"NCI-H322 Cell:人肺癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
MUTZ3細胞系相關產(chǎn)品：Vero-76細胞、HCC202細胞、HUCCT1細胞
LL/2(LLc1)細胞系相關產(chǎn)品：CHL/IU細胞、MDA-MB-361細胞、SW 1463細胞
UMUC-3細胞系相關產(chǎn)品：P388D1細胞、Psi-2 DAP細胞、MOLT 16細胞
SK-OV-433細胞系相關產(chǎn)品：KYSE-450細胞、WIL2S細胞、DMS 273細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H322 Cell:人肺癌細胞系
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HEP-3B2細胞系相關產(chǎn)品：CNE-2Z細胞、OCLY8細胞、KMM-1細胞
OCI/AML4細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE-2c細胞、MPC11細胞、OCI/AML4細胞
SSP-25細胞系相關產(chǎn)品：NIH 3T3細胞、MDCK細胞、MCF10-A細胞
Kupffer細胞系相關產(chǎn)品：Hs-729-T細胞、HN 4細胞、SUM 190PT細胞
LUDLU-1細胞系相關產(chǎn)品：HOP62細胞、SY5Y細胞、NCIH1734細胞
細胞生長特性：貼壁生長
NCI-H322 Cell:人肺癌細胞系
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長２４小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
Lewis lung carcinoma line 1細胞系相關產(chǎn)品：MDA157細胞、IPEC-1細胞、SNU119細胞
H-187細胞系相關產(chǎn)品：Hs27F細胞、MDA-MB468細胞、JTC-39細胞
SSP-25細胞系相關產(chǎn)品：NIH 3T3細胞、MDCK細胞、MCF10-A細胞
MUGCHOR1細胞系相關產(chǎn)品：no.11細胞、HCCC-9810細胞、WIL2S細胞
HCCC-9810細胞系相關產(chǎn)品：ES2細胞、CAL-148細胞、MDA-MB-231細胞
SUP-M2細胞系相關產(chǎn)品：SW1271細胞、D283MED細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞
RC92A細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1648細胞、CCC-HEH-2細胞、HUT 125細胞
NCI-H322 Cell:人肺癌細胞系
HPAF-2細胞系相關產(chǎn)品：L Wnt-3A細胞、NCI-H2107細胞、HMC3細胞
MOLM16細胞系相關產(chǎn)品：16-HBE14o細胞、CEM-CCRF細胞、HSF細胞
Hut292細胞系相關產(chǎn)品：H650細胞、GM3569細胞、H-841細胞
CFSC-2G細胞系相關產(chǎn)品：H2405細胞、CCD-18Co細胞、NK 10a細胞
H-1568細胞系相關產(chǎn)品：HKC細胞、Me Wo細胞、NP69SV40T細胞
BT20細胞系相關產(chǎn)品：OV-90細胞、MDAMB361細胞、PANC-04-03細胞
LNCaP clone FGC細胞系相關產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-51細胞、H2330細胞、JKT-1細胞
FL83B細胞系相關產(chǎn)品：H847細胞、SW 837細胞、WM266-4細胞
NCI-H740細胞系相關產(chǎn)品：LA-N-6細胞、AM細胞、Panc_08_13細胞
NCI-H740細胞系相關產(chǎn)品：LA-N-6細胞、AM細胞、Panc_08_13細胞
U-hth74細胞系相關產(chǎn)品：MEL-526細胞、HuT-78細胞、P3HR1細胞
McA-RH7777細胞系相關產(chǎn)品：H-1373細胞、SUM-149細胞、SMC-1細胞
OCI Ly1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1437細胞、P3X63 Ag8.653細胞、SUDHL-2細胞
Leukemia L1210細胞系相關產(chǎn)品：Normal Rat, August 3, 1983細胞、NCI.H226細胞、HCGC細胞
RGB細胞系相關產(chǎn)品：RL細胞、LTEP a2細胞、SK-MES細胞
AU-565細胞系相關產(chǎn)品：LCLC-103H細胞、Clone 166細胞、Panc04.03細胞
WIL2-S細胞系相關產(chǎn)品：COLO 824細胞、TH1細胞、HRPEpiC細胞
CMT-167細胞系相關產(chǎn)品：SCLC21H細胞、Hs-578-T細胞、SU8686細胞
Mc Coy細胞系相關產(chǎn)品：FHs74 Int細胞、526細胞、KASUMI1細胞
CF PAC-1細胞系相關產(chǎn)品：WSU-DLCL(2)細胞、NCI-H841細胞、TE12細胞
CCD33Co細胞系相關產(chǎn)品：T-47D細胞、U118-MG細胞、Leukemia L1210細胞
CCD33Co細胞系相關產(chǎn)品：T-47D細胞、U118-MG細胞、Leukemia L1210細胞
TSUpr1細胞系相關產(chǎn)品：SNU761細胞、UCLA NPA871細胞、KG1細胞
U-CH1細胞系相關產(chǎn)品：CAL33細胞、Rin-M-5F細胞、CT26WT細胞
SKMEL-31細胞系相關產(chǎn)品：NOMO1細胞、EST81細胞、b.End3細胞
SKRC20細胞系相關產(chǎn)品：C32 mel細胞、SV40-HCEC細胞、CCD-112CoN細胞
LY細胞系相關產(chǎn)品：H7721細胞、H35 Reuber細胞、Karpas-422細胞
H226細胞系相關產(chǎn)品：H-1882細胞、SK N SH細胞、CEM.C1細胞
V79細胞系相關產(chǎn)品：MDCKII-WT細胞、SW-948細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞
CA 46細胞系相關產(chǎn)品：D283 Med細胞、WERI-Rb 1細胞、Colo741細胞
MKN-45細胞系相關產(chǎn)品：SHSY-5Y細胞、HPB/ALL細胞、MCF-7細胞
H295R-S1細胞系相關產(chǎn)品：AU565細胞、AN3-CA細胞、HEK-2細胞
HT-55細胞系相關產(chǎn)品：BT-474細胞、NS1/1-Ag4.1細胞、HLEB-3細胞
P3.653細胞系相關產(chǎn)品：Ect1/E6E7細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞、H446細胞
VA-ES-BJ細胞系相關產(chǎn)品：SK-Col-1細胞、SW480細胞、H.Ep. No. 2細胞
H735細胞系相關產(chǎn)品：Hs 934.T細胞、IPLB-Sf21AE細胞、CAL 12細胞
SK-SH-SY5Y細胞系相關產(chǎn)品：QGY-7701細胞、SKO007細胞、RS4;11細胞
SCC7細胞系相關產(chǎn)品：Douglas Foster-1細胞、ASH3細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞
UO-31細胞系相關產(chǎn)品：Human Kidney-2細胞、PC2細胞、MC-3T3細胞
MV3細胞系相關產(chǎn)品：TE7細胞、IHH-4細胞、RD-2細胞
MV3細胞系相關產(chǎn)品：TE7細胞、IHH-4細胞、RD-2細胞
J45.01細胞系相關產(chǎn)品：H-87細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、KYSE0030細胞
Ramos (RA)細胞系相關產(chǎn)品：BALB/3T3 clone A31細胞、H19-7細胞、Nb-2細胞
NCI-H322 Cell:人肺癌細胞系
HOCF細胞系相關產(chǎn)品：Psi2-DAP細胞、RPMI1788細胞、Clone Y1細胞
H-2023細胞系相關產(chǎn)品：Kelly細胞、NCI-H102細胞、Reh細胞
PK-15細胞系相關產(chǎn)品：PIGI細胞、SK Mel28細胞、GB1細胞
Murine Carcinoma-38細胞系相關產(chǎn)品：SNU-739細胞、95-D細胞、87MG細胞
PC-10細胞系相關產(chǎn)品：NCI-HUT-69細胞、NCIH2591細胞、P3X63NS1細胞
MB 157細胞系相關產(chǎn)品：UPCI:SCC090細胞、Z-138細胞、Hepatoma 22細胞
HFT-8810細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1155細胞、TJ905細胞、Capan2細胞
VK2 (E6/E7)細胞系相關產(chǎn)品：COLO-320細胞、GM0637細胞、CNE1-LUC細胞
SW260細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR-10細胞、PLMVEC細胞、PG-4(S+L-)細胞
CHL-1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-128細胞、HEK/EBNA細胞、MGH-U1細胞
P36細胞系相關產(chǎn)品：MGSMC細胞、NCIH2227細胞、NHDF細胞
BT細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly 19細胞、526 mel細胞、P31-FUJ細胞
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關鍵字： NCI-H322 Cell:人肺癌細胞系
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