"SK-NEP-1 Cell:人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞背景資料:超微結(jié)構(gòu)有少許微絨毛,連接復(fù)合物,形態(tài)完整的高爾基體,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)多為光滑型,脂滴,沒(méi)有病毒棵粒。
HEK293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87-MG細(xì)胞、251MG細(xì)胞、B16F10細(xì)胞
Clone Y1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L23/P細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞、H1876細(xì)胞
H3255_DA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCS2/8細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞、OCI Ly3細(xì)胞
TE-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT4細(xì)胞、COV434細(xì)胞、RPMI6666細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
SK-NEP-1 Cell:人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞消化過(guò)程總結(jié):其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無(wú)法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞(絕大部分1min不到)。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去,胰酶潤(rùn)洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動(dòng)了,多半呈沙壯移動(dòng),其實(shí)已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞,這是沒(méi)有必要的。一般能移動(dòng)了,說(shuō)明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒(méi)有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過(guò)程中仍然會(huì)聚集,這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性,無(wú)論死活的細(xì)胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個(gè)細(xì)胞懸液,貼壁后觀察細(xì)胞,仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過(guò)幾個(gè)小時(shí)就拿出來(lái)吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑,這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來(lái),這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-3細(xì)胞),吹打不超過(guò)20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個(gè)細(xì)胞左右),是正常的,不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細(xì)胞,一般不超過(guò)5min,即可見細(xì)胞成片移動(dòng),就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候,比如tsDC細(xì)胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難,最關(guān)鍵幾點(diǎn):1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的,真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞;2)動(dòng)作要快,胰酶消化,換液什么,細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時(shí)間,所謂的細(xì)胞狀態(tài)差,很多時(shí)候是傳代的原因;3)有時(shí)間的話,需要細(xì)胞計(jì)數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線,不會(huì)臨時(shí)要處理,手足無(wú)措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時(shí)間,傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行,可以節(jié)省很多時(shí)間,也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn);5)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人,避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴(yán)格無(wú)菌操作,多噴噴酒精,要是對(duì)滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套;3)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè);4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟,勤換(滅菌水加進(jìn)去);5)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外,超凈臺(tái)是用完就開;6)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
SMA-560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞、801-D細(xì)胞、Tu-686細(xì)胞
HOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC-893細(xì)胞、Normal Rat Kidney細(xì)胞、H209細(xì)胞
SKLU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞、H2085細(xì)胞、CNE2細(xì)胞
OCIAML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG10815細(xì)胞、A2780/Taxol細(xì)胞、3T3 clone A31細(xì)胞
RIN14B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFSC-8B細(xì)胞、SCC-15細(xì)胞、LC-1-sq細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:半貼壁生長(zhǎng)
SK-NEP-1 Cell:人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng):1.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套,護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問(wèn)題:凍存液的配置已是常識(shí),在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會(huì)造成細(xì)胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。4.離心問(wèn)題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè),去除DMSO,去除死細(xì)胞,這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對(duì)一般人來(lái)說(shuō),把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間,轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大,死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染,所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無(wú)異常。5.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題:教科書中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)1ml細(xì)胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題:試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過(guò)多,細(xì)胞濃度過(guò)低,不利于細(xì)胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題:這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會(huì)比較大,就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),從以前的資料來(lái)看,DMSO的濃度在小于0.5%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響,還有一個(gè)說(shuō)法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞
MCF-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM6細(xì)胞、Human Embryo Kidney-2細(xì)胞、MCF7-CTRL細(xì)胞
LSECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H295細(xì)胞、QGY7701細(xì)胞、DHL10細(xì)胞
FHCRC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Metastatic Variant-522細(xì)胞、SupT1細(xì)胞、NCI-H2227細(xì)胞
BRL3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-164細(xì)胞、NTera-2D1細(xì)胞、COLO-205細(xì)胞
SK UT 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU216細(xì)胞、HD11細(xì)胞、MN60細(xì)胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞
HSC/mHSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞、Danio rerio Gill細(xì)胞、hESC細(xì)胞
SK-NEP-1 Cell:人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
CHL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373 MG細(xì)胞、Chang Cells細(xì)胞、HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞
SW1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0520細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞、NCI-H719細(xì)胞
SUP-M2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1271細(xì)胞、D283MED細(xì)胞、Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞
IHC-ST1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Be-Wo細(xì)胞、H-3255細(xì)胞、HPC-Y5細(xì)胞
LS-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO678細(xì)胞、ABC1細(xì)胞、K1735細(xì)胞
E.G7-OVA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC20細(xì)胞、CAKI 1細(xì)胞、AD-293細(xì)胞
ARO 81-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHCRC-11細(xì)胞、MV-3細(xì)胞、CNE-2Z細(xì)胞
SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL7702細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞
CMT64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN382細(xì)胞、Ramos(RA1)細(xì)胞、LMH細(xì)胞
CMT64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN382細(xì)胞、Ramos(RA1)細(xì)胞、LMH細(xì)胞
H211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M21細(xì)胞、HCa/16A3-F細(xì)胞、HGE細(xì)胞
SHEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-39細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞
NCIH2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190細(xì)胞、RCF細(xì)胞、MN 60細(xì)胞
P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JJN-3細(xì)胞、CT26細(xì)胞、HEK293-EBNA1細(xì)胞
Ramos 2G6.4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、Hx147細(xì)胞、no.11細(xì)胞
CHO-Lec1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1963細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞、A2780CP細(xì)胞
NS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-889細(xì)胞、OVCAR-5細(xì)胞、AN3細(xì)胞
MCF12A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EST50細(xì)胞、NCI-SNU-C2B細(xì)胞、GC-2細(xì)胞
MEG01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR4細(xì)胞、Hs706T細(xì)胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞
CCC-HSF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McArdle RH-7777細(xì)胞、UMNSAH-DF-1細(xì)胞、2780細(xì)胞
RMG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE-280細(xì)胞、NCI-H2110細(xì)胞、H82sclc細(xì)胞
CAKI 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-6666細(xì)胞、BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞、CHL/IU細(xì)胞
NCI-HUT-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J HR-1細(xì)胞、RS(4;11)細(xì)胞、MF2059細(xì)胞
NCIH647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit 225-K6細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞、CX1細(xì)胞
NCIH1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H23細(xì)胞、AGS細(xì)胞、786-0WT細(xì)胞
REC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-82細(xì)胞、MDA-MB 361細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞
SNU-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLU01細(xì)胞、HCT_116細(xì)胞、KYSE-50細(xì)胞
U138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ-1細(xì)胞、SW-1353細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞
ECV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S91細(xì)胞、NCIH522細(xì)胞、H1954細(xì)胞
Mel-624細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCK81細(xì)胞、OCI-Ly8細(xì)胞、KYSE-30細(xì)胞
H847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRO細(xì)胞、Huh 7.5.1細(xì)胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞
NCIH508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC893細(xì)胞、SUM-52PE細(xì)胞、Evsa T細(xì)胞
HS-766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1353細(xì)胞、NCI-H2085細(xì)胞、C32r細(xì)胞
SL-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB39細(xì)胞、LED-WiDr細(xì)胞、E0771細(xì)胞
OCILY19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hFOB 1.19細(xì)胞、NCIH2029細(xì)胞、Walker-256細(xì)胞
LC1sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞、RPMI-8226S細(xì)胞、RenCa細(xì)胞
H2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Molm14細(xì)胞、CALU1細(xì)胞、L 1210細(xì)胞
MPP 89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY180細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、INS1細(xì)胞
NCIN87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1876細(xì)胞、NCIH841細(xì)胞、NCI-H2405細(xì)胞
MDA468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QSG-7701細(xì)胞、FHs74Int細(xì)胞、HFSF細(xì)胞
MDA468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QSG-7701細(xì)胞、FHs74Int細(xì)胞、HFSF細(xì)胞
PC-3/M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:184A1細(xì)胞、NCM356細(xì)胞、H1155細(xì)胞
UMR-106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK 10a細(xì)胞、T8細(xì)胞、HOS-TE85細(xì)胞
SK-NEP-1 Cell:人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
RH-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IAR-20細(xì)胞、SK-N-BE2C細(xì)胞、CMT 93細(xì)胞
COLO 829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F81細(xì)胞、Swiss3T3細(xì)胞、SK-UT-1細(xì)胞
NU-GC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGC803細(xì)胞、ACCM細(xì)胞、MC 116細(xì)胞
MGH-U1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML2細(xì)胞、IM-9細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞
B16-F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh7.5.1細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞、143B TK-細(xì)胞
C4I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V 79-4細(xì)胞、SL-1細(xì)胞、MUM2B細(xì)胞
VE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-2spd(ts)細(xì)胞、LM3細(xì)胞、EA.Hy926細(xì)胞
HOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC-893細(xì)胞、Normal Rat Kidney細(xì)胞、H209細(xì)胞
NCIH2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05862細(xì)胞、H1954細(xì)胞、HS-766T細(xì)胞
UMC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-373-MG細(xì)胞、KRC/Y細(xì)胞、NTERA-2 cl.D1細(xì)胞
SW620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta 519細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、Vero-76細(xì)胞
H-841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 102PT細(xì)胞、Plaepi 34細(xì)胞、HCA-7細(xì)胞
"
關(guān)鍵字: SK-NEP-1 Cell:人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
上海賓穗生物科技有限公司 是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售與服務(wù)于一體的專業(yè)生物制品和化學(xué)品供應(yīng)商。公司總部位于上海市莘莊工業(yè)區(qū),擁有現(xiàn)代化辦公大樓、標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室與生產(chǎn)廠房。上海賓穗生物科技有限公司擁有一支由教授和博士為核心的技術(shù)團(tuán)隊(duì),提供超過(guò)100000的生物、化學(xué)產(chǎn)品,產(chǎn)品涵蓋化學(xué)、醫(yī)藥、材料、能源、生物等科研領(lǐng)域。公司秉承“客戶至上、服務(wù)一流”的發(fā)展理念,致力于將優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)提供給客戶。上海賓穗生物科技有限公司整合眾多的優(yōu)勢(shì)市場(chǎng)資源,以匠心服務(wù)廣大客戶,我們可以為客戶提供Binsui、TCI等國(guó)內(nèi)外各種品牌的高品質(zhì)試劑產(chǎn)品,充分滿足客戶的試劑需求。