"End1/E6E7 Cell:人子宮頸內(nèi)膜上皮細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:子宮內(nèi)膜;女性;HPV16轉化
JOSK-M細胞系相關產(chǎn)品:SKNO-1細胞、Colo699細胞、HcaF細胞
HCC-44細胞系相關產(chǎn)品:NU-GC-2細胞、BLO11細胞、TH1細胞
BC3H-1細胞系相關產(chǎn)品:769P細胞、ETCC007細胞、GEO細胞
Roswell Park Memorial Institute 7666細胞系相關產(chǎn)品:G-Olig2細胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞、Wistar Institute-38細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
End1/E6E7 Cell:人子宮頸內(nèi)膜上皮細胞系
細胞傳代時消化的問題:可以這樣說,對于需要消化傳代的細胞,每一次的消化都是對這個細胞存活與否,狀態(tài)好與不好最至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的,他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。(以難消化細胞為例);具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為步,目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。)3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比。)這是第三步。4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實際情況你自己把握)。這是第四步。其實還可以有第五步,對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低,保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了,如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞,像RAW264.7,僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較,去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步,除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外,還有一個更重要的作用就是,可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài),不成片不連體。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
DHL-4細胞系相關產(chǎn)品:NTHY-ORI3.1細胞、Panc-813細胞、H2110細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞系相關產(chǎn)品:HCC366細胞、CG4細胞、COLO-680N細胞
R1610細胞系相關產(chǎn)品:H510細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、HUT 28細胞
HBZY1細胞系相關產(chǎn)品:VeroE6細胞、Mac-1細胞、LS 174T細胞
MAntle cell VERona-1細胞系相關產(chǎn)品:CORL88細胞、PASMCS細胞、Tu686細胞
細胞生長特性:貼壁
End1/E6E7 Cell:人子宮頸內(nèi)膜上皮細胞系
細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。目前,細胞凍存最常用的技術是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結構紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結構成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術的關鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
OVCAR433細胞系相關產(chǎn)品:BEL/FU細胞、HBZY-1細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞
624細胞系相關產(chǎn)品:MCMEC細胞、D10.G4.1細胞、CMT 64細胞
MSCs(mUCMSCs)細胞系相關產(chǎn)品:NCIH64細胞、NIH:OVCAR4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞
NCI-H441細胞系相關產(chǎn)品:HCC-366細胞、MN 60細胞、DITNC1細胞
LS-174細胞系相關產(chǎn)品:OLN-93細胞、NCI-H1703細胞、HCC-2279細胞
HT 29細胞系相關產(chǎn)品:TM4細胞、G361-mel細胞、SRA01/04 (HLE)細胞
Hepa 1-6細胞系相關產(chǎn)品:H-2122細胞、UCH-1細胞、OCM1細胞
End1/E6E7 Cell:人子宮頸內(nèi)膜上皮細胞系
GLAG-66細胞系相關產(chǎn)品:Molm 13細胞、RPMI7666細胞、SV-HUC-1細胞
H1666_DA細胞系相關產(chǎn)品:RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞
MV-1-Lu細胞系相關產(chǎn)品:BIU-87/Adr細胞、NOZC-1細胞、T 98 G細胞
McCoy B細胞系相關產(chǎn)品:SNU16細胞、NCIH1373細胞、BEL-7405細胞
MDA231-LM2-4175細胞系相關產(chǎn)品:CSQT-2細胞、Leukemia L1210細胞、HCT-FET細胞
DoTc2 4510細胞系相關產(chǎn)品:COLO201細胞、SACC-83細胞、T-47-D細胞
H-378細胞系相關產(chǎn)品:SW839細胞、NCI-H87細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞
SH-SY5Y Parental細胞系相關產(chǎn)品:KYSE-70細胞、YD38細胞、Calu6細胞
YD-38細胞系相關產(chǎn)品:H64細胞、293-FT細胞、MS 751細胞
YD-38細胞系相關產(chǎn)品:H64細胞、293-FT細胞、MS 751細胞
IPEC1細胞系相關產(chǎn)品:SKNBE2C細胞、hFOB細胞、Mel526細胞
Hut292細胞系相關產(chǎn)品:H650細胞、GM3569細胞、H-841細胞
JTC-28細胞系相關產(chǎn)品:G 292 Clone A 141B1細胞、HSC2細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞
SKMEL1細胞系相關產(chǎn)品:HL-60 Clone 15細胞、HCC1954BL細胞、CHO-Lec1細胞
NCIH1568細胞系相關產(chǎn)品:THEECs細胞、118 MG細胞、RPMC細胞
Jurkat, Clone E6-1細胞系相關產(chǎn)品:H2452細胞、HEYA8細胞、MC3T3E1細胞
H4-II-EC3細胞系相關產(chǎn)品:SUM-190細胞、SKRC-20細胞、T241細胞
COLO-824細胞系相關產(chǎn)品:Med 341細胞、Rat Skin 1細胞、M1細胞
WM 2664細胞系相關產(chǎn)品:TE-9細胞、SK-MEL24細胞、MV411細胞
NCIH1355細胞系相關產(chǎn)品:HMSC細胞、D341細胞、T. T細胞
FDC-P1細胞系相關產(chǎn)品:CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞
293-EBNA1細胞系相關產(chǎn)品:NS-1-Ag4-1細胞、RAW264.7細胞、Blotchy fibroblast-11細胞
PGBE1細胞系相關產(chǎn)品:Simpson細胞、Clone 15 HL-60細胞、C6661細胞
YES 2細胞系相關產(chǎn)品:SNU520細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SUM-159細胞
NCI-H250細胞系相關產(chǎn)品:H-295細胞、H1341細胞、NCI-H226細胞
H-128細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H125細胞、UO-31細胞、H-9細胞
SK.OV.3細胞系相關產(chǎn)品:HME1細胞、NUGC2細胞、Emory University-2細胞
H-250細胞系相關產(chǎn)品:H520細胞、Functional Liver Cell-7細胞、OUMS-27細胞
HCC-1359細胞系相關產(chǎn)品:SUM-159PT細胞、NIH:OVCAR-4細胞、Karpas-299細胞
SKNEP細胞系相關產(chǎn)品:U-138MG細胞、U14細胞、BIC1細胞
SKNAS細胞系相關產(chǎn)品:SNK-6細胞、Super Tube細胞、NIH:OVCAR4細胞
U251-MG細胞系相關產(chǎn)品:Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞
NCIH1618細胞系相關產(chǎn)品:CFSC-2G細胞、LAN1細胞、KP-N-YN細胞
H-1105細胞系相關產(chǎn)品:UWB1289細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞
MSTO-211細胞系相關產(chǎn)品:HSC2細胞、TFK1細胞、SK.MEL.2細胞
OCI-Ly 18細胞系相關產(chǎn)品:8305C細胞、F81細胞、P-3J細胞
H3255_DA細胞系相關產(chǎn)品:HCS2/8細胞、KPL-4細胞、OCI Ly3細胞
HCC-1937細胞系相關產(chǎn)品:RBMEC細胞、OE21細胞、MDAMB330細胞
H1819細胞系相關產(chǎn)品:HEL細胞、NCI-H446細胞、NCI-H1395細胞
Laboratory of Allergic Diseases 2細胞系相關產(chǎn)品:SU-DHL-1細胞、Hep 3B2_1-7細胞、GM-215細胞
OCILY7細胞系相關產(chǎn)品:SNU-520細胞、PT-67細胞、Hs839T細胞
SW480E細胞系相關產(chǎn)品:MDA-361細胞、NCI-H650細胞、SU-DH-L5細胞
SKRC20細胞系相關產(chǎn)品:C32 mel細胞、SV40-HCEC細胞、CCD-112CoN細胞
End1/E6E7 Cell:人子宮頸內(nèi)膜上皮細胞系
MKN45細胞系相關產(chǎn)品:TE-671細胞、MCMEC細胞、SVG(P12)細胞
MuM-2B細胞系相關產(chǎn)品:MNNG細胞、KYSE 70細胞、CL34細胞
COLO824細胞系相關產(chǎn)品:U87MG細胞、G422細胞、H146細胞
IGROV-1細胞系相關產(chǎn)品:G361細胞、PC-9/GR細胞、RPE-1細胞
H1792細胞系相關產(chǎn)品:IM9細胞、Caco-2BBe細胞、MRC-V細胞
NCIH748細胞系相關產(chǎn)品:A375S2細胞、Central Adrenergic TH-expressing a細胞、SUDHL-10細胞
H2.35細胞系相關產(chǎn)品:LNT-229細胞、CCD1112Sk細胞、Karpas 299細胞
NCIH747細胞系相關產(chǎn)品:SK Mel 1細胞、RFL-6細胞、U266BL細胞
N-87細胞系相關產(chǎn)品:108CC15細胞、Hs 895 T細胞、KYSE 520細胞
SW480E細胞系相關產(chǎn)品:MDA-361細胞、NCI-H650細胞、SU-DH-L5細胞
MUTZ-1細胞系相關產(chǎn)品:SKM1細胞、HEK293-EBNA細胞、HIT-T15細胞
Walker-256-TC細胞系相關產(chǎn)品:CWR22R細胞、SW1222細胞、NCIH2029細胞
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關鍵字: End1/E6E7 Cell:人子宮頸內(nèi)膜上皮細胞系
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