"NCI-H1915 Cell:人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
PANC0403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-540細(xì)胞、RGE細(xì)胞、A704細(xì)胞
SUM102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CPAE細(xì)胞、GS9L細(xì)胞、H2.35細(xì)胞
HCEC-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-637細(xì)胞、HSF2細(xì)胞、Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞
CA46細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-69細(xì)胞、C22 (Clara)細(xì)胞、Kasumi-6細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H1915 Cell:人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
因?yàn)榧?xì)胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細(xì)胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細(xì)胞,單個細(xì)胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話,傳代后細(xì)胞是不能貼壁的,這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會死亡。所以,消化傳代的時候一定要將細(xì)胞消化成單個單個的獨(dú)立狀態(tài),這個啊是非常考究你的功夫的!細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個,因?yàn)樗麤]有受力點(diǎn)了。很難找到受力點(diǎn)讓你對他吹打的力分散開細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開,受力點(diǎn)就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點(diǎn)分散開。這個是很重要的一點(diǎn)。尤其是對于某些細(xì)胞這一點(diǎn)就是他活去死的致命點(diǎn)。像Caco-2細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點(diǎn)就是一定不能等到細(xì)胞長滿的時候才去消化傳代。要在細(xì)胞長到70%左右的時候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞,你在洗的時候如果是用無血清1640去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細(xì)胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點(diǎn)。先補(bǔ)充這么多,還會后續(xù)更新。再補(bǔ)充一點(diǎn):傳代時PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細(xì)胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時間,等到細(xì)胞一個個分離開來的時候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時間,不能時間太過了,要不然損傷細(xì)胞,細(xì)胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候,或者臨時沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細(xì)胞。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:每周換液2—3次
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細(xì)胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時如無異常情況,請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細(xì)胞多久能到,是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細(xì)胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?,則采用郵寄凍存細(xì)胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Clone 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv1Lu細(xì)胞、HET1A細(xì)胞、N1E-115細(xì)胞
Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GH3細(xì)胞、DrG細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞
Nthy-ori 3-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 636 T細(xì)胞、LYR細(xì)胞、L 929細(xì)胞
HCV 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly19細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞
McA-RH8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN1細(xì)胞、PL-45細(xì)胞、Mel624細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
NCI-H1915 Cell:人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細(xì)胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因?yàn)椴僮骱唵?,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細(xì)胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格,很多人容易忘卻這個事情,因?yàn)檫@個東西流程長。6、如果你細(xì)胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細(xì)胞都污染一個細(xì)菌的話,這個細(xì)菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當(dāng)會事。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
Astrocyte type I clone細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-1細(xì)胞、H2.35細(xì)胞、SHI1細(xì)胞
U266 Bl細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1651細(xì)胞、TM4細(xì)胞、SU.86.86細(xì)胞
Y-79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBT2細(xì)胞、DITNC1細(xì)胞、CX-1細(xì)胞
143TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)C細(xì)胞、SK Hep1細(xì)胞、WRL-68細(xì)胞
DHBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW900細(xì)胞、Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞、Hep 3B2_1-7細(xì)胞
UO-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Kidney-2細(xì)胞、PC2細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞
Alexander cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293 c18細(xì)胞、M2-10B4細(xì)胞、CAL 85-1細(xì)胞
NCI-H1915 Cell:人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
BMDC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KGN細(xì)胞、AHH-1細(xì)胞、MDA MB 231細(xì)胞
GM02219細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMY1022細(xì)胞、KP-2細(xì)胞、MDA 231-LM2-4175細(xì)胞
Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA157細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞、SNU119細(xì)胞
CD-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 melanoma F10細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞、RAEC細(xì)胞
M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL-28細(xì)胞、T1-73細(xì)胞、Douglas Foster-1細(xì)胞
NCI-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT細(xì)胞、NCIH378細(xì)胞、HCC0038細(xì)胞
MKN74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AtT20細(xì)胞、NCI-H838細(xì)胞、VeroC1008細(xì)胞
TE13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1944細(xì)胞、GM05372細(xì)胞、CT26.CL25細(xì)胞
Malme-3 M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS-62細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞
Malme-3 M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS-62細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞
Melanoma 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T. T細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞、OVCAR5細(xì)胞
SJ-RH30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-7細(xì)胞、ZR75-1細(xì)胞、HFB細(xì)胞
PAN 02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFM-223細(xì)胞、MTEC1細(xì)胞、RAW-264.7細(xì)胞
Plaepi 34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA PCa 2b細(xì)胞、NBL_S細(xì)胞、CA922細(xì)胞
CL-40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE-3細(xì)胞、HIBEC細(xì)胞、NG108-15細(xì)胞
SNU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K-1735細(xì)胞、SNU449細(xì)胞、MM-1S細(xì)胞
C-28I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPPVEC細(xì)胞、H-1650細(xì)胞、NCI-H1993細(xì)胞
RS 4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC5細(xì)胞、H-1404細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞
2PK-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC-3-VGH細(xì)胞、MLA 144細(xì)胞、A 2780 CP細(xì)胞
SKLU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞、H2085細(xì)胞、CNE2細(xì)胞
H3255細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC-4細(xì)胞、KP4細(xì)胞、KU-812F細(xì)胞
SW 620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-650細(xì)胞、SKMEL2細(xì)胞、Hs695細(xì)胞
JEG-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-295R細(xì)胞、GM02131A細(xì)胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞
Hs934T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225-K6細(xì)胞、hRPTC細(xì)胞、HEK293F細(xì)胞
LS-513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1792細(xì)胞、OCIAML4細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞
HCC2279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuCC-T1細(xì)胞、NCIH446細(xì)胞、LIM-1215細(xì)胞
KRC/Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM5細(xì)胞、GT1-1細(xì)胞、P31/FUJ細(xì)胞
SW 1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OB2細(xì)胞、SKMEL1細(xì)胞、U-2 OS細(xì)胞
Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-20細(xì)胞、MKN-74細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞
ROS 17/28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-427細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞、Ly19細(xì)胞
L Wnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK1細(xì)胞、FRO細(xì)胞、Ball 1細(xì)胞
GLC82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 929細(xì)胞、Panc5.04細(xì)胞、TE-8細(xì)胞
NCIH1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THEECs細(xì)胞、118 MG細(xì)胞、RPMC細(xì)胞
HConEpic細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76 clone E-6細(xì)胞、KP-N-RT細(xì)胞、NCIH929細(xì)胞
Hepatoma-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H522細(xì)胞、Colo320細(xì)胞、B-104細(xì)胞
SL-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB39細(xì)胞、LED-WiDr細(xì)胞、E0771細(xì)胞
HFL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3細(xì)胞、COLO-684細(xì)胞、SKO-007細(xì)胞
TCam 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320-HSR細(xì)胞、OCI-Ly 7細(xì)胞、LNT-229細(xì)胞
Human Kidney-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1975細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞、H-1876細(xì)胞
B-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-86-86細(xì)胞、U-2 OS細(xì)胞、H1975細(xì)胞
NEC8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞、KYSE410細(xì)胞
BT.549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1755細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞、DV90細(xì)胞
HTori-3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL-7405細(xì)胞、TEC細(xì)胞、P3HR-1細(xì)胞
NCI-H1915 Cell:人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
SU-DHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs695細(xì)胞、HEC1B細(xì)胞、Mono-Mac-6細(xì)胞
FRH-0201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞、H-125細(xì)胞、SCLC-21H細(xì)胞
NTera2 cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu8988s細(xì)胞、253J B-V細(xì)胞、CoC1細(xì)胞
NCI-H2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2286細(xì)胞、HC11細(xì)胞、FAT細(xì)胞
COLO 738細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 98 G細(xì)胞、Hs 688(A).T細(xì)胞、P560細(xì)胞
A-72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-157細(xì)胞、aTC1 Clone 6細(xì)胞、NU-GC-4細(xì)胞
HCC-1187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:High 5細(xì)胞、Wistar Institute-38細(xì)胞、OCI-Ly8細(xì)胞
P3/X63/Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-5細(xì)胞、CTLL2細(xì)胞、CD18/HPAF細(xì)胞
293H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMC-1細(xì)胞、HEK (AD293)細(xì)胞、MSB-1細(xì)胞
Nthy ori 3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKOV-3細(xì)胞、CAMA1細(xì)胞、RDES細(xì)胞
ChaGo K-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCH1細(xì)胞、HIT clone T15細(xì)胞、KYSE 510細(xì)胞
COLO 206細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1650細(xì)胞、OV1-P細(xì)胞、J.E6-1細(xì)胞
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