"253J-BV Cell:人膀胱癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:膀胱癌;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移;男性
YTMLC-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ONS76細胞、CEM.C1細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞
KMM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF12F細胞、RPMI 2650細胞、CCRFCEM細胞
SHI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAG細胞、U266 Bl細胞、LIM1215細胞
NCIH1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-451Lu細胞、HUT-125細胞、OVCAR 433細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
253J-BV Cell:人膀胱癌細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復(fù)蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
TCC-SUP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2/D1細胞、COLO824細胞、SK-RC-20細胞
CA46細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-69細胞、C22 (Clara)細胞、Kasumi-6細胞
HS578細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA-1細胞、SCCVII/St細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞
P3-X63-Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-678細胞、Sp2/mIL-6細胞、HEY A8細胞
KNS-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF-1細胞、SK-N-BE(2)細胞、MNNG/HOS細胞
細胞生長特性:貼壁
253J-BV Cell:人膀胱癌細胞系
正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
Hs606細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH7細胞、HDMEC細胞、Panc 8.13細胞
L-M[TK-]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL 5細胞、H2286細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞
AX-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCMK-1細胞、OCUM-1細胞、AE 1201細胞
CMT-64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP2d細胞、tdott細胞、UMNSAH-DF1細胞
OCI-LY-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS17/2.8細胞、MCA38細胞、HCC-9724細胞
J.E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL 33細胞、SU86_86細胞、18G3.cl 1細胞
MCF12A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EST50細胞、NCI-SNU-C2B細胞、GC-2細胞
253J-BV Cell:人膀胱癌細胞系
PK-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIGI細胞、SK Mel28細胞、GB1細胞
MPP 89細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY180細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞、INS1細胞
R.K.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134-VI細胞、Microbiological Associates-104細胞、OCI AML5細胞
P3JHR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40-MES13細胞、NCI-H920細胞、SKNBE細胞
SW-1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、MODE-K細胞
OUMS23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA795細胞、WEHI-164細胞、Panc 03.27細胞
LNCaP C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW480E細胞、DI TNC-1細胞、NK92細胞
NIE 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10-BL6細胞、Bac1 2F5細胞、NCIH1395細胞
MLA-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1963細胞、WEHI 231細胞、P3X63Ag8653細胞
MLA-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1963細胞、WEHI 231細胞、P3X63Ag8653細胞
SF-539細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCCVII細胞、HCC4006細胞、UMR 106細胞
N1E-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:87MG細胞、MDA-MB-175-VII細胞、AML193細胞
SHG-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4細胞、A253細胞、SF295細胞
HOP-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LK2細胞、HUTU80細胞、T24細胞
CCRF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC9706細胞、SP2/0 Ag-14細胞、EA hy 926細胞
Psi2 DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH128細胞、A9(Hamprecht)細胞、ML2細胞
NPC-TW01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pfeiffer細胞、H1770細胞、C57/B6-L細胞
Jurkat-E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney-21細胞、WM-451Lu細胞、NIH 3T6細胞
TCC-PAN2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Suzhou Human Glioma-44細胞、LMH細胞、IOSE-Van細胞
H-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 CL8細胞、ZR751細胞、NCI-H661細胞
High Five細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN-205細胞、SW-48細胞、D-341細胞
HLEB-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞、U266B1細胞
HUT28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320 HSR細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞、QSG7701細胞
NCI-H1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 2650細胞、COR-L105細胞、KOSC-2細胞
RH-35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2452細胞、Psi2-DAP細胞、H498細胞
PLA801-95D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJSA細胞、Panc05.04細胞、MPC 11細胞
COLO-394細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H810細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞、NBL-12細胞
Jurkat-FHCRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK-1細胞、SKLMS1細胞、H-508細胞
CNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6Cl30細胞、SP-2細胞、MC26細胞
RIN-m5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIN87細胞、CCC-HHM-2細胞、639V細胞
KP-N-RT-BM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML3細胞、KAT5細胞、578T細胞
HEK (AD293)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI 38細胞、HT 1197細胞、BAEC細胞
HUSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-847細胞、Hep G2細胞、COLO 320F細胞
ECV-304細胞系相關(guān)產(chǎn)品:National Medical Center-Glioma 1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞、SDBMSC細胞
HS-766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1353細胞、NCI-H2085細胞、C32r細胞
SNU368細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB-4細胞、GM02219細胞、Detroit562細胞
SCC90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO.205細胞、U-373MG ATCC細胞、W256細胞
SKMEL28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 05.04細胞、Pt K1細胞、PC3M-1E8細胞
SN-12C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL 3A細胞、KM.12細胞、MCF7細胞
MCF-10 Attached細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH929細胞、E6-1細胞、RL952細胞
MCF-10 Attached細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH929細胞、E6-1細胞、RL952細胞
A10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL2細胞、alphaTC clone 6細胞、OV90細胞
Walker 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞、GBC-SD細胞、BHP 10-3細胞
253J-BV Cell:人膀胱癌細胞系
SNU16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL39細胞、FL 62891細胞、RIN14B細胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs822T細胞、SNU-449細胞、U266 B1細胞
HuP-T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-CO-1細胞、SMMC-7721細胞、HCT-116細胞
Karpas422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 12細胞、Hepa 1-6細胞、W133細胞
CAL-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-51細胞、My-La 2059細胞、NCI-747細胞
Hs940T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549/ATCC細胞、OCI AML5細胞、SGC-996細胞
U118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2141細胞、TCCSUP細胞、SNU-878細胞
BC-019細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 8細胞、VMRC-RCZ細胞、Jurkat細胞
NCIH1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2.35細胞、NCI-H345細胞、NCI-H-295細胞
SUM 190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS174T細胞、HeLaS3細胞、NE-1細胞
CCC-HPF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:rHSC-99細胞、COLO-205細胞、U138-MG細胞
HDQ-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT.116細胞、MC3T3-E細胞、Anip[973]細胞
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