"SK-NEP-1 Cell:人腎母細胞瘤細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：超微結(jié)構(gòu)有少許微絨毛，連接復合物，形態(tài)完整的高爾基體，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)多為光滑型，脂滴，沒有病毒棵粒。
HEK293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87-MG細胞、251MG細胞、B16F10細胞
Clone Y1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L23/P細胞、RPE1-hTERT細胞、H1876細胞
H3255_DA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCS2/8細胞、KPL-4細胞、OCI Ly3細胞
TE-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuPT4細胞、COV434細胞、RPMI6666細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
SK-NEP-1 Cell:人腎母細胞瘤細胞系
細胞消化過程總結(jié)：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代。３天內(nèi)可長滿。
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SMA-560細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞、801-D細胞、Tu-686細胞
HOPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-893細胞、Normal Rat Kidney細胞、H209細胞
SKLU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTI-Tn-5B1-4細胞、H2085細胞、CNE2細胞
OCIAML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG10815細胞、A2780/Taxol細胞、3T3 clone A31細胞
RIN14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFSC-8B細胞、SCC-15細胞、LC-1-sq細胞
細胞生長特性：半貼壁生長
SK-NEP-1 Cell:人腎母細胞瘤細胞系
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
MCF-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM6細胞、Human Embryo Kidney-2細胞、MCF7-CTRL細胞
LSECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H295細胞、QGY7701細胞、DHL10細胞
FHCRC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Metastatic Variant-522細胞、SupT1細胞、NCI-H2227細胞
BRL3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-164細胞、NTera-2D1細胞、COLO-205細胞
SK UT 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU216細胞、HD11細胞、MN60細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fortner's melanotic melanoma #3細胞、3T3-442A細胞、HCCC9810細胞
HSC/mHSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryonic Kidney 293細胞、Danio rerio Gill細胞、hESC細胞
SK-NEP-1 Cell:人腎母細胞瘤細胞系
CHL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373 MG細胞、Chang Cells細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞
SW1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0520細胞、HT-1197細胞、NCI-H719細胞
SUP-M2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1271細胞、D283MED細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞
IHC-ST1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Be-Wo細胞、H-3255細胞、HPC-Y5細胞
LS-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO678細胞、ABC1細胞、K1735細胞
E.G7-OVA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC20細胞、CAKI 1細胞、AD-293細胞
ARO 81-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHCRC-11細胞、MV-3細胞、CNE-2Z細胞
SNU-119細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL7702細胞、IBRS2細胞、PaCa2細胞
CMT64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN382細胞、Ramos(RA1)細胞、LMH細胞
CMT64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN382細胞、Ramos(RA1)細胞、LMH細胞
H211細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-M21細胞、HCa/16A3-F細胞、HGE細胞
SHEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-39細胞、Panc-08.13細胞、Hs940T細胞
NCIH2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03190細胞、RCF細胞、MN 60細胞
P3-X63-Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN-3細胞、CT26細胞、HEK293-EBNA1細胞
Ramos 2G6.4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSI/1-Ag4-1細胞、Hx147細胞、no.11細胞
CHO-Lec1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1963細胞、H4-II-EC3細胞、A2780CP細胞
NS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-889細胞、OVCAR-5細胞、AN3細胞
MCF12A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EST50細胞、NCI-SNU-C2B細胞、GC-2細胞
MEG01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR4細胞、Hs706T細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞
CCC-HSF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McArdle RH-7777細胞、UMNSAH-DF-1細胞、2780細胞
RMG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE-280細胞、NCI-H2110細胞、H82sclc細胞
CAKI 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-6666細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞、CHL/IU細胞
NCI-HUT-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J HR-1細胞、RS(4;11)細胞、MF2059細胞
NCIH647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞
NCIH1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H23細胞、AGS細胞、786-0WT細胞
REC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-82細胞、MDA-MB 361細胞、SY5Y細胞
SNU-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU01細胞、HCT_116細胞、KYSE-50細胞
U138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ-1細胞、SW-1353細胞、EC-9706細胞
ECV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S91細胞、NCIH522細胞、H1954細胞
Mel-624細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCK81細胞、OCI-Ly8細胞、KYSE-30細胞
H847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO細胞、Huh 7.5.1細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞
NCIH508細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC893細胞、SUM-52PE細胞、Evsa T細胞
HS-766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1353細胞、NCI-H2085細胞、C32r細胞
SL-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB39細胞、LED-WiDr細胞、E0771細胞
OCILY19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB 1.19細胞、NCIH2029細胞、Walker-256細胞
LC1sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、RPMI-8226S細胞、RenCa細胞
H2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm14細胞、CALU1細胞、L 1210細胞
MPP 89細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY180細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞、INS1細胞
NCIN87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1876細胞、NCIH841細胞、NCI-H2405細胞
MDA468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QSG-7701細胞、FHs74Int細胞、HFSF細胞
MDA468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QSG-7701細胞、FHs74Int細胞、HFSF細胞
PC-3/M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：184A1細胞、NCM356細胞、H1155細胞
UMR-106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK 10a細胞、T8細胞、HOS-TE85細胞
SK-NEP-1 Cell:人腎母細胞瘤細胞系
RH-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IAR-20細胞、SK-N-BE2C細胞、CMT 93細胞
COLO 829細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F81細胞、Swiss3T3細胞、SK-UT-1細胞
NU-GC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGC803細胞、ACCM細胞、MC 116細胞
MGH-U1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML2細胞、IM-9細胞、GM02219C細胞
B16-F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh7.5.1細胞、PAN 02細胞、143B TK-細胞
C4I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：V 79-4細胞、SL-1細胞、MUM2B細胞
VE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-2spd(ts)細胞、LM3細胞、EA.Hy926細胞
HOPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-893細胞、Normal Rat Kidney細胞、H209細胞
NCIH2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05862細胞、H1954細胞、HS-766T細胞
UMC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373-MG細胞、KRC/Y細胞、NTERA-2 cl.D1細胞
SW620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Granta 519細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、Vero-76細胞
H-841細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 102PT細胞、Plaepi 34細胞、HCA-7細胞
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