"KYSE-520 Cell:人食管鱗癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：食管鱗癌；女性
BEAS-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA-1細胞、143TK-細胞、HCC0078細胞
BT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 19細胞、SHP-77細胞、SCC25細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375SM細胞、RL-95-2細胞、IB-RS-2細胞
A427細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 841 CoN細胞、SW 954細胞、RH-35細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
KYSE-520 Cell:人食管鱗癌細胞系
細胞消化過程總結(jié)：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復(fù)１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
WiDrTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-251細胞、H-1954細胞、CHO-K1細胞
BIU-87/Adr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 432細胞、PF-382細胞、KYSE50細胞
COLO-684細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 273細胞、NCI-SNU-668細胞、Hs852細胞
H295細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T173細胞、CMK細胞、KRCY細胞
R 2 C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841-CoTr細胞、MDA-468細胞、HCEC-12細胞
細胞生長特性：貼壁
KYSE-520 Cell:人食管鱗癌細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
T-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22-Rv1細胞、32D clone3細胞、SBC-5細胞
KCL22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC9811-P細胞、EC-GI細胞、Hs27F細胞
MDA231-LM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H716細胞、MA-782細胞、Reuber H-35細胞
NCI-H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE1-hTERT細胞、B16 subline B78細胞、22Rv-1細胞
HTori 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.653細胞、MEC1細胞、PGLH7細胞
TE-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leydig細胞、KU1919細胞、T.T細胞
Centre Antoine Lacassagne-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、High 5細胞、CD 18細胞
KYSE-520 Cell:人食管鱗癌細胞系
ECC 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-2細胞、J774細胞、3T3 J2細胞
CL11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH6細胞、P3-X63.Ag8.653細胞、HL7702細胞
PK15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 2664細胞、HEC151細胞、Mel RM細胞
HCCLM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAEC細胞、Panc_03_27細胞、EB-3細胞
PaTu 8988 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 02細胞、PLC細胞、NCTC clone 929細胞
PC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR-22rv1細胞、V79-GalK1細胞、JJN3細胞
SCC90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO.205細胞、U-373MG ATCC細胞、W256細胞
H-EMC-SS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC-40細胞、HS 683T細胞、U-373 MG細胞
GM01232E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.times.63 Ag8.653細胞、CATH.a細胞、RS 4;11細胞
GM01232E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.times.63 Ag8.653細胞、CATH.a細胞、RS 4;11細胞
HUT-226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC23細胞、COLO-699細胞、OVCAR10細胞
SK-N-MC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-02細胞、TE354T細胞、MDA-MB231細胞
Co-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN Cl-5F細胞、HCT-FET細胞、MDAMB415細胞
SK-N-BE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS 17/2.8細胞、CCD841CoN細胞、KYSE-410細胞
C2BBe1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3-M細胞、GT39細胞、HPAF2細胞
CEMO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1395細胞、MADB 106細胞、NUGC-3細胞
L cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBMF-7細胞、Hs839T細胞、SUM102PT細胞
GM00637H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A101D細胞、SUDHL16細胞、IM-95細胞
COR-L23/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-E6細胞、AtT 20細胞、NALM-6細胞
H735細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 934.T細胞、IPLB-Sf21AE細胞、CAL 12細胞
BALB/c 3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVHUC細胞、SUM-159細胞、H-1573細胞
BALB/c 3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVHUC細胞、SUM-159細胞、H-1573細胞
SB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU8686細胞、KG-1細胞、Tu 177細胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs822T細胞、SNU-449細胞、U266 B1細胞
SU-DHL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT78細胞、NCI-H661細胞、IOSE-29細胞
SUDHL-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-1細胞、OCI-Ly18細胞、LS123細胞
LICR-LON-HN6-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：751細胞、VM-CUB-1細胞、IGR.OV1細胞
HCC0095細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ha Fe細胞、L-1210細胞、VMRCLCD細胞
LTEP-s細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC6細胞、CCRF-CEM/S細胞、TR 146細胞
CCD-112CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M 2B4細胞、EHEB細胞、RPMI 8402細胞
NCI H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 159細胞、J82COT細胞、CCRF-CEM細胞
SNU886細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh 7.5細胞、SNU-719細胞、Hu-P-T3細胞
CCD 966 SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780 CP70細胞、149PT細胞、BE2-C細胞
MCF 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-GP細胞、MyLa2059細胞、NCI-H2444細胞
SHIN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO8910PM細胞、H187細胞、PC 61細胞
SF 295細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 453細胞、SW-1116細胞、HuP-T3細胞
JOSK-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNO-1細胞、Colo699細胞、HcaF細胞
NCI-H2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATO III細胞、32D/cl3細胞、KAT-5細胞
PCI-4M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT RPE1細胞、52PE細胞、WM451Lu細胞
OB2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞
OB2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞
H184A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：28SC細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞、Hs888 Lu細胞
High-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH446細胞、CL-40細胞、HCC-1359細胞
KYSE-520 Cell:人食管鱗癌細胞系
CTSC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFF細胞、Nb2-11細胞、SU-DHL-5細胞
343 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD6細胞、alpha-TC1.6細胞、H-747細胞
SK-MEL-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO cell clone K1細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞、PC 61.5.3細胞
U-343-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS-27細胞、CMT 93細胞、H1568細胞
HCT 116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1694細胞、MOLT-16細胞、Metastatic Variant-522細胞
H-1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2 Secreting細胞、H125細胞、Bat lung細胞
H-196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC941122細胞、NCIH510細胞、X63Ag8-653細胞
3T3J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMRC2細胞、CAL-39細胞、HEK-293-FT細胞
NS653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1869細胞、LAPC-4細胞、PLA-802細胞
HO-8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞
EVSAT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB49細胞、HCC0044細胞、PVEC細胞
LS1034細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK-52E細胞、P3HR1細胞、WM451細胞
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