"HCC1143 Cell:人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
H2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-6(OAN)細胞、MC/CAR細胞、IGR-OV1細胞
OSKM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMEC/D3細胞、Hs 839.T細胞、CCD-841-CoTr細胞
Roswell Park Memorial Institute 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y1細胞、H-2087細胞、SRA 01/04細胞
MCF 10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly01細胞、HBdSMC細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HCC1143 Cell:人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2—1:4傳代,每周換液2—3次
細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Strain L-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LED-WiDr細胞、H1915細胞、MT-4細胞
HPASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW780細胞、Hs-600-T細胞、PAMC82細胞
Eca-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL1細胞、F-36P細胞、HCMEC(BL12-H)細胞
CG-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 4.03細胞、K562/ADP細胞、H647ell細胞
LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2347細胞、DSL-6A-C1細胞、RIMEC細胞
細胞生長特性:貼壁生長
HCC1143 Cell:人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
細胞形態(tài)特性:上皮樣
C3H 10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA 46細胞、H2126細胞、HCC44細胞
CCD-841-CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEF (CF-1)細胞、LS513細胞、HCoEpiC細胞
KNS-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1876細胞、RS1細胞、BRL 3A細胞
HBL100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLB985細胞、Mel RM細胞、SU-DHL-10細胞
KYSE 140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU19-19細胞、SG231細胞、LC1/Sq細胞
MCF-7B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat E6.1細胞、TFK-1細胞、NCIH1703細胞
WERI Rb-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LY細胞、SW1116細胞、U-343 MG細胞
HCC1143 Cell:人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
Human Epidermoid carcinoma #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1569細胞、NBL-4細胞、NS20Y細胞
HANK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA-38細胞、H-1781細胞、NCI-H322細胞
Huh7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H716細胞、MM96L細胞、LoMeT-ccRcc細胞
U 266細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-4細胞、AML-EOL-1細胞、HCS-2/8細胞
Ramos 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBE 135-E6/E7細胞、SK-N-BE-2c細胞、Sc-1細胞
RCC-10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2細胞、HCC0038細胞、NHLF細胞
P3/X63/Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1666細胞、HFSF細胞、CAL-62細胞
CoCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、143BTK-細胞、J774A.1細胞
U-87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAC細胞、L-6TG細胞、ST 486細胞
U-87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAC細胞、L-6TG細胞、ST 486細胞
P3J.HR1K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-510A細胞、B16BL6細胞、SUSM1細胞
CA-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT T15細胞、VK2 (E6/E7)細胞、L6565細胞
HSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 H細胞、HOP 62細胞、WI-38細胞
Jurkat-FHCRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK-1細胞、SKLMS1細胞、H-508細胞
LC-2 ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C17.2細胞、IMR-32細胞、SMA 560細胞
Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1623細胞、H-719細胞、OVSAHO細胞
CORL23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞、RF/6A細胞
COLO320-DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuO9細胞、RBMEC細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞
H-1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Detroit 562細胞、NTERA-2 clone D1細胞、HuPT3細胞
MES23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-1040細胞、L Wnt-3A細胞、SN12CPM6細胞
HUVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1436細胞、H2081細胞、SKMEL-1細胞
SVG(P12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BPH1細胞、NCI-SNU-886細胞、COLO320-DM細胞
MHCC-LM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-28I2細胞、JROECL19細胞、Hs934T細胞
HBE135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERIRb1細胞、NFS 60細胞、GalK1細胞
HS-766-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuCCT-1細胞、COLO 394細胞、ONS-76細胞
KYSE-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM190細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、SKNBE(1)細胞
RPMI 2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIMT細胞、HuLEC-5a細胞、H-735細胞
SNU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA436細胞、U-138MG細胞、U373-MG細胞
CA46細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-69細胞、C22 (Clara)細胞、Kasumi-6細胞
CEMx721.174.T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn5B1-4細胞、TE-13細胞、2BS細胞
NCI-H1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO-8910PM細胞、U87MG細胞、FHCRC-11細胞
H2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J B-V細胞、CSQT-2細胞、McA-RH8994細胞
MIA PaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H82細胞、SP2細胞、DoTc2-4510細胞
TCCPAN2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEC細胞、QGP-1細胞、OP9細胞
OLN-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA 01/04細胞、C3H/10T1/2細胞、NS1/1-Ag4.1細胞
HEC-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Oka-C1細胞、SK Col 1細胞、OEC33細胞
K1735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H 10T1/2細胞、Hs 742.T細胞、LI7細胞
JJN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOC1細胞、CW2細胞、UMUC14細胞
NL20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN m5F細胞、MLFC細胞、LTEP-sm 1細胞
PAN 02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFM-223細胞、MTEC1細胞、RAW-264.7細胞
M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:1E8-H細胞、H548細胞、Panc-03.27細胞
Co 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs1.Tes細胞、KNS81細胞、KYSE 270細胞
H660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE5細胞、MC3T3-E1(C4)細胞、UPCI-SCC-90細胞
HCC1143 Cell:人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
HPAEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon-38細胞、IMR-90細胞、hRPTC細胞
HCC4006細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KAT-5細胞、HCC-94細胞、H-1184細胞
NCIH196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES 2細胞、AZ521細胞、ZR75-1細胞
OP9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU354細胞、P3X63 Ag8細胞、HCC-1187細胞
AU-565細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCLC-103H細胞、Clone 166細胞、Panc04.03細胞
C33-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly03細胞、A-498細胞、NGP細胞
NCI-SNU-601細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87 MG細胞、NIH3T3-L1細胞、H2591細胞
P31FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-16細胞、ME1細胞、FU-OV-1細胞
KYSE 180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2108細胞、OVCAR-8細胞、SBC-3細胞
HGBEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS-2B細胞、MGH-U1 (EJ)細胞、LNCaP C4-2B細胞
NW-MEL-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2(LLc1)細胞、D324 Med細胞、NCIH1944細胞
293 H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC5細胞、SJCRH30細胞、NCIH2170細胞
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