胞系相關產(chǎn)品:A-549細胞、SK-ES1細胞、PANC 327細胞
NIHOVCAR3細胞系相關產(chǎn)品:FL62891細胞、H2052細胞、MC-116細胞
NCI-H1299細胞系相關產(chǎn)品:COR-L23細胞、Madison 109細胞、C643細胞
Jurkat-E6細胞系相關產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney-21細胞、WM-451Lu細胞、NIH 3T6細胞
Hs-281-T細胞系相關產(chǎn)品:NPC-TW01細胞、OVCA432_Bast細胞、HT 1080細胞
SK-MEL-31 Cell:人惡性黑色素瘤細胞系
Mel526細胞系相關產(chǎn)品:LC-MS細胞、KCL-22細胞、KRC/Y細胞
MJ細胞系相關產(chǎn)品:RN細胞、NCI-SNU-119細胞、Jurkat-FHCRC細胞
Hs 343.T細胞系相關產(chǎn)品:TN5B14細胞、HKC細胞、V79-1細胞
Y3Ag1.2.3細胞系相關產(chǎn)品:SKLMS1細胞、SNU16細胞、MDA MB 361細胞
HEK293-H細胞系相關產(chǎn)品:SKNMC細胞、OCI AML4細胞、U87MG細胞
PJ34細胞系相關產(chǎn)品:P3HRI細胞、SNU-878細胞、HOP 62細胞
MuM-2B細胞系相關產(chǎn)品:MNNG細胞、KYSE 70細胞、CL34細胞
MHCC97-L細胞系相關產(chǎn)品:SKCO1細胞、SACC83細胞、NCI-H2126細胞
Baby Hamster Kidney 21細胞系相關產(chǎn)品:H2087細胞、DHBE細胞、H520細胞
Baby Hamster Kidney 21細胞系相關產(chǎn)品:H2087細胞、DHBE細胞、H520細胞
B16 melanoma F10細胞系相關產(chǎn)品:NCIH69細胞、OKT3細胞、EFO-27細胞
DMS79細胞系相關產(chǎn)品:RBL-1細胞、SK MES 1細胞、BGC-823細胞
H596細胞系相關產(chǎn)品:GA-10(Clone 4)細胞、CCD 19Lu細胞、Dakiki細胞
H22細胞系相關產(chǎn)品:KYSE 70細胞、Y3Ag1.2.3細胞、Glioma 261細胞
WM115細胞系相關產(chǎn)品:NE1細胞、SN12PM6細胞、Jurkat FHCRC細胞
Murine Carcinoma-38細胞系相關產(chǎn)品:SNU-739細胞、95-D細胞、87MG細胞
Douglas Foster-1細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2227細胞、APRE-19細胞、NIH:OVCAR-3細胞
TF-1細胞系相關產(chǎn)品:Chang liver細胞、Alexander cells細胞、hTERT RPE1細胞
Z-138細胞系相關產(chǎn)品:H838細胞、LNCaP-FGC細胞、D283 Med細胞
CL11細胞系相關產(chǎn)品:HuH6細胞、P3-X63.Ag8.653細胞、HL7702細胞
CCD-1095Sk細胞系相關產(chǎn)品:SCC 9細胞、hFOB 1.19細胞、HCO細胞
RH30SJ細胞系相關產(chǎn)品:End1/E6E7細胞、TCC-SUP細胞、HT22細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞系相關產(chǎn)品:EFM19細胞、DHL-2細胞、U937細胞
SNU520細胞系相關產(chǎn)品:H2170細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、MPASMC細胞
HBL100細胞系相關產(chǎn)品:PLB985細胞、Mel RM細胞、SU-DHL-10細胞
Hs675細胞系相關產(chǎn)品:H-1755細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞、Panc 1細胞
NKM1細胞系相關產(chǎn)品:ECC 10細胞、RD-2細胞、766T細胞
T-24細胞系相關產(chǎn)品:SK-ML2細胞、Walker 256細胞、BL-6細胞
PL-11細胞系相關產(chǎn)品:PA1細胞、RINm-5F細胞、B 95.8細胞
BGC823細胞系相關產(chǎn)品:KM12SM細胞、Hep G2/C3A細胞、MLMA細胞
LOU-NH91細胞系相關產(chǎn)品:CAL-33細胞、MDA-MB-468細胞、RINm-5F細胞
H220細胞系相關產(chǎn)品:H-676細胞、L cells細胞、EL 4細胞
D-283細胞系相關產(chǎn)品:NP69細胞、NCIH2023細胞、Vero-E6細胞
H4-IIE-C3細胞系相關產(chǎn)品:CAL 27細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞、Walker-Ca.256細胞
MN-9D細胞系相關產(chǎn)品:Mono Mac6細胞、BT549細胞、H-2405細胞
Vero-76細胞系相關產(chǎn)品:Jurkat Clone E6-1細胞、KMS26細胞、NCIH1694細胞
HC11 Mammary Epithelium細胞系相關產(chǎn)品:F98細胞、H-1734細胞、4T1.2細胞
H1650_CO細胞系相關產(chǎn)品:SNGM細胞、SW948細胞、H295R細胞
GTL 16細胞系相關產(chǎn)品:FO [Mouse myeloma]細胞、UPCISCC154細胞、MDAMB436細胞
B16-BL6細胞系相關產(chǎn)品:C6661細胞、COLO 357細胞、HLEC-B3細胞
Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞系相關產(chǎn)品:Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、201T細胞、Hs695T細胞
HEK 293細胞系相關產(chǎn)品:WM266細胞、PaTu8988s細胞、LN382細胞
C3H/10T1/2 CL8細胞系相關產(chǎn)品:MT4細胞、NUGC3細胞、MCF.10A細胞
SK-MEL-31 Cell:人惡性黑色素瘤細胞系
J774細胞系相關產(chǎn)品:LuCL4細胞、SKM1細胞、H-2066細胞
Calu 6細胞系相關產(chǎn)品:LAN6細胞、H220細胞、K299細胞
TFH細胞系相關產(chǎn)品:RAW 264.7細胞、NU-GC-2細胞、OCILY-10細胞
Helacyton gartleri細胞系相關產(chǎn)品:HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞
P30 OHK細胞系相關產(chǎn)品:Ly1細胞、M-1細胞、SK-MEL-31細胞
IB-RS-2細胞系相關產(chǎn)品:CNE細胞、RIMEC細胞、MDA-MB-435-S細胞
BT 325細胞系相關產(chǎn)品:BCaP-37細胞、KNS-62細胞、DU-4475細胞
Kit-225細胞系相關產(chǎn)品:PLC8024細胞、ST486細胞、NCIH209細胞
HT-22細胞系相關產(chǎn)品:HCC 70細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞、Walker 256細胞
EU-3細胞系相關產(chǎn)品:PANC0203細胞、Vero 76細胞、DHL-5細胞
HeLa S3細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H82細胞、H676B細胞、Mink細胞
Hs 819.T細胞系相關產(chǎn)品:MPVECs細胞、alpha TC1.6細胞、IPLB-Sf21AE細胞
"
關鍵字: SK-MEL-31 Cell:人惡性黑色素瘤細胞系
上海賓穗生物科技有限公司 是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售與服務于一體的專業(yè)生物制品和化學品供應商。公司總部位于上海市莘莊工業(yè)區(qū),擁有現(xiàn)代化辦公大樓、標準實驗室與生產(chǎn)廠房。上海賓穗生物科技有限公司擁有一支由教授和博士為核心的技術團隊,提供超過100000的生物、化學產(chǎn)品,產(chǎn)品涵蓋化學、醫(yī)藥、材料、能源、生物等科研領域。公司秉承“客戶至上、服務一流”的發(fā)展理念,致力于將優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務提供給客戶。上海賓穗生物科技有限公司整合眾多的優(yōu)勢市場資源,以匠心服務廣大客戶,我們可以為客戶提供Binsui、TCI等國內(nèi)外各種品牌的高品質(zhì)試劑產(chǎn)品,充分滿足客戶的試劑需求。