"HCC70 Cell:人乳腺導管癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
TGBC11TKB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2085細胞、NCTC-3960細胞、OVCAR-433細胞
MKN-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12 SM細胞、108CC15細胞、NR-8383細胞
A549 ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC1細胞、NCI-H2023細胞、NCIH2122細胞
Panc-327細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEC-12細胞、SN12C細胞、SNU-C2B細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HCC70 Cell:人乳腺導管癌細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復(fù)蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:4-1:6傳代;每周換液2-3次。
培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SV40-MES13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRC Y細胞、G519細胞、149 PT細胞
SCC15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1092細胞、NCI-H1694細胞、Colo699細胞
SW626細胞系相關(guān)產(chǎn)品:XWLC-05細胞、VMRC-LCD細胞、HCV29細胞
Eca 109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO8910/PM細胞、PC 12細胞、SNU869細胞
U-2 OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL 1-0細胞、HSAS3細胞、MMQ細胞
細胞生長特性:貼壁生長
HCC70 Cell:人乳腺導管癌細胞系
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性:上皮樣
TEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL.CL2細胞、SK Mel 2細胞、LM3細胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC 893細胞、JVM2細胞、LS-411N細胞
Reuber H-35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:STO細胞、Hs940-T細胞、PL 5細胞
SPC-A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H548細胞、NCIH1793細胞、HMEC-1細胞
H1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-CA 432細胞、KCL22S細胞、YAC細胞
NCI-HUT-125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos.2G6.4C10細胞、Jurkat E6細胞、C33細胞
HFLS-RA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Evsa-T細胞、J774 A.1細胞、RAW 264.7細胞
HCC70 Cell:人乳腺導管癌細胞系
C-32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EST81細胞、Cloudman M3細胞、UK Pan-1細胞
PTK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Medical Research Council cell strain-9細胞、SKRC-42細胞、SHI-1細胞
U138細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ-1細胞、SW-1353細胞、EC-9706細胞
MDAMB134VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R2C細胞、HCC0015細胞、RPMI 1846細胞
OKa-C-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-1788細胞、C33細胞、N-87細胞
H-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞
Calu-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-140細胞、BCAP37細胞、NCI-BL2141細胞
RA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T47D細胞、NCIH2291細胞、MV522細胞
OB2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞
OB2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞
SKG IIIa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS578T細胞、NIH:OVCAR-3細胞、WEHI 3細胞
NCI H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU.86.86細胞、CAL51細胞、SNU-387細胞
COLO-320-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 433細胞、TERT-RPE1細胞、RPTEC/TERT1細胞
MV411細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC7細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、PFSK細胞
NIH 3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR42J細胞、KYSE-150細胞、RPMI-2650細胞
FU-OV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH526細胞、MDA-MB-231-GFP細胞、U-CH1細胞
Homo sapiens No. 578, breast cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMK-1細胞、Ramos.2G6.4C10細胞、COLO 206F細胞
CTSC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF細胞、Nb2-11細胞、SU-DHL-5細胞
NCI-H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82COT細胞、SKMEL28細胞、HT144-mel細胞
ARIP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞
Kasumi 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2-11細胞、PC.3細胞、SK_N_FI細胞
H-1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-2細胞、BE(2)M-17細胞、HCC1428細胞
SHIN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO8910PM細胞、H187細胞、PC 61細胞
108CC15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW 42細胞、BHP10-3細胞、RT 112細胞
LS 180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-1080細胞、MODE-K細胞、H-661細胞
HEK293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNMC細胞、OCI AML4細胞、U87MG細胞
NCIH748細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375S2細胞、Central Adrenergic TH-expressing a細胞、SUDHL-10細胞
MALME.3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、SP-2細胞
PA-TU S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H322T細胞、IMR 32細胞、NCI-ADR-RES細胞
TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-1155細胞、H-2052細胞、Panc05.04細胞
OVCAR 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSCC1細胞、HIEC細胞、NPA-87細胞
BC-028細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHC細胞、H446細胞、IAR20細胞
Hs-729-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI8226細胞、OCILY-10細胞、MM96L細胞
LICR-LON-HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW-38細胞、HOP-62細胞、H2023細胞
NKM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC 10細胞、RD-2細胞、766T細胞
SK-Col-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1838細胞、NIE-115細胞、TYK-nu細胞
SV-HUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AD-293細胞、231-luc細胞、NCM356細胞
U-251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1116細胞、EC-GI-10細胞、P 3 HR 1細胞
UCLA-SO-M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C22細胞、NCIH1563細胞、MLE 12細胞
Mono Mac 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841CoN細胞、Walker-Ca.256細胞、Hs 578Bst細胞
Mono Mac 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841CoN細胞、Walker-Ca.256細胞、Hs 578Bst細胞
MPVECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 239A細胞、PL-9細胞、Hs819.T細胞
KM H-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1838細胞、Kit 225細胞、AZ521細胞
HCC70 Cell:人乳腺導管癌細胞系
HK-2 [Human kidney]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Arizona Cell Culture-812細胞、KBM-7/Hap8細胞、H-522細胞
Panc8.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04680細胞、Nb2a細胞、NCIH660細胞
SKLU01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 239細胞、MM-1S細胞、ATDC-5細胞
H847細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRO細胞、Huh 7.5.1細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞
16-HBE14o細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12-PM6細胞、HEC1-B細胞、P-388D1細胞
C3H/10T1/2 clone 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 32細胞、PIG1細胞、RPMI-8402細胞
BC-028細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHC細胞、H446細胞、IAR20細胞
GM06141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-I細胞、THP 1細胞、NCI N87細胞
DB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGB細胞、NBL-3細胞、HEL299細胞
Spodoptera frugiperda clone 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-Sf21細胞、VP 267細胞、KBM5細胞
C-33A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH740細胞、CEM-T4細胞、PC3M-IE8細胞
Hs940-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2228細胞、H-1688細胞、RN細胞
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