"Ha Fe Cell:人羊膜細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
CL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞、MGH-U3 (RN)細(xì)胞、RC13細(xì)胞
NCI-H2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_08_13細(xì)胞、Hs606T細(xì)胞、3T3細(xì)胞
HS 1.Tes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCFs細(xì)胞、NCI-747細(xì)胞、NCI-H-69細(xì)胞
BEL-7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1793細(xì)胞、OSKM-1細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Ha Fe Cell:人羊膜細(xì)胞系
細(xì)胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié):懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度,重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細(xì)胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細(xì)胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉(zhuǎn)速,將造成細(xì)胞死亡;細(xì)胞之接種密度為何?依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無法生長之一重要原因;細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細(xì)胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細(xì)胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機(jī)會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細(xì)胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細(xì)胞欲冷凍保存時,細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度?冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細(xì)胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
RPMI 8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC16 [Human hybrid]細(xì)胞、NCIH1650細(xì)胞、PANC-1細(xì)胞
QSG7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKUT-1細(xì)胞、CCRF-SB細(xì)胞、PGBE1細(xì)胞
MDA-MB-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM/0細(xì)胞、MRASMC細(xì)胞、SCC090細(xì)胞
HMEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICCF細(xì)胞、5637細(xì)胞、APRE-19細(xì)胞
SK RC 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1-P細(xì)胞、3T3-J2細(xì)胞、P3X63Ag8細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
Ha Fe Cell:人羊膜細(xì)胞系
貼壁細(xì)胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細(xì)胞先脫落,對腫瘤細(xì)胞來說,這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞!
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
CEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS 2B細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞、Calu-1細(xì)胞
NL20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN m5F細(xì)胞、MLFC細(xì)胞、LTEP-sm 1細(xì)胞
SW-756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD-18細(xì)胞、H250細(xì)胞、PTK2細(xì)胞
RM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH208細(xì)胞、RAMSCs細(xì)胞、CFPAC-1細(xì)胞
TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2106細(xì)胞、130 T細(xì)胞、PLC-8024細(xì)胞
MOLP-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H157細(xì)胞、H-510A細(xì)胞、HCC-2935細(xì)胞
Vero from pool #76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM-3細(xì)胞、DoTc2 4510細(xì)胞、HCE-2 [50.B1]細(xì)胞
Ha Fe Cell:人羊膜細(xì)胞系
TE-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leydig細(xì)胞、KU1919細(xì)胞、T.T細(xì)胞
BC-3H-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H766T細(xì)胞、BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、MCA 205細(xì)胞
A375.S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-153細(xì)胞、NH6細(xì)胞、NOZAWA細(xì)胞
IOSE29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32r細(xì)胞、SCC7細(xì)胞、CORL26細(xì)胞
Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04671細(xì)胞、RKOE6細(xì)胞、CW2細(xì)胞
H1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVSAHO細(xì)胞、LC-2-Ad細(xì)胞、SkChA1細(xì)胞
HSC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT125細(xì)胞、HEC251細(xì)胞、NKM-1細(xì)胞
KYSE 520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2122細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞、NCIH889細(xì)胞
SK MEL 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Human Colon細(xì)胞、NP69細(xì)胞、HREC細(xì)胞
SK MEL 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Human Colon細(xì)胞、NP69細(xì)胞、HREC細(xì)胞
OCI/AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE-2c細(xì)胞、MPC11細(xì)胞、OCI/AML4細(xì)胞
CHO-ori細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL 62891細(xì)胞、X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞、HCASMC細(xì)胞
B16 melanoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:As-PC1細(xì)胞、End1/E6E7細(xì)胞、H889細(xì)胞
NCIH196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES 2細(xì)胞、AZ521細(xì)胞、ZR75-1細(xì)胞
Cloudman M3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dami細(xì)胞、Hs600T細(xì)胞、H1650細(xì)胞
8305-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞、TGHAVSMC細(xì)胞、MCF12F細(xì)胞
LS-174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-II-EC3細(xì)胞、NCIH1869細(xì)胞、SKCol1細(xì)胞
FRO 81-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-RPE1細(xì)胞、Ect1/E6E7細(xì)胞、IMCD3細(xì)胞
A-101D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-3細(xì)胞、FRTL-5 Cl 2細(xì)胞、TE-15細(xì)胞
OSKM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMEC/D3細(xì)胞、Hs 839.T細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞
Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2BBe細(xì)胞、Eca-109細(xì)胞、H157細(xì)胞
HSC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61 5.3細(xì)胞、HLMVEC細(xì)胞、HT1376細(xì)胞
Det. 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H19-7細(xì)胞、SNU620細(xì)胞、MES 13細(xì)胞
P3J.HR1K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-510A細(xì)胞、B16BL6細(xì)胞、SUSM1細(xì)胞
SF-295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSMC細(xì)胞、SUM-149PT細(xì)胞、Ly8細(xì)胞
PK 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC-MSB1細(xì)胞、HCC95細(xì)胞、Panc 3.27細(xì)胞
VeroC1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞、EST81細(xì)胞
L-02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4IIE細(xì)胞、H-2330細(xì)胞、ECC 12細(xì)胞
PC3-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 611.T細(xì)胞、H-647細(xì)胞、HO-8910細(xì)胞
CG-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 4.03細(xì)胞、K562/ADP細(xì)胞、H647ell細(xì)胞
D-283 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KALS1細(xì)胞、HCC1954 BL細(xì)胞、RA-FLSs細(xì)胞
MDA-MB-134-VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB436細(xì)胞、TGW-nu細(xì)胞、RAOEC細(xì)胞
H1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc5.04細(xì)胞、NCIH1395細(xì)胞、190PT細(xì)胞
T84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-2780細(xì)胞、KU 812細(xì)胞、GTL16細(xì)胞
BIC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1563細(xì)胞、Adeno 293細(xì)胞、Panc-3_27細(xì)胞
HF-91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-7細(xì)胞、10T1/2細(xì)胞、Ramos-RA1細(xì)胞
PECAPJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT細(xì)胞、C518細(xì)胞、Hs611T細(xì)胞
MPC-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL9細(xì)胞、MC 116細(xì)胞、H1355細(xì)胞
526mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1(C4)細(xì)胞、RPMI7951細(xì)胞、HD11細(xì)胞
NCIH1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 480細(xì)胞、Tb 1 Lu細(xì)胞、ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞
NCIH1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 480細(xì)胞、Tb 1 Lu細(xì)胞、ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞
KTC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM39細(xì)胞、3T3 Swiss Albino細(xì)胞、HCC-94細(xì)胞
MOLP2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA231細(xì)胞、Panc2.03細(xì)胞、PTK1細(xì)胞
Ha Fe Cell:人羊膜細(xì)胞系
RPE1-hTERT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1993細(xì)胞、FRTL 5細(xì)胞、A2780S細(xì)胞
EB-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rainbow Trout Embryo細(xì)胞、U251n細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞
H-727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293A細(xì)胞、U251細(xì)胞、PK-13細(xì)胞
CCD33Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-47D細(xì)胞、U118-MG細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞
H2135細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1143細(xì)胞、Pa14C細(xì)胞、OCI-Ly19細(xì)胞
H2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H889細(xì)胞、T-84細(xì)胞、PLA802細(xì)胞
IM-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW948細(xì)胞、CPA47細(xì)胞、NCL-H548細(xì)胞
C-33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PVEC細(xì)胞、293c18細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞
NCIH2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RTMC細(xì)胞、ssMCF-7細(xì)胞、CAL148細(xì)胞
MDA231-LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CSQT-2細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞
Med 341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:373MG細(xì)胞、HG2855細(xì)胞、U-87 MG細(xì)胞
P31-FUJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:801-D細(xì)胞、CNE-2Z細(xì)胞、MC-26細(xì)胞
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