"LSC-1 Cell:大鼠肝星形細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:肝星形細胞;自發(fā)永生;Wistar SPCA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-688A-T細胞、BC-020細胞、CAL62細胞 TEV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4175細胞、Pan02細胞、Normal fibroblast-10細胞 Sp2/0-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL5細胞、OCI-Ly 8細胞、CEMO-1細胞 IMCD3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P560細胞、MKN-1細胞、NCI-H2052細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 LSC-1 Cell:大鼠肝星形細胞系 細胞培養(yǎng)相關(guān)問題總結(jié):冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37°C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管之爆裂;細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時,是否應(yīng)馬上去除DMSO?除少數(shù)特別注明對DMSO敏感之細胞外,絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞),在解凍之后,應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中,待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活;培養(yǎng)細胞時應(yīng)使用5%或10%CO2?或根本沒有影響?一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細胞培養(yǎng)時應(yīng)使用的CO2濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7g時,細胞培養(yǎng)時應(yīng)使用10%CO2;當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時,則應(yīng)使用5%CO2培養(yǎng)細胞。何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。培養(yǎng)基中是否須添加抗生素?除于特殊篩選系統(tǒng)中外,一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 Rainbow Trout Embryo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupB15W細胞、BOWES細胞、TOG細胞 COS-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87MG細胞、HS-695T細胞、TE-9細胞 T84細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-2780細胞、KU 812細胞、GTL16細胞 MS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1522細胞、MS-751細胞、YES-2細胞 SK-ChA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL細胞、PC-3細胞、TOV-112D細胞 細胞生長特性:貼壁 LSC-1 Cell:大鼠肝星形細胞系 正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 SK-ES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LK 2細胞、Emory University-3細胞、U-138 MG細胞 DSL-6A-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh 74細胞、SW-1271細胞、HMEC細胞 MDA-MB-231-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:211H細胞、Co320細胞、HFF1細胞 U118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2141細胞、TCCSUP細胞、SNU-878細胞 NB19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHC-ST1細胞、U-251 MG細胞、NCI-H1869細胞 DMS53細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca-Ski細胞、L428細胞、H1836細胞 NCI-H2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6細胞、H-7721細胞、HT55細胞 LSC-1 Cell:大鼠肝星形細胞系 NCI-H2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML 12細胞、MC38細胞、Tu 212細胞 PaTu 8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品:22Rv1細胞、HK2細胞、NCTC 929細胞 OCI-LY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 445細胞、L6細胞、SMMC7721細胞 VK2/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ESC細胞、H660細胞、C17細胞 CV-1 in Origin Simian-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1993細胞、PG-4 (S+L-)細胞、TF-1a細胞 Balb/c3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF 21AE細胞、DLM8細胞、BL6細胞 AN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kasumi 1細胞、alpha TC1 clone 6細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞 SU-86-86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCA 7細胞、NCIH820細胞、OVCA8細胞 B16/BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ketr 3細胞、Huh-7.5細胞、RWPE2細胞 Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S-3細胞、RPMI-8402細胞、G-Olig2細胞 KOSC-2 cl3-43細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu6細胞、MDCC-MSB1細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞 SNU-475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 10細胞、TF-1a細胞、SuDHL 10細胞 WM-239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 410細胞、BRL-3A細胞、Mel-624細胞 RFL 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT 325細胞、HEC1-A細胞、SUM52細胞 HCC1428細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-388細胞、CTLL-2細胞、NR8383.1細胞 GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1373細胞、BSC-40細胞、OCI-LY-7細胞 RC-4B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-14B細胞、MDA468細胞、MonoMac1細胞 NCI-SNU-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRMC細胞、RIN-14B細胞、THC-8307細胞 NCI-H524細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL8細胞、IMR32細胞、UPCI-SCC090細胞 Daudi細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 837細胞、SK-Mel 1細胞、NKM1細胞 RPMI2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H747細胞、HEC-1-A細胞、HS688AT細胞 NCI-BL2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO31細胞、H3255_DA細胞、HO8910/PM細胞 DI-TNC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12CPM6細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、hEM15A細胞 GC-2spd(ts)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、TMD8細胞、SKNBE-1細胞 FBHE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1781細胞、A2780/CP細胞、MHCC97L細胞 TE-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leydig細胞、KU1919細胞、T.T細胞 MOLT.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H295細胞、A2780S細胞、DCS細胞 PANC403細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFM223細胞、Hs294T細胞、H-929細胞 NCIH1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26細胞、KYSE50細胞、MOVAS細胞 SKO007細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L1210細胞、BL-6細胞、HNE-3細胞 X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU451細胞、H-196細胞、SHIN3細胞 OCI-Ly1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THPI細胞、Mahlavu細胞、HCC1500細胞 Ketr-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C42細胞、CCD 966SK細胞、MES-SA/Dx5細胞 Swiss 3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL 19細胞、624細胞、HNE2細胞 HUT 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1666細胞、SNU-475細胞、MEG-01細胞 P3-NS1/1Ag 4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SIRC細胞、VERO C 1008細胞、H-2122細胞 Ramos.G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞 3T6-Swiss albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9/S1細胞、STC-1細胞、G361細胞 293T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-64細胞、HL-60 clone15細胞、SMA560細胞 LWnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549 ATCC細胞、Epstein-Barr-3細胞、DMS 114細胞 MV4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30OHK細胞、K1細胞、BXPC3細胞 MLM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1581細胞、NPA-87細胞、GM03320D細胞 Hs 636 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNG-M細胞、Hs.27細胞、A-101D細胞 LSC-1 Cell:大鼠肝星形細胞系 Evsa T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-539細胞、U138細胞、IOSE 80細胞 Lewis Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI231細胞、UMNSAH/DF#1細胞、LIXC-002細胞 NCIH345細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 738細胞、MT4細胞、Jurkat clone A3細胞 Panc-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC3細胞、LC-2 ad細胞、MARC-145細胞 Buffalo Rat Liver-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCLCD細胞、Hs940.T細胞、Verda reno細胞 SK-N-BE-2c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1915細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞、ABC-1細胞 B16 F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL33細胞、H-1703細胞、LC-MS細胞 Cattle chondrocytes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178YR細胞、S37細胞、P3JHR1細胞 Hca-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO81細胞、RASMCs細胞、SK Mel 2細胞 H2.35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNT-229細胞、CCD1112Sk細胞、Karpas 299細胞 NCIH838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAVER1細胞、KMM-1細胞、NE-4C細胞 Tb 1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF.10A細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞、A2780CP細胞 "
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