"RCC4 Cell:人腎癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞背景資料：腎透明細(xì)胞癌；男性
hCMEC/D3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC-83細(xì)胞、EBTr細(xì)胞、MN9D細(xì)胞
OKa-C-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-1788細(xì)胞、C33細(xì)胞、N-87細(xì)胞
BLO11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H508細(xì)胞、H522細(xì)胞、C918細(xì)胞
UCLA SO M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-220細(xì)胞、CEF細(xì)胞、C2BBe 1細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
RCC4 Cell:人腎癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問(wèn)題：可以這樣說(shuō)，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過(guò)這個(gè)問(wèn)題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長(zhǎng)的還挺好的，可是穿過(guò)幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來(lái)越差勁了。對(duì)于這個(gè)問(wèn)題，可以非?？隙ǖ卣f(shuō)，你的消化環(huán)節(jié)出問(wèn)題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長(zhǎng)越差。在消化的過(guò)程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問(wèn)題就是，細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒(méi)有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來(lái)對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來(lái)。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過(guò)的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰(shuí)長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來(lái)的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來(lái)的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒(méi)辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒(méi)必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來(lái)做比較，去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問(wèn)題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過(guò)８０%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無(wú)法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
M 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D.cl3細(xì)胞、NCIH187細(xì)胞、639 V細(xì)胞
CCD 966 SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780 CP70細(xì)胞、149PT細(xì)胞、BE2-C細(xì)胞
HEL-92_1_7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG-IIIa細(xì)胞、H4-IIE-C3細(xì)胞、NCI H226細(xì)胞
DU_145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ETCC-007細(xì)胞、FT-293細(xì)胞、RCC 7860細(xì)胞
NCI-H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 88 D1細(xì)胞、MCF.10A細(xì)胞、BCAP37細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
RCC4 Cell:人腎癌細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問(wèn)題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過(guò)程沒(méi)有問(wèn)題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問(wèn)題，還有確信拿來(lái)的細(xì)胞沒(méi)問(wèn)題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問(wèn)題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單，而且死板。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個(gè)問(wèn)題，太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會(huì)死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過(guò)７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過(guò)密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o(wú)論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問(wèn)題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問(wèn)題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見得太多了，別不當(dāng)會(huì)事。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說(shuō)明書
HPAF-II/CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSC細(xì)胞、GM-346細(xì)胞、SUP-B15細(xì)胞
KY70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞、SNU398細(xì)胞、Malme-3M細(xì)胞
LC1sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞、RPMI-8226S細(xì)胞、RenCa細(xì)胞
B16-F10-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.4細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NP69細(xì)胞
HuP-T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-6細(xì)胞、OCI/AML-2細(xì)胞、EL4細(xì)胞
MDA-MB-453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2444細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞、HS-729細(xì)胞
KGN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SO-RB50細(xì)胞、HS688AT細(xì)胞、SKCO1細(xì)胞
RCC4 Cell:人腎癌細(xì)胞系
LU165細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2-S細(xì)胞、hMSC-BM細(xì)胞、HCT 116細(xì)胞
Y-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞、Panc4.03細(xì)胞、HEC251細(xì)胞
H1404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：He-La細(xì)胞、Hs-343-T細(xì)胞、PT-67細(xì)胞
SKNBE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PGBE1細(xì)胞、C26細(xì)胞、DHL-2細(xì)胞
HVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML5細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞
KU812-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：639V細(xì)胞、B35細(xì)胞、Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞
Hep G2-Luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-5細(xì)胞、A673細(xì)胞、Ls-174-T細(xì)胞
HT-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS578細(xì)胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞、HcerEpic細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCKII細(xì)胞、NCI-HUT-596細(xì)胞、SK-ES細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCKII細(xì)胞、NCI-HUT-596細(xì)胞、SK-ES細(xì)胞
NPA 87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6TG細(xì)胞、32Dcl3細(xì)胞、Swiss 3T3細(xì)胞
BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L363細(xì)胞、OVISE細(xì)胞、H-358細(xì)胞
CHP-212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGM-1細(xì)胞、NCl-H157細(xì)胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞
WSU-DLCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1.289+BRCA1細(xì)胞、MuM-2C細(xì)胞、H.Ep.-2細(xì)胞
PSN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC4-10細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞、DiFi細(xì)胞
MOLM13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 85-1細(xì)胞、HCC-1954BL細(xì)胞、Hep-3B細(xì)胞
WM115F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2S細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞、LLC PK1細(xì)胞
A 549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC-SRA 01/04細(xì)胞、MMAc-SF細(xì)胞、MSB1細(xì)胞
CEM clone 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKM-1細(xì)胞、BTI-TN5B1-4細(xì)胞、SW-620細(xì)胞
HCC2218細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 819.T細(xì)胞、rHSC-99細(xì)胞、HCC-78細(xì)胞
GM00215A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOSEpiC細(xì)胞、H2122細(xì)胞、GM02219D細(xì)胞
TOV21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1563細(xì)胞、MDA-231細(xì)胞、OCI-Ly18細(xì)胞
PANC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIEC-6細(xì)胞、HIT T15細(xì)胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞
SKNBE(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-0WT細(xì)胞、HEL細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞
NCI-H1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A3細(xì)胞、Strain V細(xì)胞、B16細(xì)胞
UM-RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNEC30細(xì)胞、B95.8細(xì)胞、Hs832T細(xì)胞
NPC-TW-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB231細(xì)胞、OV433細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞
WiDr/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb1細(xì)胞、MDCK (NBL-2)細(xì)胞、Hs-343-T細(xì)胞
NFHIOSE-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCM356細(xì)胞、NCI-H2029細(xì)胞、NCIH1341細(xì)胞
H22-H8D8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL1細(xì)胞、NCI-H69C細(xì)胞、HS-294-T細(xì)胞
H-II-E-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta-TC6細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞、NE1細(xì)胞
BCECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC403細(xì)胞、MCF-7/ADR-RES細(xì)胞、MDA-MB 468細(xì)胞
P-3J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE14細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞
NCI H548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 38細(xì)胞、MDAMB175VII細(xì)胞、AQ-Mel細(xì)胞
OCM-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A.704細(xì)胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞、OCILY3細(xì)胞
PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHSY5Y細(xì)胞、QBI-293A細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞
Panc 05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMST6細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞
CORL279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MILE SVEN1細(xì)胞、SR細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞
8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-15細(xì)胞、H-1930細(xì)胞、NCI H295R細(xì)胞
FDCP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4P細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞、COR-L23細(xì)胞
SUM190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-801C細(xì)胞、MLE 12細(xì)胞、NOMO1細(xì)胞
HS-445細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC.3細(xì)胞、HLE-SRA-01/04細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞
NCI-BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro-2a細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞
RCC4 Cell:人腎癌細(xì)胞系
Karpas299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DAN-G細(xì)胞、PL-11細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞
A-375.S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-229細(xì)胞、H35細(xì)胞、HCT 15細(xì)胞
NKM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC 10細(xì)胞、RD-2細(xì)胞、766T細(xì)胞
HS5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：huH 1細(xì)胞、PLB985細(xì)胞、COLO829細(xì)胞
WM266細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE-39細(xì)胞、NTERA2-cloneD1細(xì)胞、293EBNA細(xì)胞
AMJ2C8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan 2細(xì)胞、BE2C細(xì)胞、X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞
UCLA SO M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER-1細(xì)胞、Mono Mac 6細(xì)胞、SF-295細(xì)胞
MZCRC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT-1A細(xì)胞、YD15細(xì)胞、HLF-a細(xì)胞
HSC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc3_27細(xì)胞、NCI-H498細(xì)胞、HuTu-80細(xì)胞
SW-900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD11細(xì)胞、Hs68細(xì)胞、AMO1細(xì)胞
MDA-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKOAS451細(xì)胞、BNL-CL.2細(xì)胞、HUT28細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 294T細(xì)胞、MDA-MB453細(xì)胞、UM-UC-14細(xì)胞
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