"201T Cell:人肺腺癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:肺腺癌;男性 WiDr細胞系相關產品:HPAF細胞、TOV-112細胞、L cell細胞 CCD-18Co細胞系相關產品:TW 01細胞、NCI-157細胞、A2780 CP70細胞 BT-325細胞系相關產品:SNU601細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NCI-H87細胞 KYSE-410細胞系相關產品:TE1細胞、SKMEL-1細胞、BTT739細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 201T Cell:人肺腺癌細胞系 細胞培養(yǎng)實驗相關問題總結:支原體(mycoplasma)污染的細胞,是否能以肉眼觀察出異狀?不能。除極有經驗之專家外,大多數(shù)遭受支原體污染的細胞株,無法以其外觀分辨之;支原體污染會對細胞培養(yǎng)有何影響?支原體污染幾乎可影響所有細胞之生長參數(shù),代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進行實驗前,必須確認細胞為mycoplasma-free,實驗結果之數(shù)據(jù)方有意義;偵測出細胞株有支原體污染時,該如何處理?直接滅菌后丟棄,以避免污染其它細胞株;CO2培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之;為何培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,顏色會偏暗紅色,且pH值會越來越偏堿性?培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,培養(yǎng)基內之CO2會逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結果,將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時,可以通入無菌過濾之CO2,以調整pH值;購買之細胞冷凍管經解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 造成實驗室細胞污染常見情況總結:細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 NUGC3細胞系相關產品:VMRC-RCZ細胞、SU-DHL6細胞、16-HBEo細胞 LLC-PK(1)細胞系相關產品:Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞、mRTEC細胞、HLMVEC細胞 LAPC-4細胞系相關產品:MESSA Dx5細胞、COR-L51細胞、B95.8細胞 MDA134細胞系相關產品:RBL 1細胞、H-1993細胞、MDCK細胞 U266B1細胞系相關產品:OV433細胞、EO771細胞、OV1063細胞 細胞生長特性:貼壁 201T Cell:人肺腺癌細胞系 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質,對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 SK-MES細胞系相關產品:624-mel細胞、BBE細胞、MPP 89細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞系相關產品:HIBEpiC細胞、HRA19細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞 RGE細胞系相關產品:Hs 683.T細胞、L615細胞、NOZC-1細胞 H1184細胞系相關產品:OV-CA 432細胞、KCL22S細胞、YAC細胞 Leukemia 1210細胞系相關產品:293T細胞、CL 1-0細胞、U-2OS細胞 HEL 92.1.7細胞系相關產品:MA104細胞、MSTO-211 H細胞、T-24細胞 Hs 934.T細胞系相關產品:MV4-11細胞、NCIH2030細胞、G 401細胞 201T Cell:人肺腺癌細胞系 P3.NS-1/1.Ag4.1細胞系相關產品:BJAB細胞、SKUT1細胞、B16F1細胞 Panc_04_03細胞系相關產品:YD38細胞、J 111細胞、SNU-739細胞 bEND.3細胞系相關產品:ATDC5細胞、KP-N-NS細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞 COLO-16細胞系相關產品:OUMS27細胞、P3-X63-Ag8.653細胞、SW900細胞 32D.cl3細胞系相關產品:Mouse Podocyte Clone-5細胞、LS-411N細胞、QBC939細胞 NPA細胞系相關產品:Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞 MXI細胞系相關產品:Earles's cells細胞、HET-1A細胞、HepG2-luc細胞 BMF細胞系相關產品:TK10細胞、SW 1990細胞、N9細胞 SF 539細胞系相關產品:SNU739細胞、HTR-8/SV-neo細胞、NH6細胞 SF 539細胞系相關產品:SNU739細胞、HTR-8/SV-neo細胞、NH6細胞 OCI-Ly3細胞系相關產品:C8166細胞、WERI-Rb-1細胞、PLA801D細胞 GM 637細胞系相關產品:TALL 1細胞、MV-1-Lu細胞、HCT15細胞 H-64細胞系相關產品:IOSE-80細胞、RDES細胞、HPASMC細胞 KMS-11細胞系相關產品:NOR10細胞、NCIH2106細胞、BT細胞 G-Olig2細胞系相關產品:C3H10T1-2細胞、SNUC1細胞、Calu 6細胞 PC 61 5.3細胞系相關產品:NE1-E6E7細胞、ST2細胞、HT 1197細胞 HUVSMC細胞系相關產品:H1436細胞、H2081細胞、SKMEL-1細胞 MUM2B細胞系相關產品:EL4細胞、H-187細胞、KP-N-RT-BM-1細胞 SK-UT-1細胞系相關產品:TE-14細胞、3-LL細胞、HPAEpiC細胞 RPMI #8226細胞系相關產品:He La細胞、LICR-LON-HN6-R細胞、SKNBE-2細胞 BE(2)-M17細胞系相關產品:H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞 SKMEL-24細胞系相關產品:MDA-134細胞、AE 1201細胞、MV4II細胞 L-6 myoblast細胞系相關產品:P30-OHKUBO細胞、SKCO-1細胞、TALL-104細胞 HOS-143B細胞系相關產品:DSL6A/C1細胞、SK_N_FI細胞、RCCJF細胞 KM933細胞系相關產品:Psi-2 DAP細胞、SK-Mel1細胞、BT549細胞 118 MG細胞系相關產品:HNE3細胞、LK-2細胞、B16/F10細胞 MRC-9細胞系相關產品:NCIH1155細胞、Hep-3B細胞、SNU-C2A細胞 HSC-4細胞系相關產品:RPMC細胞、COLO 679細胞、SK-N-BE細胞 RM1細胞系相關產品:NCIH208細胞、RAMSCs細胞、CFPAC-1細胞 DHL-8細胞系相關產品:NS-1細胞、CAL-51細胞、PTK 2細胞 Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞系相關產品:LIM 1215細胞、HMC-1細胞、HuH28細胞 OVCAR 4細胞系相關產品:TSCC1細胞、HIEC細胞、NPA-87細胞 A375-MEL細胞系相關產品:Hs 746.T細胞、SKLU-1細胞、Porcine Kidney-15細胞 B10BR細胞系相關產品:NCI-H838細胞、OVCA5細胞、IPEC-1細胞 Hepa 1-6細胞系相關產品:H-2122細胞、UCH-1細胞、OCM1細胞 C32 [Human melanoma]細胞系相關產品:T/GHA-VSMC細胞、WC00097細胞、SCC-15細胞 RBL-I細胞系相關產品:PFSK1細胞、B16細胞、Institute for Medical Research-32細胞 MV411細胞系相關產品:SCC7細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、PFSK細胞 NCIH1836細胞系相關產品:WM-451Lu細胞、HUT-125細胞、OVCAR 433細胞 Panc-1-P細胞系相關產品:NCI-H460細胞、GM03570E細胞、PLA801-95D細胞 HBE細胞系相關產品:NCI-446細胞、RL細胞、mIMCD3細胞 CNLMG-B5537SKIN細胞系相關產品:UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞 Calu6細胞系相關產品:Ra #1細胞、RPMI8402細胞、HEK-A細胞 201T Cell:人肺腺癌細胞系 P-815細胞系相關產品:P3-X63-Ag8細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞、Panc-327細胞 CCD33Co細胞系相關產品:T-47D細胞、U118-MG細胞、Leukemia L1210細胞 AN3細胞系相關產品:Kasumi 1細胞、alpha TC1 clone 6細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞 PC3-M細胞系相關產品:Hs 611.T細胞、H-647細胞、HO-8910細胞 SW 626細胞系相關產品:LC-1/sq細胞、HK-2 [Human kidney]細胞、159 PT細胞 Lu-99A細胞系相關產品:P3X63 Ag8細胞、HPAF II細胞、CHO K1細胞 U-2OS細胞系相關產品:RT 112細胞、OLN93細胞、NS653細胞 RPMI 8402細胞系相關產品:Hs-611-T細胞、AML-2細胞、HT-1197細胞 ASH3細胞系相關產品:University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、MM1細胞、NCTC-929細胞 H1648細胞系相關產品:HFSF細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、HBE細胞 L 1210細胞系相關產品:BHP10-3細胞、NCI-SNU-5細胞、NCI-H2073細胞 HN-6細胞系相關產品:ANA-1細胞、SVG(P12)細胞、GM0637細胞 "
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