"ETCC007 Cell:人乳腺導管癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:原位導管癌;女性 VMRC-RCZ細胞系相關產品:SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞 SKNSH細胞系相關產品:OVCAR 432細胞、Pfeiffer細胞、AR41P細胞 Hs-578Bst細胞系相關產品:MN 60細胞、P3-Jiyoye細胞、UMR-106細胞 GM16136細胞系相關產品:RGM1細胞、MUS-M1細胞、C3H10T1-2細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 ETCC007 Cell:人乳腺導管癌細胞系 因為細胞生長的時候肯定是要相互聯系,大部分的細胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細胞,單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話,傳代后細胞是不能貼壁的,這樣抱團的細胞就會死亡。所以,消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài),這個啊是非??季磕愕墓Ψ虻?!細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個,因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開,受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-2細胞就是如此。另外關于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到70%左右的時候就要傳代了,一旦發(fā)現細胞生長中已經有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞,你在洗的時候如果是用無血清1640去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關鍵的一點。先補充這么多,還會后續(xù)更新。再補充一點:傳代時PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現,用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時間,等到細胞一個個分離開來的時候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時間,不能時間太過了,要不然損傷細胞,細胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候,或者臨時沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細胞。 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現存活率不佳,原因比較復雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳;血清使用錯誤或血清的品質不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉速是根據相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉軸中心與離心套管底部內壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉數;RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數來表示單位。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 CEM.C1細胞系相關產品:10RGB細胞、NCIH23細胞、MN-9D細胞 NTERA-2 cl.D1細胞系相關產品:GM02219細胞、HMC3細胞、B16/F1細胞 SGC 7901細胞系相關產品:U-2932細胞、UK Pan-1細胞、P30/0HK細胞 GNM細胞系相關產品:SW579細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、SK.MEL.5細胞 MC3T3-E1 Subclone 24細胞系相關產品:H1666_DA細胞、526mel細胞、Lung cancer-1/squamous細胞 細胞生長特性:貼壁 ETCC007 Cell:人乳腺導管癌細胞系 細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。目前,細胞凍存最常用的技術是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質濃度增高,pH值改變,部分蛋白質由于上述原因而變性,引起細胞內部空間結構紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內結構成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內容物丟失。如果細胞內冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術的關鍵是盡可能地減少細胞內水分,減少細胞內冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內的水分滲出細胞外,減少胞內形成冰結晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 U373-MG細胞系相關產品:Human Melanoma Cell Bowes細胞、HCC1954細胞、Me-Wo細胞 OCI-LY-19細胞系相關產品:CCD-18Co細胞、A-427細胞、NCIH2452細胞 SK-NM-C細胞系相關產品:HUVSMC細胞、WM 2664細胞、SO-Rb 50細胞 HOS-143B細胞系相關產品:DSL6A/C1細胞、SK_N_FI細胞、RCCJF細胞 NCTC1469細胞系相關產品:SkChA1細胞、RL952細胞、Madison 109細胞 NTERA-2cl.D1細胞系相關產品:DHBE細胞、MDA PCa 2b細胞、KCL22S細胞 G-Olig2細胞系相關產品:C3H10T1-2細胞、SNUC1細胞、Calu 6細胞 ETCC007 Cell:人乳腺導管癌細胞系 CAKI 1細胞系相關產品:OCI Ly10細胞、MILE SVEN1細胞、RC-4B/C細胞 HB 611細胞系相關產品:RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞 MDA-MB-231 #4175細胞系相關產品:REC 1細胞、EBNA293細胞、ROS17/28細胞 HeLa-229細胞系相關產品:HEK 293T/17細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、SP2/0 Ag-14細胞 ZR751細胞系相關產品:PK (15)細胞、DI TNC1細胞、CHP-212細胞 HIEC-6細胞系相關產品:GM04679細胞、SW1573細胞、RPMI2650細胞 AR4-IP細胞系相關產品:S3 HeLa細胞、Scott and White No. 13細胞、Rat Fetal Lung-6細胞 UACC-812細胞系相關產品:HT144-mel細胞、CL 1-5細胞、H69C細胞 TE354T細胞系相關產品:A2008細胞、RPMI6666細胞、PANC 813細胞 TE354T細胞系相關產品:A2008細胞、RPMI6666細胞、PANC 813細胞 CCD-33Co細胞系相關產品:HMC細胞、SKNEP-1細胞、SBC3細胞 Human Embryo Lung-1細胞系相關產品:H-1437細胞、SKNBE(1)細胞、TKB-1細胞 OV-90細胞系相關產品:P3JHR-1細胞、RK-13細胞、OK-WT細胞 GP-293細胞系相關產品:Mo7e細胞、NCI-522細胞、LCMS細胞 YH細胞系相關產品:NL-20細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、NCIH596細胞 EFM192細胞系相關產品:SUDHL8細胞、Hs 578.Bst細胞、G-292, clone A141B1細胞 IOSE80UBC細胞系相關產品:HBL1細胞、SW 962細胞、NCIH2141細胞 EM-3細胞系相關產品:WERI-Rb-1細胞、SUP T1細胞、CNE-2細胞 6-T CEM細胞系相關產品:1.1B4細胞、TR146細胞、Walker256細胞 CCD841CoTr細胞系相關產品:A-72細胞、MFM223細胞、U-343細胞 SKCO-1細胞系相關產品:FAT細胞、EU-3細胞、293GP細胞 SV-HUC-1細胞系相關產品:Neuro 2a細胞、NCI-UMC-11細胞、NCI-SNU-475細胞 16HBEo-細胞系相關產品:NCIH3255細胞、MH7A細胞、aNK細胞 RS411細胞系相關產品:NT2-D1細胞、LAN-5細胞、HEK293-FT細胞 PC14細胞系相關產品:LMTK-細胞、Sup T-1細胞、HOPC細胞 3 LL細胞系相關產品:UM-UC14細胞、NCI-H1954細胞、GM03671細胞 SKNBE2細胞系相關產品:PGBE1細胞、C26細胞、DHL-2細胞 HCC2157細胞系相關產品:IMR-32細胞、Panc10.05細胞、OV433細胞 SKES1細胞系相關產品:Madison 109細胞、Hs819.T細胞、HONE1細胞 C41細胞系相關產品:HEK293-A細胞、C2A細胞、EMT6細胞 H2122細胞系相關產品:HTR-8/SV-neo細胞、H2023細胞、RMa-bm細胞 KYSE0410細胞系相關產品:H929細胞、GTL-16細胞、SKG-IIIa細胞 SKMES1細胞系相關產品:MG63細胞、NU-GC-4細胞、SW-982細胞 HEK293-FT細胞系相關產品:SVEC 4-10細胞、LM2-4175細胞、PL12細胞 SF126細胞系相關產品:KMH-2細胞、MCA 205細胞、MKN 7細胞 PLC PRF 5細胞系相關產品:RLE-6TN細胞、U-2932細胞、DMS-53細胞 Transformed Human Liver Epithelial-2細胞系相關產品:OKT3細胞、MOLM-13細胞、RAW264細胞 BC3 H1細胞系相關產品:Hs-27細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、LAC細胞 H9c2細胞系相關產品:DU_145細胞、HOS(TE85)細胞、FOX-NY細胞 Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞系相關產品:OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞 Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞系相關產品:OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞 NCI-H250細胞系相關產品:H-295細胞、H1341細胞、NCI-H226細胞 NCIH322細胞系相關產品:SW-1116細胞、H-865細胞、Henrietta Lacks cells細胞 ETCC007 Cell:人乳腺導管癌細胞系 LM8細胞系相關產品:ECV 304細胞、PK-13細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞 P3-NS1/1Ag 4.1細胞系相關產品:SIRC細胞、VERO C 1008細胞、H-2122細胞 CCD 841 CoTr細胞系相關產品:COLO-320HSR細胞、CHP212細胞、C3H-10T1/2細胞 HCT 116細胞系相關產品:H1694細胞、MOLT-16細胞、Metastatic Variant-522細胞 MT4細胞系相關產品:B6Tert-1細胞、XWLC-05細胞、MRC-5細胞 E0771細胞系相關產品:Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞、BC-3-H-I細胞、kms 11細胞 LC-1Sq細胞系相關產品:NCIH2172細胞、Hs 281.T細胞、Ramos G6.C10細胞 Hs 888.T細胞系相關產品:SPDC-CCL141細胞、LC-MS細胞、TCC-PAN2細胞 Hs 940.T細胞系相關產品:CoC1細胞、TE10細胞、MEF (CF-1)細胞 MESSA Dx5細胞系相關產品:PASMCS細胞、CCD19-Lu細胞、U251細胞 C8166-CD4細胞系相關產品:KRCY細胞、CAL 27細胞、SMMC 7721細胞 NRK clone 49F細胞系相關產品:H322T細胞、NCIH1417細胞、H2347細胞 "
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