"NCI-H2172 Cell:人非小細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
MA-c細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H69/P細胞、UMUC-3細胞、Alexander cells細胞
HEL-299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1細胞、TE3A細胞、NCIH810細胞
H-661細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-4M細胞、MKN7細胞、HCC1359細胞
RL-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266S細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞、MDA468細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H2172 Cell:人非小細胞肺癌細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非常考究你的功夫的！細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３-１：６傳代；每周換液２-３次。
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復(fù)１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HEK293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-2細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞、SupT1細胞
Caki2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2C細胞、OKT 3細胞、CAL-78細胞
Kupffer細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-729-T細胞、HN 4細胞、SUM 190PT細胞
HCC1954 BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、HPC-Y5細胞、SW 900細胞
CV-1.K細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVMANA細胞、Ku812F細胞、RH8994細胞
細胞生長特性：貼壁生長
NCI-H2172 Cell:人非小細胞肺癌細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
J82COT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MES 1細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞、SJCRH30細胞
Nthy-ori 3-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 636 T細胞、LYR細胞、L 929細胞
Tu177細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT64細胞、Mhh-Call 2細胞、HPDE細胞
RBVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML2細胞、HDLM2細胞、HBZY 1細胞
H-2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK 15細胞、NuTu-19細胞、HCC-1569細胞
Detroit 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL6細胞、PaTu 8988s細胞、Hs746T細胞
SNU354細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI522細胞、PK (15)細胞、BN-CL2細胞
NCI-H2172 Cell:人非小細胞肺癌細胞系
NCI-H1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS2B細胞、Leukemia 1210細胞、LCLC103H細胞
EBC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 04.03細胞、NK 10a細胞、KNS-62細胞
H1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jiyoye細胞、GM03671C細胞、GM2131細胞
Hs695T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Basophilic Leukemia-1細胞、COLO320/DM細胞、SUPM2細胞
HUT 226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2185細胞、HCoEpiC細胞、CMT 167細胞
CT-26 WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 697細胞、CAL33細胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞
Roswell Park Memorial Institute 2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LPC-H12細胞、NCI-H1417細胞、Duke University 145細胞
EFM-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES細胞、RD-ES細胞、HT-115細胞
CG4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu 8988s細胞、PLC/PRF/5細胞、HCC1954-BL細胞
CG4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu 8988s細胞、PLC/PRF/5細胞、HCC1954-BL細胞
SJCRH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-3細胞、RCC-10RGB細胞、NCI660細胞
Colo-201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92 MI細胞、BEL 7404細胞、Ha Fe細胞
H-1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCO細胞、CHP 212細胞、MCFs細胞
PG-4(S+L-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F36P細胞、NCI-H157細胞、VCaP細胞
HTR-8/SVneo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DV-90細胞、hCMEC/D3細胞、PC-12細胞
HCT15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-3J細胞、HuT 102細胞、OVCAR 8細胞
B/C3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1672細胞、HMC細胞、HNE3細胞
Hs-746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOZAWA細胞、CCRF/CEM-C7細胞、EAhy926細胞
H-2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML4細胞、HCC827細胞、H-128細胞
T-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ML2細胞、Walker 256細胞、BL-6細胞
A2780CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4/1細胞、THLE2細胞、B16 melanoma細胞
A2780CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4/1細胞、THLE2細胞、B16 melanoma細胞
Panc5.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs281T細胞、H2342細胞、TOV21細胞
CAL 120細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1.K細胞、D562細胞、MRC9細胞
REC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-82細胞、MDA-MB 361細胞、SY5Y細胞
SNU-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU01細胞、HCT_116細胞、KYSE-50細胞
NIH:OVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK 52E細胞、Epstein-Barr-2細胞、SR細胞
NCIH1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H23細胞、AGS細胞、786-0WT細胞
Mc Ardle 7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC-PRF-5細胞、MBMEC細胞、SUDHL-6細胞
HFE-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VSMC細胞、H1876細胞、T 84細胞
Vero 76 clone E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO 27細胞、HMCB細胞、PaTu-8988s細胞
SCLC-21H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPCA-1細胞、NCIH2107細胞、231-luc細胞
aTC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115mel細胞、P31FUJ細胞、RCC-4細胞
MH-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、PC12(高分化)細胞、KE39細胞
B16 BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC2細胞、HeLa/S3細胞、Jurkat-77細胞
L5178Y-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mIMCD3細胞、RT-BM細胞、HK2細胞
PIG3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 29細胞、786-O RCC細胞、JURKAT E-61細胞
Hs 706.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC4細胞、HCC1438細胞、HCC-1599細胞
Hce8693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-154細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞、CMT-167細胞
TE-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4:11細胞、CHOS細胞、NCI-H820細胞
CAL-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mRMEC細胞、KYSE180細胞、HS766T細胞
COLO-320-DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GEO細胞、KYSE-520細胞、SW1353細胞
Ly1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、Sp2/0細胞、NCIH847細胞
NCI-H2172 Cell:人非小細胞肺癌細胞系
BLO11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H508細胞、H522細胞、C918細胞
MDCK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ku812F細胞、HS578T細胞、Swiss/3T3細胞
H3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-4細胞、KP4細胞、KU-812F細胞
H1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV1細胞、HT55細胞、NL20細胞
Hs 636 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNG-M細胞、Hs.27細胞、A-101D細胞
MILE SVEN 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3 CA細胞、Ha Fe細胞、GM04154細胞
JJN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC1細胞、CW2細胞、UMUC14細胞
GLAG-66細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm 13細胞、RPMI7666細胞、SV-HUC-1細胞
ID8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPI-2I細胞、RA 1細胞、FHs 74 Int細胞
LTEPa2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-484細胞、PTK-1細胞、MADB106細胞
LS174細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIBEC細胞、33604細胞、H1838細胞
SK LU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EMT6細胞、C2A細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞
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