"CAL-62 Cell:人甲狀腺癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
293E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS-1E細胞、LS 174 T細胞、SHP77細胞
293 F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7.5.1細胞、RS4-11細胞、U87細胞
BEL 7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo205細胞、JiyoyeP-2003細胞、HIMEC細胞
NKL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、C4-2 B細胞、SW 1222細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
CAL-62 Cell:人甲狀腺癌細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM19細胞、DHL-2細胞、U937細胞
PA I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637H細胞、P3J.HR1K細胞、EU-2細胞
RINm-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan-2細胞、NCIH1781細胞、hs 68細胞
HF-91細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-7細胞、10T1/2細胞、Ramos-RA1細胞
CSQT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Blotchy fibroblast-11細胞、COR-L88細胞、BT-474細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
CAL-62 Cell:人甲狀腺癌細胞系
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
QGY 7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H23細胞、HOPC細胞、MS1細胞
MUVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-25細胞、MOLT-3細胞、SNB19細胞
HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293F細胞、Walker-256-TC細胞、SNU638細胞
SNUC2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu 8988 S細胞、H-727細胞、C-28/I2細胞
T-84細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 39細胞、HCC1500細胞、BHP10-3細胞
Rat 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4IP細胞、TEV-1細胞、253J B-V細胞
MCA 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeSoTheliOma-211H細胞、NSI/1-Ag4-1細胞、GC-1spg細胞
CAL-62 Cell:人甲狀腺癌細胞系
U-87MG ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJ [Human fibroblast]細胞、SW 1222細胞、HT-1376細胞
ML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA細胞、H2452細胞、NCIH508細胞
CEMC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDLF細胞、Jijoye細胞、H.Ep. #2細胞
Wien133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-CL-11細胞、BALL1細胞、LTEP-a2細胞
SL-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB39細胞、LED-WiDr細胞、E0771細胞
LUDLU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY3細胞、CT-26 WT細胞、K562細胞
OCI/AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE-2c細胞、MPC11細胞、OCI/AML4細胞
RCC_7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2 OS細胞、IOSE80UBC細胞、OLN93細胞
RLE-6TN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2CL8細胞、U-251MG細胞、RWPE-1細胞
L 363細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 3B細胞、MDCK.2細胞、LU451細胞
KM-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T8細胞、MZCRC1細胞、U-251 MG細胞
NCIH1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3AA細胞、KPL4細胞、HUV-EC-C細胞
Panc8.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04680細胞、Nb2a細胞、NCIH660細胞
MDCC-MSB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA10細胞、CHO Lec1細胞、KE-37細胞
NRK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DC2.4細胞、Sp2/O-Ag14細胞、NCTC-3960細胞
CCRF-CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:1301細胞、Colon 26細胞、Alexander細胞
BT-325細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU601細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NCI-H87細胞
NCI-H1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sol8細胞、Colo-678細胞、H-2135細胞
GM03570E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-2細胞、WM-239A細胞、Lu-165細胞
PLMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 clone 30, subclone 7b細胞、HTh-74細胞、L(TK-)細胞
RWPE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、DMS 153細胞、SCLC21H細胞
SNU251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 513細胞、L-Wnt-3A細胞、AN3-CA細胞
343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fox/NY細胞、ECC-12細胞、BCP-1細胞
TSCC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-756細胞、M4e細胞、HuP-T4細胞
Colo741細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-410細胞、EnCa1細胞、TE671細胞
NCI-H1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 2650細胞、COR-L105細胞、KOSC-2細胞
HCC-827細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7B細胞、NCI-H1341細胞、SW 527細胞
MSTO-211細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC2細胞、TFK1細胞、SK.MEL.2細胞
DHL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MyLa2059細胞、NS1-Ag4細胞、ARO81-1細胞
OLN93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Medical Research Council cell strain-5細胞、Panc 02.03細胞、SCC 15細胞
HCT_116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4-D6P2T細胞、Hs-675-T細胞、WB F344細胞
COR-L 105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP212細胞、MDCKII細胞、HCCLM3細胞
MTC-TT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMC11細胞、MeWo細胞、HBVSMC細胞
DHL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTHY-ORI3.1細胞、Panc-813細胞、H2110細胞
CCC-ESF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1781細胞、Namalwa細胞、MB231細胞
CCD 966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS 751細胞、DHL8細胞、TGBC11TKB細胞
TE 85 ClF-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV細胞、Neuro 2a細胞、NCI-SNU-886細胞
BT-483細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8161細胞、JROECL33細胞、U-87-MG細胞
MES13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FTC-133細胞、COLO201細胞、A-2780細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:95D細胞、Hs 940.T細胞、UACC812細胞
HRA 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NCI-H2444細胞、L02細胞
NCTC 1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDrTC細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞、HCC-1171細胞
LL/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-436細胞、TCCPAN2細胞、BEP2D細胞
CAL-62 Cell:人甲狀腺癌細胞系
HCC2935細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC82細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、OC-3-VGH細胞
LK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAEC細胞、COLO 829細胞、A1847細胞
Hs 888.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPDC-CCL141細胞、LC-MS細胞、TCC-PAN2細胞
NCI-H-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMDC細胞、HOS-TE85細胞、M619細胞
CAL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO1-N1細胞、HOP 92細胞、KM932細胞
MLE-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA361細胞、Sp 2817細胞、TMK1細胞
Ramos-2G6-4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT 549細胞、PANC0327細胞、COS7細胞
MLMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H727細胞、COLO-16細胞、SW1417細胞
NTHY-ORI3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hEEC細胞、Mv1Lu細胞、HMy2.CIR細胞
KYSE 70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC細胞、Pt-K1細胞、Kit225-K6細胞
L929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1792細胞、HuCC-T1細胞、293 EBNA細胞
SH-SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEC1細胞、CMT.64細胞、SW900細胞
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