"NPC-TW01 Cell:人鼻咽癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:鼻咽癌 NRK細胞系相關產(chǎn)品:DC2.4細胞、Sp2/O-Ag14細胞、NCTC-3960細胞 D341Med細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2405細胞、U20S細胞、MDA-MB-157細胞 769-P細胞系相關產(chǎn)品:143B細胞、MA 104細胞、RBE細胞 QBI-HEK 293A細胞系相關產(chǎn)品:EU-2細胞、MN9D細胞、CHAGOK1細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 NPC-TW01 Cell:人鼻咽癌細胞系 細胞培養(yǎng)實驗相關問題總結:支原體(mycoplasma)污染的細胞,是否能以肉眼觀察出異狀?不能。除極有經(jīng)驗之專家外,大多數(shù)遭受支原體污染的細胞株,無法以其外觀分辨之;支原體污染會對細胞培養(yǎng)有何影響?支原體污染幾乎可影響所有細胞之生長參數(shù),代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進行實驗前,必須確認細胞為mycoplasma-free,實驗結果之數(shù)據(jù)方有意義;偵測出細胞株有支原體污染時,該如何處理?直接滅菌后丟棄,以避免污染其它細胞株;CO2培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之;為何培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,顏色會偏暗紅色,且pH值會越來越偏堿性?培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,培養(yǎng)基內之CO2會逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結果,將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時,可以通入無菌過濾之CO2,以調整pH值;購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 MIN-6細胞系相關產(chǎn)品:SCC090細胞、DCS細胞、Caov-4細胞 DoHH-2細胞系相關產(chǎn)品:MSCs(mUCMSCs)細胞、Lung cancer-1/squamous細胞、RAW264.7細胞 H-2196細胞系相關產(chǎn)品:HTori 3細胞、PANC3.27細胞、C1R細胞 AML12細胞系相關產(chǎn)品:MC-3T3-E1細胞、PIG3細胞、Panc-08.13細胞 MSCs(mUCMSCs)細胞系相關產(chǎn)品:NCIH64細胞、NIH:OVCAR4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞 細胞生長特性:貼壁 NPC-TW01 Cell:人鼻咽癌細胞系 細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 NCIH2122細胞系相關產(chǎn)品:LN-382細胞、OVTOKO細胞、NCIH1581細胞 NCI-H1395細胞系相關產(chǎn)品:NCI-HUT-520細胞、MESSA細胞、H-748細胞 WI38細胞系相關產(chǎn)品:NCIH748細胞、WC00059細胞、CCRF/CEM-C7細胞 RH30SJ細胞系相關產(chǎn)品:End1/E6E7細胞、TCC-SUP細胞、HT22細胞 H-2029細胞系相關產(chǎn)品:NCTC-929細胞、UM-UC3細胞、SK MES 1細胞 rUCMSCs細胞系相關產(chǎn)品:HEK.EBNA細胞、SB細胞、ME16C細胞 KU812-F細胞系相關產(chǎn)品:639V細胞、B35細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞 NPC-TW01 Cell:人鼻咽癌細胞系 Hs-675-T細胞系相關產(chǎn)品:HO8910細胞、C4 I細胞、RPMI-8226S細胞 SU4細胞系相關產(chǎn)品:NW38細胞、MCA-38細胞、CAL-39細胞 S3-HeLa細胞系相關產(chǎn)品:Hi-five細胞、RPTEC/TERT 1細胞、HNTEC細胞 NCIH2405細胞系相關產(chǎn)品:H-865細胞、SHG 44細胞、143TK-細胞 HCC0827細胞系相關產(chǎn)品:RPMI-8402細胞、3 LL細胞、IBRS-2細胞 Epstein-Barr-1細胞系相關產(chǎn)品:HIT T-15細胞、HCC1359細胞、MDCC-MSB-1細胞 MM1.S細胞系相關產(chǎn)品:TKB1細胞、LM8細胞、V-79細胞 RCK-8細胞系相關產(chǎn)品:University of Arizona Cell Culture-893細胞、WC00079細胞、RPMI 7666細胞 YAC細胞系相關產(chǎn)品:NUGC-2細胞、SUDHL5細胞、MCA-205細胞 YAC細胞系相關產(chǎn)品:NUGC-2細胞、SUDHL5細胞、MCA-205細胞 S16細胞系相關產(chǎn)品:MS751細胞、Hep 3B2細胞、BEL-7404細胞 Huh 7.5.1細胞系相關產(chǎn)品:LM(TK-)細胞、SuDHL 2細胞、UM2細胞 Neuro2a細胞系相關產(chǎn)品:DKMG細胞、IPAM-WT細胞、H-1651細胞 OCI-Ly 3細胞系相關產(chǎn)品:32Dc3細胞、LA 4細胞、SR-786細胞 H2073細胞系相關產(chǎn)品:253J B-V細胞、CSQT-2細胞、McA-RH8994細胞 BAR-T細胞系相關產(chǎn)品:HEK-293F細胞、H22-H8D8細胞、CWR-22rv1細胞 UACC 893細胞系相關產(chǎn)品:M2-10B4細胞、RT-BM-1細胞、293S細胞 H209細胞系相關產(chǎn)品:HN6細胞、SKHEP1細胞、SPCA1細胞 HTR8細胞系相關產(chǎn)品:JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞 NK92MI細胞系相關產(chǎn)品:KYSE 450細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、Lu99A細胞 SUM 102PT細胞系相關產(chǎn)品:H660細胞、BC-009細胞、SK-LU-1細胞 PA12細胞系相關產(chǎn)品:R-1059-D細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、EMT-6細胞 Mahlavu細胞系相關產(chǎn)品:Sp2/0-Ag14細胞、MB468細胞、HO-1-N-1細胞 EB-2細胞系相關產(chǎn)品:Rainbow Trout Embryo細胞、U251n細胞、CHO-S細胞 SW-982細胞系相關產(chǎn)品:LADMAC細胞、C4I細胞、YD-38細胞 NuTu 19細胞系相關產(chǎn)品:RGE細胞、PT-K75細胞、HB611細胞 RASMC細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly8細胞、TPC-1細胞、WSU-DLCL-2細胞 CAKI1細胞系相關產(chǎn)品:Anip 973細胞、159 PT細胞、HTR8svn細胞 EB-1細胞系相關產(chǎn)品:SUP-M2細胞、CTLA4 Ig-24細胞、SUD6細胞 SW-48細胞系相關產(chǎn)品:COLO 16細胞、H-2030細胞、B16 F1細胞 H1666細胞系相關產(chǎn)品:Hs 888.Lu細胞、H-2122細胞、LA795細胞 Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞系相關產(chǎn)品:L 540細胞、RMC細胞、P3-X63-Ag8-653細胞 PANC 1005細胞系相關產(chǎn)品:BEP2D細胞、Psi-2-DAP細胞、JVM-3細胞 CL1-5細胞系相關產(chǎn)品:HuH-1細胞、HEp-2細胞、SW 626細胞 Sf-21細胞系相關產(chǎn)品:KAT5細胞、MiaPaca.2細胞、PC10細胞 CD-18細胞系相關產(chǎn)品:B16 melanoma F10細胞、NCIH1573細胞、RAEC細胞 HCASMC細胞系相關產(chǎn)品:NR-8383細胞、J-774細胞、MA-104細胞 HSC6細胞系相關產(chǎn)品:HOP 92細胞、Dami細胞、SNU620細胞 SNU-C2B細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-435細胞、H-82細胞、HuLEC-5a細胞 OVCA432細胞系相關產(chǎn)品:KU 19-19細胞、REC-1細胞、H-838細胞 MDA-MB-231-GFP細胞系相關產(chǎn)品:EJ細胞、LuCL4細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞 Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞系相關產(chǎn)品:PC 12細胞、NCI-H810細胞、Hs 578.T細胞 WEHI 164細胞系相關產(chǎn)品:HFLS-OA細胞、H-250細胞、Neuro-2a細胞 NPC-TW01 Cell:人鼻咽癌細胞系 NS1-Ag4/1細胞系相關產(chǎn)品:MHH-CALL2細胞、MDA-MB-175細胞、BHK細胞 Hs 445細胞系相關產(chǎn)品:OP9細胞、TK.10細胞、H-1963細胞 SK-ES1細胞系相關產(chǎn)品:HS-5細胞、PSN1細胞、PFSK1細胞 OE-33細胞系相關產(chǎn)品:MEC1細胞、Hs 934.T細胞、KM12 SM細胞 H-23細胞系相關產(chǎn)品:L 363細胞、SK-N-BE(2C)細胞、NCI-H187細胞 Madison細胞系相關產(chǎn)品:RF/6A細胞、SF 126細胞、CBRH7919細胞 brain-derived Endothelial cells.3細胞系相關產(chǎn)品:NH-6細胞、RPMI 7951細胞、OCI-Ly 3細胞 HemECs細胞系相關產(chǎn)品:Beta-TC-6細胞、H-1184細胞、COS-7細胞 KYSE30細胞系相關產(chǎn)品:MCF7/WT細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、HCA7細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞系相關產(chǎn)品:95D細胞、Hs 940.T細胞、UACC812細胞 P3-X63.Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品:MonoMac 6細胞、SU-DHL-6細胞、BEL7405細胞 Hs 888Lu細胞系相關產(chǎn)品:Ramos 2G6 4C10細胞、T2細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞 "
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