"SUP-M2 Cell:人間變性大細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
Clone 166細胞系相關產(chǎn)品：CCD-33Co細胞、COLO 320F細胞、SV40 MES 13細胞
NRK 52E細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR8細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞、GC-1細胞
SiHa細胞系相關產(chǎn)品：SW 620細胞、HCT8細胞、A.704細胞
SV40 MES 13細胞系相關產(chǎn)品：DITNC1細胞、OCI-Ly 10細胞、HCC-95細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
SUP-M2 Cell:人間變性大細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非常考究你的功夫的！細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
造成實驗室細胞污染常見情況總結：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
OACP4C細胞系相關產(chǎn)品：B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、EOC 20細胞、NB-4細胞
NCIH2135細胞系相關產(chǎn)品：MES-SA-Dx5細胞、OE-21細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞
Tu177細胞系相關產(chǎn)品：CMT64細胞、Mhh-Call 2細胞、HPDE細胞
NCI-BL6細胞系相關產(chǎn)品：HEC251細胞、TE15細胞、BJ1細胞
NPA細胞系相關產(chǎn)品：Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
SUP-M2 Cell:人間變性大細胞系
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應調節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
NK-92 MI細胞系相關產(chǎn)品：H2291細胞、GP293細胞、BE(2)M17細胞
KHYG細胞系相關產(chǎn)品：Cates 1B細胞、OVCAR8/ADR細胞、H2172細胞
hTERT-RPE-1細胞系相關產(chǎn)品：SAS細胞、MASMC細胞、TE32細胞
SUIT-2細胞系相關產(chǎn)品：K1735細胞、GalK 1細胞、HLCL9B10細胞
KOSC-2 cl3-43細胞系相關產(chǎn)品：Calu6細胞、MDCC-MSB1細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞
GT38細胞系相關產(chǎn)品：TOG細胞、CoCL3細胞、Mv 1 Lu細胞
KM933細胞系相關產(chǎn)品：Psi-2 DAP細胞、SK-Mel1細胞、BT549細胞
SUP-M2 Cell:人間變性大細胞系
D-324MED細胞系相關產(chǎn)品：SF 539細胞、A-875細胞、OE-33細胞
HIT clone T15細胞系相關產(chǎn)品：NL20細胞、SVEC4-10細胞、NW-38細胞
MZ-CRC-1細胞系相關產(chǎn)品：H2030細胞、KM933細胞、SUM 102細胞
BEL-7402細胞系相關產(chǎn)品：5-8F細胞、P-36細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞
MDAMB468細胞系相關產(chǎn)品：HT1080細胞、BC-023細胞、IM9細胞
Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞系相關產(chǎn)品：Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、201T細胞、Hs695T細胞
M-G63細胞系相關產(chǎn)品：SKMel-5細胞、SUIT-2細胞、HLE-B3細胞
SKN-SH細胞系相關產(chǎn)品：Hs606細胞、GOS-3細胞、B16-F0細胞
H8細胞系相關產(chǎn)品：SNU-354細胞、HCC-78細胞、Jurkat Clone E6-1細胞
H8細胞系相關產(chǎn)品：SNU-354細胞、HCC-78細胞、Jurkat Clone E6-1細胞
HT 1376細胞系相關產(chǎn)品：PG-4(S+L-)細胞、Panc-327細胞、NCIH1993細胞
Centre Antoine Lacassagne-27細胞系相關產(chǎn)品：MDA435細胞、HIT-T15細胞、C17.2細胞
NEC細胞系相關產(chǎn)品：U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞
PC-3細胞系相關產(chǎn)品：Lec1細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞、H2141細胞
Hs-578Bst細胞系相關產(chǎn)品：MN 60細胞、P3-Jiyoye細胞、UMR-106細胞
PANC-08-13細胞系相關產(chǎn)品：SUM102細胞、JROECL21細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞
Capan-2細胞系相關產(chǎn)品：H-1341細胞、NOR 10細胞、NG10815細胞
Hs-940細胞系相關產(chǎn)品：UCLA RO-81-A-1細胞、SK-Hep1細胞、751-NA-15細胞
CWR22R-V1細胞系相關產(chǎn)品：HLE-SRA-01/04細胞、NG-108-15細胞、CAL12T細胞
ACC-2細胞系相關產(chǎn)品：NCIH226細胞、U373 MG細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞
B-cell with DC Morphology細胞系相關產(chǎn)品：SCL2細胞、Caco-2/ATCC細胞、CA46細胞
AGS細胞系相關產(chǎn)品：Glioma 261細胞、B 95.8細胞、H-596細胞
Alexander cells細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293 c18細胞、M2-10B4細胞、CAL 85-1細胞
Hs695細胞系相關產(chǎn)品：NB4細胞、C-33-A細胞、M109細胞
SW 1088細胞系相關產(chǎn)品：NTera2/D1細胞、Hs888T細胞、ECV 304細胞
NOR-10細胞系相關產(chǎn)品：ROS-17/2.8細胞、H146細胞、SKNFI細胞
KMST-6細胞系相關產(chǎn)品：DF-1細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、NCIH441細胞
JM-Jurkat細胞系相關產(chǎn)品：PFSK-1細胞、TE85細胞、Hs274T細胞
Caco2BBe細胞系相關產(chǎn)品：Tn-5B1-4細胞、OVCAR4細胞、LS174T細胞
HEK293E細胞系相關產(chǎn)品：RPMI-7951細胞、H920細胞、Tn-5B1-4細胞
S180細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE(2)細胞、HT clone H9細胞、NCI-H1975細胞
LS513細胞系相關產(chǎn)品：OCI Ly1細胞、A-10細胞、NCI-H102細胞
PLB-985細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H676細胞、CAL 12細胞、KMH2細胞
IPLB-SF 21細胞系相關產(chǎn)品：HITT15細胞、RIN Cl-5F細胞、CLL-CII細胞
L 1210細胞系相關產(chǎn)品：BHP10-3細胞、NCI-SNU-5細胞、NCI-H2073細胞
MCF 7細胞系相關產(chǎn)品：293-GP細胞、MyLa2059細胞、NCI-H2444細胞
FRTL-5 Cl 2細胞系相關產(chǎn)品：P3X63Ag8.653細胞、HUCEC細胞、MCF-7/AdrR細胞
H2009細胞系相關產(chǎn)品：MCF7細胞、OC-316細胞、HEK293-H細胞
HT-29細胞系相關產(chǎn)品：HS578細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、HcerEpic細胞
JM-1細胞系相關產(chǎn)品：RPMI No. 1846細胞、Clone Y-1細胞、H7721細胞
CCC-HSF-1細胞系相關產(chǎn)品：McArdle RH-7777細胞、UMNSAH-DF-1細胞、2780細胞
HEK-293細胞系相關產(chǎn)品：Ramos 2G6.4C10細胞、OCI-Ly19細胞、NPA'87細胞
293 F細胞系相關產(chǎn)品：Huh-7.5.1細胞、RS4-11細胞、U87細胞
SUP-M2 Cell:人間變性大細胞系
JB6 clone 30, subclone 7b細胞系相關產(chǎn)品：JB6 Cl 30細胞、RS4;11細胞、RC92A細胞
LP-1細胞系相關產(chǎn)品：KYSE520細胞、Colon26細胞、HIBEC細胞
C32 mel細胞系相關產(chǎn)品：MESSA-DX5細胞、C1R細胞、NGEC細胞
OCM1A細胞系相關產(chǎn)品：686LN-M4e細胞、C-Lu-65細胞、HUT 226細胞
FAO-1細胞系相關產(chǎn)品：LS 174 T細胞、CORL23細胞、NCI-H2330細胞
NSC-34細胞系相關產(chǎn)品：CMK細胞、FRhK-4細胞、SKRC 39細胞
A-704細胞系相關產(chǎn)品：CEM C7細胞、HCV29細胞、NCI-H676B細胞
NCIH2172細胞系相關產(chǎn)品：MCA-205細胞、KY-50細胞、HBMEC細胞
L-M (TK-)細胞系相關產(chǎn)品：Sp2/0細胞、SKGT2細胞、SKG IIIa細胞
Fu97細胞系相關產(chǎn)品：KRC/Y細胞、T 84細胞、LN 229細胞
BHT101細胞系相關產(chǎn)品：NBL-7細胞、MB231細胞、UMUC-3細胞
H1299細胞系相關產(chǎn)品：C-4-I細胞、H-2170細胞、NCI-SNU-1細胞
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關鍵字： SUP-M2 Cell:人間變性大細胞系
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