"BT-474 Cell:人乳腺導(dǎo)管瘤細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
HOSEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Toledo細胞、Hs-27細胞、P-36細胞
SNU620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H196細胞、NCI-H1838細胞、DU-145細胞
LY-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ1細胞、A498細胞、Colon-26細胞
Central Adrenergic TH-expressing a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
BT-474 Cell:人乳腺導(dǎo)管瘤細胞系
細胞消化過程總結(jié)：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SNU869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、MNNG/HOS細胞、A2780CP70細胞
Kit-225-K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-420細胞、H4IIEC3細胞、ABE8.1/2細胞
Tsup-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCFSTTG1細胞、58F細胞、HCC-1954BL細胞
DR2R1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J細胞、50.B1細胞、Tregs細胞
L-6TG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-2003細胞、A875細胞、GS-9L細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
BT-474 Cell:人乳腺導(dǎo)管瘤細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
Kit225 K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2780細胞、PA12細胞、NCI-H508細胞
NCIH1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P 815細胞、NCI H345細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞
COV434細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRS-82細胞、NWA細胞、FL83B細胞
Human Corneal Endothelial Cells-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-7901/DDP細胞、BAEC細胞、UPCI-SCC-154細胞
SKG-IIIa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE80細胞、BC-019細胞、H-2196細胞
C-4 I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、THP-1(ATCC)細胞、CCRF/CEM細胞
DMS-53細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDEC細胞、Hs 695.T細胞、HL-7702細胞
BT-474 Cell:人乳腺導(dǎo)管瘤細胞系
MC57G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8svn細胞、MIA Paca2細胞、HT144細胞
GT38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOG細胞、CoCL3細胞、Mv 1 Lu細胞
OVCA433_Bast細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AE 1201細胞、Bat lung細胞、T1-73細胞
BALB/3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-ori細胞、RC-2細胞、LS-174細胞
190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 888.T細胞、OCM1A細胞、Calu 3細胞
C4-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BpRc1細胞、D-341 Med細胞、Hs 888.Lu細胞
BRL-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu-6細胞、Hi5細胞、KM.12細胞
SCC90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO.205細胞、U-373MG ATCC細胞、W256細胞
HPAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero細胞、FBHE細胞、SK-SH-SY5Y細胞
HPAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero細胞、FBHE細胞、SK-SH-SY5Y細胞
Panc5.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs281T細胞、H2342細胞、TOV21細胞
PK (15)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM07404D細胞、Hs-578T細胞、NCIH2286細胞
SK-NEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL II細胞、Dunn LM8細胞、COLO-829細胞
MCA38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-hth74細胞、DMS 273細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞
HLE-SRA-01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc2.03細胞、CEMC7細胞、NTera 2細胞
L- cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMR 106細胞、32D CL3細胞、SK MEL-28細胞
HEK293EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OACP4 C細胞、NCIH2110細胞、3AA細胞
NCIH647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞
RBSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-C4-2細胞、MDA MB231細胞、HFT 8810細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、Okayama University Medical School-23細胞、FHL124細胞
NT2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2170細胞、KYSE0410細胞、Y79細胞
T47-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 1210細胞、EFM-19細胞、CAL 33細胞
HCT15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-3J細胞、HuT 102細胞、OVCAR 8細胞
IB-RS2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1417細胞、MKN-45細胞、OUMS-23細胞
KLN-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCS細胞、H1437細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞
MDA231-LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CSQT-2細胞、Leukemia L1210細胞、HCT-FET細胞
Lewis Lung Cancer細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Embryonic Bovine Tracheal cells細胞、HEL-1細胞、Caki-1細胞
IM9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chang Cells細胞、W256細胞、FTC133細胞
Mevo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sci-1細胞、BxPC-3細胞、MDA2B細胞
SUM 149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3-LL細胞、SHEE細胞、PE CA PJ34細胞
FC33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac1細胞、HEK-A細胞、AM38細胞
SVHUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2052細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、NCI-H716細胞
ZR751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK (15)細胞、DI TNC1細胞、CHP-212細胞
PT-67細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp 2/0-Ag 14細胞、C666-1細胞、NCI-SNU-620細胞
SW-900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD11細胞、Hs68細胞、AMO1細胞
ChaGo-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118 MG細胞、MDA-330細胞、alpha TC1.6細胞
CL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、MGH-U3 (RN)細胞、RC13細胞
H-1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-10細胞、Swiss 3T6細胞、SCC-25細胞
SKNO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175VII細胞、HCC-1937細胞、CT26細胞
McARH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIADR.RES細胞、MRCV細胞、MASMC細胞
HMCB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MDCKII-WT細胞、NPC-TW 01細胞
ECC 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-2細胞、J774細胞、3T3 J2細胞
MLE 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLA144細胞、MDA MB 453細胞、GM03569細胞
BT-474 Cell:人乳腺導(dǎo)管瘤細胞系
HuTu-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alpha Mouse Liver 12細胞、3T3-L1 ad細胞、Vero from pool #76細胞
SJ-Rh 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC PK1細胞、H716細胞、RKN細胞
NS1-Ag4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHH-CALL2細胞、MDA-MB-175細胞、BHK細胞
HCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HARAB細胞、VSC4.1細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞
B958細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774A.1細胞、C4-2 Bone metastatic細胞、NCI-H2195細胞
HEK/EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K 562細胞、HT3細胞、NCI-H1693細胞
NCIH1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-125細胞、EB-2細胞、Soleus clone 8細胞
3T3-Swiss細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 24細胞、LIPF155C細胞、DMS-79細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YH-13細胞、SLK細胞、NCIH1869細胞
Hs940T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549/ATCC細胞、OCI AML5細胞、SGC-996細胞
SW-954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HB 611細胞、KG1細胞、PC 12細胞
3AA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、NHDF細胞、NCI-H345細胞
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