"B16-F0 Cell:小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
NCI-H650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK 1細(xì)胞、COLO394細(xì)胞、Hs 600.T細(xì)胞
HeLa 229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2cl.D1細(xì)胞、LS 180細(xì)胞、FRTL5細(xì)胞
Hs 832(C).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2085細(xì)胞、NW38細(xì)胞、HCC-202細(xì)胞
LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2347細(xì)胞、DSL-6A-C1細(xì)胞、RIMEC細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
B16-F0 Cell:小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個(gè)問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對于特別難消化的細(xì)胞和對胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時(shí)要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MC-116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC3細(xì)胞、NPA87-1細(xì)胞、H-510細(xì)胞
BOWES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T 24細(xì)胞、MDA 435細(xì)胞、3T3-A31細(xì)胞
H-2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-12細(xì)胞、NIH/3T3細(xì)胞、MDA-MB-453細(xì)胞
KYSE-270細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA 38細(xì)胞、NCI-H2108細(xì)胞、GM02132C細(xì)胞
PL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞、NTera2 cl.D1細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分
B16-F0 Cell:小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個(gè)說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
NCI-H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C 6細(xì)胞、BIC-1細(xì)胞、MDAMB134VI細(xì)胞
EVSA/T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-5細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞、A9細(xì)胞
McCoy B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU16細(xì)胞、NCIH1373細(xì)胞、BEL-7405細(xì)胞
NUGC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 1細(xì)胞、GM05887A細(xì)胞、P3/X63/Ag8.653細(xì)胞
SK.MEL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Strain KB細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞、95-D細(xì)胞
Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML3細(xì)胞、LC-1 sq細(xì)胞、WM239細(xì)胞
PIEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-SH-SY5Y細(xì)胞、GC-1 spg細(xì)胞、WiDr-TC細(xì)胞
B16-F0 Cell:小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
Hi-five細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTh-74細(xì)胞、CAL851細(xì)胞、NCIH211細(xì)胞
BNCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H647細(xì)胞、IGR.OV1細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞
BE2-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO680N細(xì)胞、CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞、SW1222細(xì)胞
PTK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞、SKRC-42細(xì)胞、SHI-1細(xì)胞
IHH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS5細(xì)胞、Jurkat-E6細(xì)胞、LPC-H12細(xì)胞
WISH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN 93細(xì)胞、OVCA433細(xì)胞、SW-1116細(xì)胞
HuCC-T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP 62細(xì)胞、P3HR1-BL細(xì)胞、H-209細(xì)胞
YAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC-2細(xì)胞、SUDHL5細(xì)胞、MCA-205細(xì)胞
TE32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH-3T3細(xì)胞、LC1-Sq細(xì)胞、MDA-MB-415細(xì)胞
TE32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH-3T3細(xì)胞、LC1-Sq細(xì)胞、MDA-MB-415細(xì)胞
Colo741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-410細(xì)胞、EnCa1細(xì)胞、TE671細(xì)胞
NCC-IT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2198細(xì)胞、MGHU1細(xì)胞、SUP-T1細(xì)胞
NEC8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞、KYSE410細(xì)胞
NEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U14細(xì)胞、H1355細(xì)胞、Clone M-3細(xì)胞
BEL 7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8/SVneo細(xì)胞、SW403細(xì)胞、NT-2細(xì)胞
COV 434細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK/EBNA細(xì)胞、SKNBE2C細(xì)胞、HT1197細(xì)胞
CV 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hADSCs細(xì)胞、BALL-1細(xì)胞、Z310細(xì)胞
Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jeko1細(xì)胞、hEM15A細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞
3T3J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMRC2細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞
H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB415細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞
H-EMC-SS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC-40細(xì)胞、HS 683T細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞
NCIH2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBE細(xì)胞、CFPAC1細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞
CCD-841CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fao細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞、UPCI-SCC-090細(xì)胞
MAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH820細(xì)胞、TF1細(xì)胞、RBL細(xì)胞
LWnt3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2195細(xì)胞、NCI-H2330細(xì)胞、SGC-7901細(xì)胞
GC-1spg細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.MEL.2細(xì)胞、NCI-H1299細(xì)胞、YES 2細(xì)胞
B16-F10-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.4細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NP69細(xì)胞
WB-F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H211細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞、WM239A細(xì)胞
RMG-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMCB細(xì)胞、C3H-10T1/2細(xì)胞、293T/17細(xì)胞
SUM 102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H660細(xì)胞、BC-009細(xì)胞、SK-LU-1細(xì)胞
CCD-19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTh74細(xì)胞、Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞、H358細(xì)胞
KLN 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175細(xì)胞、COLO357細(xì)胞、Hep3B細(xì)胞
A2780 CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cor L88細(xì)胞、B958細(xì)胞、HELA-GFP細(xì)胞
H378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH 8994細(xì)胞、H-929細(xì)胞、293H細(xì)胞
DHL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MyLa2059細(xì)胞、NS1-Ag4細(xì)胞、ARO81-1細(xì)胞
Pa14C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLD 1細(xì)胞、HL7702細(xì)胞、RPMI no. 8226細(xì)胞
Strain L-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LED-WiDr細(xì)胞、H1915細(xì)胞、MT-4細(xì)胞
H-727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293A細(xì)胞、U251細(xì)胞、PK-13細(xì)胞
CL40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293H細(xì)胞、Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞、B16BL-6細(xì)胞
NCI-SNU-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA1細(xì)胞、UC-3細(xì)胞、H-2009細(xì)胞
PLC8024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-174T細(xì)胞、KYSE30細(xì)胞、Panc3_27細(xì)胞
293/EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-180細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞
HANK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJAB-1細(xì)胞、HCT/FU細(xì)胞、SUP-B1細(xì)胞
B16-F0 Cell:小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
RCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HA細(xì)胞、Malme-3 M細(xì)胞、MRASMC細(xì)胞
JIMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TFK1細(xì)胞、H-1568細(xì)胞、BJA-B細(xì)胞
C-33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PVEC細(xì)胞、293c18細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞
WI-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞
H-2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞、SBC-5細(xì)胞、C4 I細(xì)胞
MESSA Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PASMCS細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞、U251細(xì)胞
AD-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2 Bone metastatic細(xì)胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細(xì)胞、Hs 888Lu細(xì)胞
SU-DHL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL-1細(xì)胞、H2227細(xì)胞、B-CPAP細(xì)胞
MALME.3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J細(xì)胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞、SP-2細(xì)胞
PAI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCISCC090細(xì)胞、MS751細(xì)胞、H1404細(xì)胞
MCF/Adr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)M-17細(xì)胞、BEL-7404細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞
CG4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu 8988s細(xì)胞、B16/F1細(xì)胞、Microbiological Associates-104細(xì)胞
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關(guān)鍵字： B16-F0 Cell:小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
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