"NGP Cell:人神經(jīng)母細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
U-87 MG細胞系相關產(chǎn)品：LAC細胞、L-6TG細胞、ST 486細胞
HCC-1569細胞系相關產(chǎn)品：WSUDLCL2細胞、AN3 CA細胞、Hs606T細胞
WIL2S細胞系相關產(chǎn)品：TGW細胞、HOC細胞、SF-539細胞
H-292細胞系相關產(chǎn)品：WEHI164細胞、PC3M細胞、NCI-H-128細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NGP Cell:人神經(jīng)母細胞系
細胞消化過程總結：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MDA-MB453細胞系相關產(chǎn)品：CCD966SK細胞、NCI-H1734細胞、NCIH2135細胞
MDA-MB-361細胞系相關產(chǎn)品：LICR-LON-HN6細胞、FU-MMT-1細胞、Walker256-TC細胞
ME16C細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H250細胞、Hs-611-T細胞、3T3J2細胞
P3/NS1/Ag4-1細胞系相關產(chǎn)品：2008細胞、AA-Mel細胞、SMMC-7721細胞
U266細胞系相關產(chǎn)品：MV-4-11細胞、H1993細胞、AZ-521細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
NGP Cell:人神經(jīng)母細胞系
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題。總結２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
GTL-16細胞系相關產(chǎn)品：H35 Reuber細胞、SNG-M細胞、Colo205細胞
A 72細胞系相關產(chǎn)品：AC29細胞、SW-579細胞、UPCISCC154細胞
WEHI231細胞系相關產(chǎn)品：LICR-HN6細胞、McA-RH 7777細胞、VMRC-RCZ細胞
BE(2)-M17細胞系相關產(chǎn)品：H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞
ZR-75-30細胞系相關產(chǎn)品：EBC-1/original細胞、SiHa細胞、EAC-E2G8細胞
Vero 76細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE(1)細胞、HM細胞、PG-4 S+L-細胞
Hs-940細胞系相關產(chǎn)品：UCLA RO-81-A-1細胞、SK-Hep1細胞、751-NA-15細胞
NGP Cell:人神經(jīng)母細胞系
PLC/PRF5細胞系相關產(chǎn)品：KYSE 510細胞、SUPB15細胞、LC1sq細胞
NCTC929細胞系相關產(chǎn)品：OAW-42細胞、GM07404細胞、SK-N-BE(1)n細胞
EoL-1細胞系相關產(chǎn)品：MEG-01細胞、U-138-MG細胞、C-Li-7細胞
MAC1細胞系相關產(chǎn)品：MuM-2B細胞、HCC-1428細胞、SACC-LM細胞
NTERA-2cl.D1細胞系相關產(chǎn)品：DHBE細胞、MDA PCa 2b細胞、KCL22S細胞
H1092細胞系相關產(chǎn)品：MM134細胞、C166細胞、MCF/Adr細胞
COS7細胞系相關產(chǎn)品：BALB/3T3 cl. A31細胞、HR1K細胞、Vx2細胞
Ca761細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2170細胞、ST細胞、PTK 1細胞
NCI-SNU-C2B細胞系相關產(chǎn)品：X63-Ag8細胞、SUM 52細胞、GL261細胞
NCI-SNU-C2B細胞系相關產(chǎn)品：X63-Ag8細胞、SUM 52細胞、GL261細胞
HCT116細胞系相關產(chǎn)品：Rat podocyte細胞、MKN 45細胞、SK-N-BE(2)C細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞系相關產(chǎn)品：SNU-869細胞、SK-Col-1細胞、D341細胞
NCIH520細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL-16細胞、A 172細胞、DC2.4細胞
SKNO-1細胞系相關產(chǎn)品：HEC-151細胞、IEC-18細胞、C32 [Human melanoma]細胞
SKMEL5細胞系相關產(chǎn)品：C57 Mouse Tumor 93細胞、PC-3M-1E8細胞、293-EBNA1細胞
T 98 G細胞系相關產(chǎn)品：FHs74Int細胞、MLA144細胞、MPC-83細胞
V79-4細胞系相關產(chǎn)品：LAN5細胞、Tissue Culture-1細胞、HPAFII細胞
HKC細胞系相關產(chǎn)品：SW-982細胞、PL9細胞、BL1339細胞
MALME.3M細胞系相關產(chǎn)品：P3J細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、SP-2細胞
SKG IIIa細胞系相關產(chǎn)品：HS578T細胞、NIH:OVCAR-3細胞、WEHI 3細胞
NCIH209細胞系相關產(chǎn)品：LA-N-5細胞、Capan 1細胞、VE細胞
Jurkat E6-1細胞系相關產(chǎn)品：CLL-CII細胞、Colon-26細胞、HB 611細胞
Panc813細胞系相關產(chǎn)品：Vero-E6細胞、HPB-ALL細胞、SuDHL 2細胞
Tu-212細胞系相關產(chǎn)品：SNU-475細胞、NCI-H526細胞、V79-4細胞
MFE-280細胞系相關產(chǎn)品：HSAS3細胞、JB6Cl30細胞、L- cell細胞
ATDC-5細胞系相關產(chǎn)品：KMST-6細胞、OVCAR-3細胞、MBMEC細胞
HCMEC(BL12-H)細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR10細胞、NCI-H1404細胞、AMO-1細胞
NHEK細胞系相關產(chǎn)品：MDA 435細胞、526 mel細胞、OCI-Ly 18細胞
SG231細胞系相關產(chǎn)品：K7M2細胞、32Dc3細胞、MRMT-1細胞
NTera 2細胞系相關產(chǎn)品：N1E115細胞、NK62a細胞、NCI-H295細胞
CCD 966SK細胞系相關產(chǎn)品：MS 751細胞、DHL8細胞、TGBC11TKB細胞
U937細胞系相關產(chǎn)品：Kasumi-6細胞、Rat Lung-65細胞、SF 126細胞
HFLS-OA細胞系相關產(chǎn)品：HFF-1細胞、L5178-R細胞、COV 434細胞
RL95細胞系相關產(chǎn)品：MMVECs細胞、P30/0HK細胞、OCI/AML-2細胞
H-87細胞系相關產(chǎn)品：Panc813細胞、Karpas299細胞、ZR75-30細胞
BEL 7405細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H128細胞、D-341細胞、IOSE80UBC細胞
HRA 19細胞系相關產(chǎn)品：Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NCI-H2444細胞、L02細胞
V 79-4細胞系相關產(chǎn)品：FHs 74 Int細胞、K 562細胞、AU-565細胞
BT 325細胞系相關產(chǎn)品：BCaP-37細胞、KNS-62細胞、DU-4475細胞
CMT 167細胞系相關產(chǎn)品：LLC-PK(1)細胞、VERO76細胞、RL95-2細胞
SUDHL-8細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL-1細胞、OCI-Ly18細胞、LS123細胞
22Rv1細胞系相關產(chǎn)品：MDA.MB.231細胞、GM04680細胞、UT-7細胞
G422細胞系相關產(chǎn)品：SKGT2細胞、B16F1細胞、H-2170細胞
NGP Cell:人神經(jīng)母細胞系
OVCAR-5細胞系相關產(chǎn)品：R 1610細胞、Lieming Xu-2細胞、VSC4.1細胞
U-251-MG細胞系相關產(chǎn)品：SW-962細胞、RPTEC TERT1細胞、Hs840T細胞
RGC6細胞系相關產(chǎn)品：SF-295細胞、MFE 296細胞、KYSE 180細胞
GA-10-Clone-4細胞系相關產(chǎn)品：MGH-U3細胞、NCIH2135細胞、SKLMS-1細胞
HEK293-F細胞系相關產(chǎn)品：P3-X63Ag8.653細胞、SKG3A細胞、B4G12細胞
HT1197細胞系相關產(chǎn)品：190PT細胞、MKN1細胞、A-375細胞
H3255_DA細胞系相關產(chǎn)品：HCS2/8細胞、KPL-4細胞、OCI Ly3細胞
KMS18細胞系相關產(chǎn)品：NS20-Y細胞、UCLA NPA-87-1細胞、JHH-7細胞
SNU-739細胞系相關產(chǎn)品：A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞
P3/X63/Ag8細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1666細胞、HFSF細胞、CAL-62細胞
SUP-B15細胞系相關產(chǎn)品：NK-92.05細胞、PC-3M 2B4細胞、Hs 742.T細胞
Natural Killer-92細胞系相關產(chǎn)品：BrCL15細胞、Kit225 K6細胞、MN60細胞
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關鍵字： NGP Cell:人神經(jīng)母細胞系
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