"Kuramochi Cell:人卵巢癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
MV411細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC7細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、PFSK細胞
Walker-256-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22R細胞、EFM192細胞、MV(4;11)細胞
H-889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞
Michigan Cancer Foundation-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239細胞、Hs 888Lu細胞、SW-13細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Kuramochi Cell:人卵巢癌細胞系
細胞培養(yǎng)實驗相關(guān)問題總結(jié):支原體(mycoplasma)污染的細胞,是否能以肉眼觀察出異狀?不能。除極有經(jīng)驗之專家外,大多數(shù)遭受支原體污染的細胞株,無法以其外觀分辨之;支原體污染會對細胞培養(yǎng)有何影響?支原體污染幾乎可影響所有細胞之生長參數(shù),代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進行實驗前,必須確認細胞為mycoplasma-free,實驗結(jié)果之數(shù)據(jù)方有意義;偵測出細胞株有支原體污染時,該如何處理?直接滅菌后丟棄,以避免污染其它細胞株;CO2培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之;為何培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,顏色會偏暗紅色,且pH值會越來越偏堿性?培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,培養(yǎng)基內(nèi)之CO2會逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果,將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時,可以通入無菌過濾之CO2,以調(diào)整pH值;購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:10傳代;每周換液2-3次
培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MBT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9/GR細胞、M-14細胞、MHCC97H細胞
1E8-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 7666細胞、RBSMC細胞、LNCaP細胞
GM00346細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、BT474細胞、HFL-1細胞
WM-239細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8D1A細胞、Kit 225-K6細胞、2PK3細胞
HNE3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04678細胞、KYSE-410細胞、LM-TK-細胞
細胞生長特性:貼壁生長
Kuramochi Cell:人卵巢癌細胞系
細胞復蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性:上皮樣
Centre Antoine Lacassagne-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-548細胞、LNT-229細胞、NTERA2-cloneD1細胞
HT 1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4(S+L-)細胞、Panc-327細胞、NCIH1993細胞
KASUMI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:9L細胞、Tca-8113細胞、NCI-H295R細胞
Soleus clone 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Glomerular Endothelial細胞、HT 1080細胞、OCI-LY-10細胞
NCI-SNU-C2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU 86.86細胞、TE4細胞、TE4細胞
Hs 821.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH-35細胞、SK Mel 24細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞
HRGEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-18細胞、HTR8svn細胞、RERF-LCMS細胞
Kuramochi Cell:人卵巢癌細胞系
Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-UMC-11細胞、Saos2細胞、GT39細胞
NPA87-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 52PE細胞、Y3細胞、HT 1376細胞
SK Mel 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Earle's L cells細胞、SNK-6細胞、Mono Mac 6細胞
TE-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NGEC細胞、SK-N-BE(2)-C細胞、SUPB-15細胞
HEC1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2029細胞、GES1細胞、Bac12F5細胞
MKN28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞
CA46細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-69細胞、C22 (Clara)細胞、Kasumi-6細胞
HN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ANA-1細胞、MDA-MB 453細胞、OSA細胞
MOVAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM159PT細胞、KHYG細胞、M-O7e細胞
H1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca109細胞、HEK-293-FT細胞、EAC細胞
M210B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-20細胞、NCIH358細胞、H-920細胞
SUM149細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM7細胞、PA317細胞、SP-2/0-AG14細胞
MUG-Chor1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv1.Lu細胞、L細胞、SW 1783細胞
NBL-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL952細胞、H-2085細胞、WSUDLCL2細胞
NE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 180細胞、OV-2008細胞、MEC-1細胞
TN5B14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞
CC-LP-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA Dx5細胞、NCIH2052細胞、OVHM細胞
WM-239-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Daudi細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞、MKN-28細胞
H727細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM-1細胞、A2780/CP70細胞、NCI-H358細胞
PBL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H35細胞、RAW 264.7細胞、MA-782細胞
SW.620細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-215細胞、MCCAR細胞、SK-NMC細胞
MZ-CRC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2030細胞、KM933細胞、SUM 102細胞
FOX-NY細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-875細胞、C8161細胞、MLO-Y4細胞
293S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-34細胞、LC1sq細胞、RBL-2H3細胞
ARH77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-9細胞、SNU407細胞、P19細胞
GH3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC090細胞、HCT15細胞、293T細胞
KYSE 180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2108細胞、OVCAR-8細胞、SBC-3細胞
Hmy.2 CIR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Balb/c3T3細胞、NE1細胞、KYSE 450細胞
NCIH2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1.0細胞、SK-N-BE(1)細胞、LA 4細胞
KP-N-RT-BM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML3細胞、KAT5細胞、578T細胞
MES-23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J.HR1K細胞、TMD-8細胞、RT4細胞
TE14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 clone 8細胞、OVCAR10細胞、7404細胞
LNT-229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1435細胞、MAVER-1細胞、C-33A細胞
DLD1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AgC11x3A細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、Mahlavu細胞
H-1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaCa2細胞、HS-294-T細胞、253J-BV細胞
RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 266-4細胞、H-2195細胞、CCD-112 CoN細胞
H-146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1359細胞、H64細胞、KALS1細胞
T-98細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKml2細胞、MKN-28細胞、MDCK Type II細胞
HO8910細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1B細胞、HBZY 1細胞、H-2330細胞
J 82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK-13細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、REC細胞
CCD-112CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M 2B4細胞、EHEB細胞、RPMI 8402細胞
NCI-322細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2171細胞、H226細胞、NCI-H460細胞
RPTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES13細胞、293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞
Kuramochi Cell:人卵巢癌細胞系
M14-MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 361細胞、SW982細胞、CCD-966SK細胞
OV-1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C127細胞、SKMES1細胞、HCT-15細胞
8505C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC823細胞、NCI-H1930細胞、Danio rerio Gill細胞
Rat podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 239-A細胞、HCC2185細胞、CHL-1細胞
NP-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-4-II-E細胞、Huh7.5細胞、NCIH1105細胞
DU 4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL68細胞、32D.cl3細胞、K562/ADR細胞
Dami細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1954細胞、SK-NMC細胞、U-138MG細胞
HRA19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF1細胞、SW-1463細胞、IGROV1細胞
EFM-192C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33A細胞、MDAPC2B細胞、293-H細胞
HCC-1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞
PC-9/GR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞
GalK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaEs17細胞、OVCAR 432細胞、CEMC7細胞
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