"AsPC-1 Cell:人胰腺癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:該細胞來源于人胰腺癌裸鼠異種移植產(chǎn)生的癌性腹水,可以表達CEA,人胰腺相關(guān)抗原、人胰腺特異性抗原和黏蛋白。 MGC803細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780-CP細胞、SK-GT-4細胞、CEM細胞 RF/6A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-29/CX-1細胞、RGM1細胞、LU65細胞 KMST6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MH7A細胞、SUM102PT細胞、NB19-RIKEN細胞 BT 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-460細胞、NE-4C細胞、NCI-H2122細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 AsPC-1 Cell:人胰腺癌細胞系 細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié):懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度,重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉(zhuǎn)速,將造成細胞死亡;細胞之接種密度為何?依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因;細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細胞欲冷凍保存時,細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度?冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細胞污染?細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:3-1:6傳代;每周換液2-3次。 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 GLRK 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IB-RS-2細胞、RCC_7860細胞、67NR細胞 OLN 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co320細胞、NCI-H2452細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞 SNU520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2170細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、MPASMC細胞 MEL-526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tj-905細胞、HEK 293-H細胞、WILL2細胞 COR L279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN-1細胞、BLO 11細胞、MDA-157細胞 細胞生長特性:貼壁生長 AsPC-1 Cell:人胰腺癌細胞系 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! 細胞形態(tài)特性:上皮樣 MXI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Earles's cells細胞、HET-1A細胞、HepG2-luc細胞 HOS-143B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DSL6A/C1細胞、SK_N_FI細胞、RCCJF細胞 MLA 144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATDC-5細胞、CAL 51細胞、NCI-H1650細胞 CEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FCCH1024細胞、U266S細胞、H-2342細胞 U87-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1385細胞、C3H10T1-2細胞、C33-A細胞 HNE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RINm5F細胞、TE-14細胞、AX-Mel細胞 EB-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rainbow Trout Embryo細胞、U251n細胞、CHO-S細胞 AsPC-1 Cell:人胰腺癌細胞系 WSUDLCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HPF-1細胞、TE 32細胞、LAN5細胞 CHOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 7細胞、HBE 135-E6E7細胞、TYKnu細胞 HMC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ML-2細胞、NCI-H711細胞、H35 Reuber細胞 HNSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCASMC細胞、MDAMB435S細胞、HEL細胞 Ramos-RA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-740細胞、H2052_MM細胞、870細胞 JG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC9細胞、High5細胞、MFE-296細胞 HCPEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PT-67細胞、NCIH2172細胞、C2-C12細胞 D283細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL3細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、Det 562細胞 H-1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI.8226細胞、CCC-HSF-1細胞、HTR-8細胞 H-1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI.8226細胞、CCC-HSF-1細胞、HTR-8細胞 NCI-UMC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-115細胞、H1623細胞、NK-92 MI細胞 U-343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-601細胞、SW480E細胞、DB細胞 CCD 19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 671細胞、HCC1569細胞、H2198細胞 DHBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW900細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞、Hep 3B2_1-7細胞 NCI H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKL細胞、HeLa-S3細胞、Colon 26細胞 WRL 68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAT2細胞、LIXC002細胞、U 138 MG細胞 B35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-3細胞、NCI-H1688細胞、MeT-5A細胞 DMS-153細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2052_MM細胞、OV 2008細胞、BJAB細胞 138 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-9724細胞、A-204細胞、C2BBe1細胞 U87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F56 [Human neoplasm]細胞、Chinese Hamster Lung細胞、NCI-H929細胞 MDCK supertube細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MF2059細胞、NCIH1693細胞、NBL-4細胞 SK-ChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sc-1細胞、BetaTC6細胞、SCaBER細胞 MM134細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H526細胞、SKOV-433細胞、KFB細胞 DU-4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1359細胞、CCD 841 CoTr細胞、HSKMC細胞 OK-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BBE細胞、AML-193細胞、PLA-801C細胞 TU 686細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NF639細胞、KOPN8細胞、N-Tera-2細胞 KYSE 410細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR7530細胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、786.O細胞 OCI/AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BrCL18細胞、CORL26細胞、MDA415細胞 Roswell Park Memorial Institute 7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-Olig2細胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞、Wistar Institute-38細胞 CFSC-8B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6 myoblast細胞、HCAEC細胞、M20 [Human melanoma]細胞 Lewis Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI231細胞、UMNSAH/DF#1細胞、LIXC-002細胞 NRK 52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR8細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞、GC-1細胞 HT 1080.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Hep1細胞、HANK細胞、HFL細胞 U-343-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS-27細胞、CMT 93細胞、H1568細胞 Cor L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-3細胞、8305C細胞、MeSoTheliOma-211H細胞 HCC1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1588細胞、REC細胞、SNU-16細胞 A2780 CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cor L88細胞、B958細胞、HELA-GFP細胞 CCD-33Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC細胞、SKNEP-1細胞、SBC3細胞 WiDr-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、SUM-190PT細胞、WIL2 Secreting細胞 MSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2227細胞、U87-MG細胞、Panc 10.05細胞 HOP92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF.7細胞、OCI-Ly03細胞、KYSE-270細胞 HK-2 [Human kidney]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Arizona Cell Culture-812細胞、KBM-7/Hap8細胞、H-522細胞 THP-1(ATCC)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J.E6-1細胞、BLO-11細胞、Vero 76細胞 AsPC-1 Cell:人胰腺癌細胞系 FLC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00346B細胞、OVCAR8細胞、Nb2細胞 Hs-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE2細胞、NTERA2-D1細胞、SNU5細胞 BJA-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Me Wo細胞、Granta 519細胞、TR146細胞 MIA-Pa-Ca-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:451-LU細胞、JEG-3細胞、Panc 08.13細胞 CG-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 4.03細胞、K562/ADP細胞、H647ell細胞 Ej138細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞 G 292 Clone A 141B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HEECs細胞、COV504細胞、X63-AG 8.653細胞 624細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCMEC細胞、D10.G4.1細胞、CMT 64細胞 KMBC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-28細胞、TE 85 ClF-5細胞、Neukoplast細胞 NG 108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03569B細胞、MDA-MB-436細胞、A431細胞 COLO201細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duke University 4475細胞、BC-PAP細胞、Karpas422細胞 SK-N-BE-2c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1915細胞、6-10B細胞、SUM 52細胞 "
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