"Caov-4 Cell:人卵巢癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：卵巢癌；女性
Calu-3細胞系相關產(chǎn)品：H-378細胞、OP-9細胞、Hs 611.T細胞
Caov-3細胞系相關產(chǎn)品：BLO 11細胞、LUDLU 1細胞、SUM-52細胞
LL/2細胞系相關產(chǎn)品：MDA-436細胞、TCCPAN2細胞、BEP2D細胞
NCIH810細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2126細胞、NFHIOSE-29細胞、LS513細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
Caov-4 Cell:人卵巢癌細胞系
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
FHL-124細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL3細胞、SkChA-1細胞、LUDLU1細胞
H-II-E-C3細胞系相關產(chǎn)品：beta-TC6細胞、MDCK-2細胞、NE1細胞
LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞系相關產(chǎn)品：H2347細胞、DSL-6A-C1細胞、RIMEC細胞
NCIH2073細胞系相關產(chǎn)品：BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞
COLO-680N細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞
細胞生長特性：貼壁
Caov-4 Cell:人卵巢癌細胞系
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
DAKIKI Clone 1細胞系相關產(chǎn)品：A-431細胞、766T細胞、LLC-MK-2細胞
SK HEP-1細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293-H細胞、HTR8細胞、HTori 3細胞
MHCC 97-H細胞系相關產(chǎn)品：NIT-1細胞、SW-626細胞、16HBEo-細胞
RPMC細胞系相關產(chǎn)品：RA-FLSs細胞、NeHepLxHT細胞、H2286細胞
Lu99A細胞系相關產(chǎn)品：B16-F1細胞、Renal Carcinoma細胞、MBT2細胞
SK-N-SH細胞系相關產(chǎn)品：Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、DMS-79細胞、STC-1細胞
RCCJF細胞系相關產(chǎn)品：HSC-1細胞、UMUC1細胞、CLONE M3細胞
Caov-4 Cell:人卵巢癌細胞系
CCRF SB細胞系相關產(chǎn)品：H-1355細胞、KTCTL-140細胞、A101D細胞
RT4細胞系相關產(chǎn)品：U-118-MG細胞、OLN 93細胞、SVOG細胞
RLE-6TN細胞系相關產(chǎn)品：C3H10T1/2CL8細胞、U-251MG細胞、RWPE-1細胞
GM04154B細胞系相關產(chǎn)品：CG-4細胞、HCV-29細胞、SNU-354細胞
HLE-B3細胞系相關產(chǎn)品：2PK-3細胞、HTSMC細胞、RPE-hTERT細胞
NCIH1993細胞系相關產(chǎn)品：3AA細胞、KPL4細胞、HUV-EC-C細胞
IGROV細胞系相關產(chǎn)品：HCT8細胞、NFHIOSE-80細胞、PA-1細胞
MDA361細胞系相關產(chǎn)品：HCC0038細胞、RCC 786-O細胞、QG56細胞
COLO-357細胞系相關產(chǎn)品：SNU449細胞、S91細胞、MM1.S細胞
PANC0813細胞系相關產(chǎn)品：293c18細胞、P3/ag細胞、BRL-3A細胞
NCI N87細胞系相關產(chǎn)品：MGC-803細胞、MV4-11細胞、NCIH208細胞
SW1222細胞系相關產(chǎn)品：HRA 19細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞、HCC941122細胞
NCI-H102細胞系相關產(chǎn)品：KHYG1細胞、B/C3T3細胞、WIL2 S細胞
Hs737T細胞系相關產(chǎn)品：KLN 205細胞、MDAMB468細胞、HA細胞
639-V細胞系相關產(chǎn)品：PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞
MT-2J細胞系相關產(chǎn)品：SKNAS細胞、FUOV1細胞、293/EBNA細胞
C41細胞系相關產(chǎn)品：HEK293-A細胞、C2A細胞、EMT6細胞
HOC細胞系相關產(chǎn)品：H-2073細胞、293S細胞、H1648細胞
EFO27細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2171細胞、H1417細胞、Balb/c 3T3細胞
T 98 G細胞系相關產(chǎn)品：FHs74Int細胞、MLA144細胞、MPC-83細胞
H1666_DA細胞系相關產(chǎn)品：RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞
SW403細胞系相關產(chǎn)品：V-79細胞、no-11細胞、6T-CEM細胞
S37細胞系相關產(chǎn)品：HBE135-E6E7細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞、NCIH716細胞
NCI-H441細胞系相關產(chǎn)品：HCC-366細胞、MN 60細胞、DITNC1細胞
OCI-LY-1細胞系相關產(chǎn)品：Hs 445細胞、L6細胞、SMMC7721細胞
U343MG細胞系相關產(chǎn)品：JM-Jurkat細胞、RPMI 1788細胞、U87-MG細胞
Mink細胞系相關產(chǎn)品：ROS 17/28細胞、SUIT2細胞、Human Microglia Clone 3細胞
PC3M-1E8細胞系相關產(chǎn)品：CEMx721.174.T2細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞、Hs839.T細胞
NCI.H226細胞系相關產(chǎn)品：HEC1-B細胞、5-8F細胞、NCI H508細胞
KATO III細胞系相關產(chǎn)品：MES 23.5細胞、PLC8024細胞、TGW-I-nu細胞
CaES-17細胞系相關產(chǎn)品：MDA453細胞、MNNGHOS細胞、H211細胞
HCC38細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2171細胞、Hs 766.T細胞、MGC803細胞
8505C細胞系相關產(chǎn)品：BGC823細胞、NCI-H1930細胞、Danio rerio Gill細胞
SK-N-BE2細胞系相關產(chǎn)品：SNT8細胞、NCI-H676B細胞、SUM159細胞
WEHI-3B細胞系相關產(chǎn)品：Okayama University Medical School-23細胞、H1385細胞、GA-10-Clone-4細胞
MDA134細胞系相關產(chǎn)品：RBL 1細胞、H-1993細胞、MDCK細胞
HPAF細胞系相關產(chǎn)品：Hs 729細胞、SKMEL-24細胞、SNK1細胞
M-20細胞系相關產(chǎn)品：HCCC9810細胞、CAL148細胞、MUVEC細胞
BALB/3T3細胞系相關產(chǎn)品：GM03573細胞、HEL 92.1.7細胞、T9細胞
SNU251細胞系相關產(chǎn)品：LS 513細胞、L-Wnt-3A細胞、AN3-CA細胞
HBZY1細胞系相關產(chǎn)品：VeroE6細胞、Mac-1細胞、LS 174T細胞
QGP 1細胞系相關產(chǎn)品：H-35細胞、LTEPsm細胞、CATH.a細胞
Hepa-RG細胞系相關產(chǎn)品：SF 763細胞、DHL4細胞、NCIH1373細胞
Caov-4 Cell:人卵巢癌細胞系
CCRF-CEM C1細胞系相關產(chǎn)品：HIMEC細胞、FaDu細胞、HCT-GEO細胞
C-4I細胞系相關產(chǎn)品：BMF細胞、YH-13細胞、Pa18C細胞
HFL 1細胞系相關產(chǎn)品：MIA Paca2細胞、Panc 04.03細胞、HCC-1937細胞
PANC-1細胞系相關產(chǎn)品：HIEC-6細胞、HIT T15細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞
RPMI6666細胞系相關產(chǎn)品：CCRF/CEM-C7細胞、MPP89細胞、DH 82細胞
HRA19細胞系相關產(chǎn)品：UMNSAH-DF1細胞、SW-1463細胞、IGROV1細胞
MDA 231-LM2-4175細胞系相關產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、Ca761細胞、H719細胞
Kit 225-K6細胞系相關產(chǎn)品：3T3-F442A細胞、PIEC細胞、SK-MEL-3細胞
PL45細胞系相關產(chǎn)品：4T1細胞、NHDF細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞
PC615.3細胞系相關產(chǎn)品：HCC827細胞、LIM1215細胞、BEL7402細胞
LoVo細胞系相關產(chǎn)品：KYSE 270細胞、SNU878細胞、NCI-H1105細胞
Human Foreskin Fibroblast細胞系相關產(chǎn)品：STC-1細胞、TE-85細胞、CF PAC-1細胞
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