"Mel-RM Cell:人黑色素瘤細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:黑色素瘤;神經(jīng)節(jié)轉(zhuǎn)移;男性 KYSE 70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC細胞、Pt-K1細胞、Kit225-K6細胞 SHI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAG細胞、U266 Bl細胞、LIM1215細胞 SCC15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1092細胞、NCI-H1694細胞、Colo699細胞 WiDr/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb1細胞、MDCK (NBL-2)細胞、Hs-343-T細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 Mel-RM Cell:人黑色素瘤細胞系 細胞培養(yǎng)相關(guān)問題總結(jié):冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37°C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管之爆裂;細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時,是否應馬上去除DMSO?除少數(shù)特別注明對DMSO敏感之細胞外,絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞),在解凍之后,應直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中,待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活;培養(yǎng)細胞時應使用5%或10%CO2?或根本沒有影響?一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細胞培養(yǎng)時應使用的CO2濃度。當培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7g時,細胞培養(yǎng)時應使用10%CO2;當培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時,則應使用5%CO2培養(yǎng)細胞。何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。培養(yǎng)基中是否須添加抗生素?除于特殊篩選系統(tǒng)中外,一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,培養(yǎng)基中不應添加任何抗生素。 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞 32Dcl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH3T3細胞、A 2780 CP細胞、WPMY-1細胞 MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHP-77細胞、JF305細胞、SKMEL28細胞 HTh 74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-415細胞、GM00637細胞、IOSE-Mar細胞 Loucy細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2/C3A細胞、Mc Ardle 7777細胞、Hs294T細胞 細胞生長特性:貼壁 Mel-RM Cell:人黑色素瘤細胞系 細胞復蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 RSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DH-L5細胞、TKB1細胞、UWB1.289細胞 UMNSAH-DF 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOL1細胞、SK.MEL.2細胞、H2052_MM細胞 TKB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip[973]細胞、GM05862細胞、NCI-H1694細胞 NCIH2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-382細胞、OVTOKO細胞、NCIH1581細胞 hs 68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSB1細胞、MOLP-2細胞、RBL2H3細胞 RGC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI7666細胞、RKO-AS45-1細胞、RCC10 RGB細胞 NFHIOSE-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCM356細胞、NCI-H2029細胞、NCIH1341細胞 Mel-RM Cell:人黑色素瘤細胞系 210RCY3-Ag1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32 [Human melanoma]細胞、QSG-7701細胞、NCIH650細胞 NCI-H1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253JBV細胞、NHEK細胞、ESC-410細胞 Colon-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM/0細胞、786-0WT細胞、LTEP-s細胞 P 815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPCA1細胞、SNU354細胞、EU-3細胞 P-815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞、Panc-327細胞 MFE296細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL1細胞、CCD-841CoTr細胞、HBL1細胞 VP229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1222細胞、HUT 226細胞、OCM-1A細胞 LX-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞 MOLM-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI N87細胞、Sol8細胞、WEHI3B細胞 MOLM-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI N87細胞、Sol8細胞、WEHI3B細胞 PT-K75細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM5細胞、NCIH548細胞、HMVEC細胞 HSAS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ-34細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞、HUTU80細胞 MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞 P388.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKHEP1細胞、BT 549細胞、U-87MG ATCC細胞 M14-MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 361細胞、SW982細胞、CCD-966SK細胞 DMS 273細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN-3細胞、OCI-Ly7細胞、Hs940-T細胞 M-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW626細胞、NIH 3T6細胞、BNL-CL.2細胞 Kit 225-K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-F442A細胞、PIEC細胞、SK-MEL-3細胞 SK.MEL.28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1770細胞、U-251細胞、Z138細胞 MDA-MB-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H23細胞、QSG7701細胞、H-1930細胞 NCI-SNU-878細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VERO C 1008細胞、CCRF-CEM C7細胞、COR L279細胞 H-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞 BEL 7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SVneo細胞、SW403細胞、NT-2細胞 ASH3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、MM1細胞、NCTC-929細胞 Tca8113細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 695T細胞、SUDHL-5細胞、Tu-212細胞 HT1197細胞系相關(guān)產(chǎn)品:190PT細胞、MKN1細胞、A-375細胞 A253細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE-hTERT細胞、ME16C細胞、LED-WiDr細胞 HEK293-EBNA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE細胞、M21細胞、IPECJ2細胞 MeT 5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1783細胞、IPI-2I細胞、Panc 02.03細胞 RCC-JF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUVEC-C[HUVEC]細胞、T47D細胞、EFM19細胞 SNU16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL39細胞、FL 62891細胞、RIN14B細胞 HKF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-157細胞、OV1063細胞、NCIH520細胞 Bovine Turbinate細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC-145細胞、TCC-PAN2細胞、RPMI-1846細胞 HLE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC細胞、D10G41細胞、NB4細胞 Malme3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1993細胞、MDCK2細胞、HEP3B2細胞 SPCA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-G2細胞、DHL-5細胞、CCD 966 SK細胞 Hs 729.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-820細胞、KYSE-50細胞、WM115mel細胞 32Dcl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH3T3細胞、A 2780 CP細胞、WPMY-1細胞 NCIH460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc02-H0細胞、COLO-357細胞、NCIH292細胞 Panc 8.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-3H-1細胞、TOV-112D細胞、Medical Research Council cell strain-5細胞 MFE 296細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK UT 1細胞、RPMI-7666細胞、NCI-SNU-1040細胞 SW579細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human ErythroLeukemia細胞、HS766T細胞、Ej138細胞 EST50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-1095Sk細胞、GLRK 13細胞、SKES1細胞 Mel-RM Cell:人黑色素瘤細胞系 MKN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK2細胞、KLN-205細胞、Ly3細胞 V79-GalK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05372E細胞、NCIH322細胞、NCIH2196細胞 HA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS/MNNG細胞、UCW 100細胞、SCC VII細胞 ME16C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H250細胞、Hs-611-T細胞、3T3J2細胞 HEC-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Oka-C1細胞、SK Col 1細胞、OEC33細胞 HT1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-13細胞、PANC.1細胞、OS-732細胞 Human Melanoma Cell Bowes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jeko1細胞、hEM15A細胞、Ca 9-22細胞 JS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-O RCC細胞、GM07404A細胞、CHP-126細胞 EBNA-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE(1)細胞、QBC(939)細胞、GP5d細胞 U-373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-132細胞、Huh7.5.1細胞、GS9L細胞 Hs 636 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNG-M細胞、Hs.27細胞、A-101D細胞 ND7/23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BA/F3細胞、SUSM-1細胞、NIH-3T3-L1細胞 "
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