"COS-1 Cell:SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:該細胞源自CV-1細胞株,經(jīng)轉(zhuǎn)染編碼野生型T抗原、起始點缺陷突變的SV40得到;細胞中整合有SV40基因組完整早期區(qū)段的單個拷貝。該細胞表達T抗原,適用于需要SV40T抗原表達的載體的轉(zhuǎn)染;保留SV40溶細胞性生長的特性;支持40℃時溫度敏感性A209病毒的復制;支持早期區(qū)段缺失的SV40純體的復制。因含有SV40的DNA序列,該細胞需要在2級生物安全柜中操作。
HCC-70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss/3T3細胞、HBL100細胞、C8D1A細胞
RMG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE-280細胞、NCI-H2110細胞、H82sclc細胞
CC-LP-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA Dx5細胞、NCIH2052細胞、OVHM細胞
AtT 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN13細胞、A549/ATCC細胞、MCF7/WT細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
COS-1 Cell:SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞系
細胞傳代時消化的問題:可以這樣說,對于需要消化傳代的細胞,每一次的消化都是對這個細胞存活與否,狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的,他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。(以難消化細胞為例);具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為步,目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。)3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比。)這是第三步。4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實際情況你自己把握)。這是第四步。其實還可以有第五步,對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低,保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了,如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞,像RAW264.7,僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較,去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步,除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外,還有一個更重要的作用就是,可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài),不成片不連體。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
如何進行細胞復蘇:1)從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時搖動令其盡快融化;2)從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻;3)離心,1000rpm,5min;4)棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞,計數(shù),調(diào)整細胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);5)次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)?!緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存,但為對數(shù)生長期細胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液;2)將凍存管放入液氮容器或從中取出時,要做好防護工作(戴棉手套),以免凍傷;3)凍存和復蘇用新配制的培養(yǎng)液。細胞復蘇的時候,有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后,放在室溫下,經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸,該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎?其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細節(jié)要注意的?一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口,再稍擰松蓋子,再放37度水浴鍋中搖溶,在將細胞轉(zhuǎn)移到裝有37度預熱過的培養(yǎng)基的試管中,迅速離心,再用培養(yǎng)基洗一遍。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
ROS 17/2.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLFa細胞、293 Ad5細胞、UMNSAH-DF 1細胞
GM02131細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-3960細胞、Rat Fetal Lung-6細胞、LICR-HN6細胞
SNU-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1648細胞、H-460細胞、TE-3A細胞
MHCC 97-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT-26 WT細胞、U-2OS細胞、Colon38細胞
NCI-H748細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARH 77細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞、COR-L26細胞
細胞生長特性:貼壁生長
COS-1 Cell:SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞系
細胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項:1.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈,消毒半小時以上。2.進入凈化室前先關(guān)閉紫外燈,打開超凈臺風機,等待30min以上,以排盡臭氧。3.穿好隔離衣,戴好口罩,帽子。4.風淋2分鐘。5.0.1%水泡手,擦干。6.點燃酒精燈;超凈臺內(nèi)應避免放入過多的物品;使用的吸管,滴管,試管,培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。7.打開各類瓶蓋前先過火,以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰,鑷子使用前應經(jīng)火焰燒灼。8.水平式風機的超凈臺,應使瓶口斜置,應盡量避免瓶口敞開直立。9.同一根吸管或滴管不應連續(xù)用于幾個不同的細胞系;吸取培養(yǎng)基的吸管應離開培養(yǎng)瓶或試管口0.5cm,避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口;以防止細胞系的互相混雜污染。10.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體,立即用酒精棉球擦凈。11.操作完畢后恢復工作臺面。
細胞形態(tài)特性:成纖維細胞樣
NCIH2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361mel細胞、A10細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞
LICR-LON-HN6-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:751細胞、VM-CUB-1細胞、IGR.OV1細胞
DMS-114細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞
RIN m5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2141細胞、ROS-17/2.8細胞、SF 295細胞
hSCC-25細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 295細胞、K1735細胞、HDF-a細胞
RKOAS451細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2(174 x CEM.T2)細胞、H-2141細胞、H-820細胞
HET-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3190細胞、Caco2-BBE細胞、LX-2細胞
COS-1 Cell:SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞系
H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUASMC細胞、JHH-2細胞、Daudi細胞
NCI-SNU-878細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VERO C 1008細胞、CCRF-CEM C7細胞、COR L279細胞
WB-F344細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H211細胞、Kit225/K6細胞、WM239A細胞
LCMS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRC-Y細胞、Tj-905細胞、CT-26細胞
TE354.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S.B.細胞、HCC44細胞、RS1細胞
NS1-Ag 4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Meat Animal Research Center-145細胞、AMO-1細胞、ESC細胞
ECC 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-2細胞、J774細胞、3T3 J2細胞
F-36P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepa 1-6細胞、NB9細胞、PLMVEC細胞
H19-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM07404細胞、OCI AML2細胞、SCL-II細胞
SKMEL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60 Clone 15細胞、HCC1954BL細胞、CHO-Lec1細胞
HUVEC-C[HUVEC]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N1S1細胞、M-07e細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞
HTh74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1568細胞、KG1A細胞、KY-50細胞
KFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YAC-1細胞、KYSE0030細胞、TK-10細胞
NCI-H1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC26細胞、H2030細胞、D-283 Med細胞
CCRF CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO81-1細胞、MKN 7細胞、2PK-3細胞
CMT.64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv.1.Lu細胞、NCI-H2135細胞、Mel-RM細胞
578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME1細胞、MES 23.5細胞、HT 29細胞
H358細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS1/1-Ag4.1細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、ACC-2細胞
Hs-274-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GI-1細胞、HeLa S-3細胞、Pfeiffer細胞
U343細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK AD293細胞、FO [Mouse myeloma]細胞、SKNBE(2)細胞
MADB106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JEG3細胞、SUM159PT細胞、Hs604T細胞
Lieming Xu-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC細胞、H810細胞、U251n細胞
GLC-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLCMK2細胞、INS-1E細胞、He-La細胞
RN-c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC-1細胞、X63細胞、NTERA-2細胞
H1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DAKIKI Clone 1細胞、MDA1386細胞、CACO2細胞
BCECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC403細胞、MCF-7/ADR-RES細胞、MDA-MB 468細胞
A 375細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 746T細胞、MCF-7/ADR細胞、451Lu細胞
H660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE5細胞、MC3T3-E1(C4)細胞、UPCI-SCC-90細胞
RASMCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2932細胞、JIMT1細胞、SKNBE2C細胞
COLO201細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duke University 4475細胞、BC-PAP細胞、Karpas422細胞
HSC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP 92細胞、Dami細胞、SNU620細胞
CEMC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDLF細胞、Jijoye細胞、H.Ep. #2細胞
WC00079細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549ATCC細胞、MKN74細胞、D 407細胞
Loucy細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2/C3A細胞、Mc Ardle 7777細胞、Hs294T細胞
TE-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT4細胞、COV434細胞、RPMI6666細胞
NCI-H774細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC14細胞、BE2_C細胞、CCC-HEL-1細胞
DU145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKN細胞、Mc Coy細胞、1.1B4細胞
HS 1.Tes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCFs細胞、NCI-747細胞、NCI-H-69細胞
IEC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293-EBNA細胞、COR-L23細胞、ME-180細胞
MUTZ3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero-76細胞、HCC202細胞、HUCCT1細胞
H4-II-E-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-624細胞、CESS細胞、THEECs細胞
UPCISCC154細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FTC133細胞、SK-N-BE(1)n細胞、138 MG細胞
H1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM9細胞、Caco-2BBe細胞、MRC-V細胞
COS-1 Cell:SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞系
ABC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-852-T細胞、Sci-1細胞、R1800[RA]細胞
L363細胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha-TC1-6細胞、H1568細胞、S180細胞
SKES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison 109細胞、Hs819.T細胞、HONE1細胞
JB6 Cl 30-7b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL-1細胞、Jurkat-77細胞、NCI-H2030細胞
COLO 680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVG(P12)細胞、J45.01細胞、5637細胞
HUVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QG-56細胞、HCC0078細胞、CL1-5細胞
CAL851細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CPA 47細胞、SNU216細胞、hTERT-RPE-1細胞
MM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV 4;11細胞、Tregs細胞、NIH-3T3細胞
P31-FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:801-D細胞、HCT 15細胞、SL-29細胞
SuDHL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578.Bst細胞、LS-411細胞、ChaGo K-1細胞
SU8686細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL3A細胞、PANC-28細胞、LuCL4細胞
BT 549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU4475細胞、A-72細胞、OCI-Ly3細胞
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