"MC3T3 Cell:小鼠前成骨細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
RT 112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC/PRF5細胞、H-2291細胞、KYSE0520細胞
HCT-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293E細胞、J-82細胞、U373 MG細胞
526-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMAc-Serum Free細胞、LLC-MK2細胞、JROECL 19細胞
PK-136細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1876細胞、NCI-H295細胞、DHL-8細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
MC3T3 Cell:小鼠前成骨細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
如何進行細胞復蘇:1)從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時搖動令其盡快融化;2)從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻;3)離心,1000rpm,5min;4)棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞,計數(shù),調(diào)整細胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);5)次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。【溫馨提醒】1)從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存,但為對數(shù)生長期細胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液;2)將凍存管放入液氮容器或從中取出時,要做好防護工作(戴棉手套),以免凍傷;3)凍存和復蘇用新配制的培養(yǎng)液。細胞復蘇的時候,有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后,放在室溫下,經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸,該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎?其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細節(jié)要注意的?一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口,再稍擰松蓋子,再放37度水浴鍋中搖溶,在將細胞轉(zhuǎn)移到裝有37度預熱過的培養(yǎng)基的試管中,迅速離心,再用培養(yǎng)基洗一遍。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
C3H/10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIMT-1細胞、SF763細胞、RTMC細胞
3T3-Swiss albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC/TERT1細胞、SVG(P12)細胞、ANA-1細胞
LNCaP-C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C6細胞、QGY細胞、HT29細胞
IPECJ2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC-20細胞、CAL-12T細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞
3T3-A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBE細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、SupB15WT細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
MC3T3 Cell:小鼠前成骨細胞系
細胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項:1.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈,消毒半小時以上。2.進入凈化室前先關(guān)閉紫外燈,打開超凈臺風機,等待30min以上,以排盡臭氧。3.穿好隔離衣,戴好口罩,帽子。4.風淋2分鐘。5.0.1%水泡手,擦干。6.點燃酒精燈;超凈臺內(nèi)應避免放入過多的物品;使用的吸管,滴管,試管,培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。7.打開各類瓶蓋前先過火,以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰,鑷子使用前應經(jīng)火焰燒灼。8.水平式風機的超凈臺,應使瓶口斜置,應盡量避免瓶口敞開直立。9.同一根吸管或滴管不應連續(xù)用于幾個不同的細胞系;吸取培養(yǎng)基的吸管應離開培養(yǎng)瓶或試管口0.5cm,避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口;以防止細胞系的互相混雜污染。10.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體,立即用酒精棉球擦凈。11.操作完畢后恢復工作臺面。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
SW626細胞系相關(guān)產(chǎn)品:XWLC-05細胞、VMRC-LCD細胞、HCV29細胞
Hs 578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-AS細胞、F98細胞、WM 239-A細胞
RCM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J-82細胞、RMS 1598細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞
HUCCT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-343-T細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞、Bx-PC3細胞
HaCaT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO-1-N-1細胞、Be Wo細胞、MGSMC細胞
TM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS174細胞、3T3-A31細胞、746T細胞
P19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE140細胞、LN-18細胞、L 363細胞
MC3T3 Cell:小鼠前成骨細胞系
SCC154細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Plaepi 34細胞、VM-CUB1細胞、BHT101細胞
TE-85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calf Pulmonary Artery 47細胞、MDCK Type II細胞、COLO-320細胞
OCM-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A.704細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、OCILY3細胞
Hs 940.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CoC1細胞、TE10細胞、MEF (CF-1)細胞
UPCISCC154細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FTC133細胞、SK-N-BE(1)n細胞、138 MG細胞
DR2R1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J細胞、50.B1細胞、Tregs細胞
Duck embryo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC12細胞、SCLC21H細胞、Sp 2817細胞
OSC-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2_C細胞、MDA 1386細胞、CL 1-0細胞
LLC-MK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、PC3細胞、L-M (TK-)細胞
LLC-MK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、PC3細胞、L-M (TK-)細胞
NCI-H2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1651細胞、BNL-HCC細胞、H-441細胞
HS-766-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuCCT-1細胞、COLO 394細胞、ONS-76細胞
P3.NS-1/1.Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJAB細胞、SKUT1細胞、B16F1細胞
NCIH1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-10A細胞、Hs 683細胞、A-172MG細胞
SUM 102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss-3T3細胞、ID8/MOSEC細胞、NFS60細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-869細胞、SK-Col-1細胞、D341細胞
Walker/LLC-WRC256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1-E細胞、CL1-0細胞、Vero 76 clone E-6細胞
A-101D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-3細胞、FRTL-5 Cl 2細胞、TE-15細胞
OSKM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMEC/D3細胞、Hs 839.T細胞、CCD-841-CoTr細胞
McA-RH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1373細胞、SUM-149細胞、SMC-1細胞
NCI-H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8.653細胞、HS-940-T細胞、MCMEC細胞
NCI-H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8.653細胞、HS-940-T細胞、MCMEC細胞
HCC1954 BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、HPC-Y5細胞、SW 900細胞
LIM 1215細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87細胞、DF1細胞、H1573細胞
RCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM933細胞、NCI-SNU-423細胞、HEK 293-F細胞
U266 Bl細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1651細胞、TM4細胞、SU.86.86細胞
Hs281T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBdSMC細胞、T9細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞
Loucy細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2/C3A細胞、Mc Ardle 7777細胞、Hs294T細胞
HuNS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHFK細胞、MPASMC細胞、ACHN細胞
SW948細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1-5細胞、Ramos 2G6.4C10細胞、Hs895T細胞
H4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M1細胞、RPMI-2650細胞、SNU761細胞
RKOE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 190PT細胞、BCECs細胞、BC-3-H-I細胞
KP-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-S細胞、Colo-206F細胞、NCI-SNU-16細胞
TMK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGHU3細胞、SF 295細胞、BOWES細胞
CL-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA134細胞、IOSE-29細胞、Hep 3B細胞
MKN 45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hRPTC細胞、SK-MEL-2-LUC細胞、T2細胞
697細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC3細胞、CCD 841 CoN細胞、NCI-H841細胞
Fu97細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRC/Y細胞、T 84細胞、LN 229細胞
LA-N-6(OAN)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel RM細胞、MHCC97H細胞、NG 108-15細胞
TGW-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP細胞、OCI Ly10細胞、TE-85細胞
HEL-92-1-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-70細胞、Panc-3_27細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞
MDA 435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP2細胞、A-375.S2細胞、T47D細胞
MLOY4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞
MC3T3 Cell:小鼠前成骨細胞系
SUDHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98-G細胞、NEC-8細胞、KP 4細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM TK negative細胞、MDAMB175細胞、OVCAR 5細胞
Det. 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H19-7細胞、SNU620細胞、MES 13細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-869細胞、SK-Col-1細胞、D341細胞
CLONE M3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag 8.653細胞、A3細胞、HPAF-II細胞
RIN14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFSC-8B細胞、SCC-15細胞、LC-1-sq細胞
NCI-H2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、BHT101細胞、COLO-824細胞
NPA 87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6TG細胞、32Dcl3細胞、Swiss 3T3細胞
Roswell Park Memorial Institute 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y1細胞、H-2087細胞、SRA 01/04細胞
H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIMEC細胞、SW 403細胞、RCC-10RGB細胞
MDA MB 361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3255_DA細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、HFF-1細胞
HCC-2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT RPE-1細胞、SK-MEL 28細胞、746T細胞
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