"HMEC-1 Cell:人微血管內皮細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 MLO-Y4細胞系相關產品:HELF細胞、Hs 832(C).T細胞、Jiyoye (P-2003)細胞 H-220細胞系相關產品:Cor L51細胞、SV-HUC-1細胞、PK 15細胞 EA.Hy926細胞系相關產品:NCI-H1770細胞、SCCVII細胞、P36細胞 Madison 109細胞系相關產品:NCI-BL2141細胞、SK RC 52細胞、H510細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 HMEC-1 Cell:人微血管內皮細胞系 細胞消化過程總結:其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經消失了,細胞之間的附著也已經消失了,細胞已經獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2傳代 造成實驗室細胞污染常見情況總結:細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下。【違規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 RPMI #1846細胞系相關產品:KE37細胞、HSC4細胞、HS578T細胞 MDA-MB-157細胞系相關產品:A 172細胞、KGN細胞、LOUNH91細胞 P-19細胞系相關產品:HPAF/CD18細胞、184A1細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞 NK-92細胞系相關產品:WPMY1細胞、CAL-62細胞、MDA-MB-361細胞 Tb 1 Lu細胞系相關產品:MCF.10A細胞、BEL 7402細胞、NHRF細胞 細胞生長特性:貼壁生長 HMEC-1 Cell:人微血管內皮細胞系 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質,對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 SW-1783細胞系相關產品:FRhK4細胞、CHOK1細胞、U14細胞 2BS細胞系相關產品:alphaTC1 Clone 6細胞、NCI-H2030細胞、H69細胞 RT 112細胞系相關產品:PLC/PRF5細胞、H-2291細胞、KYSE0520細胞 SW-480細胞系相關產品:NCI-H78細胞、MSB-1細胞、BALL-1細胞 BE2M17細胞系相關產品:LLC-PK-1細胞、KU 19-19細胞、Ketr-3細胞 AtT-20細胞系相關產品:H-1436細胞、HConEpic細胞、A-253細胞 RH30SJ細胞系相關產品:End1/E6E7細胞、TCC-SUP細胞、HT22細胞 HMEC-1 Cell:人微血管內皮細胞系 McArdle RH-7777細胞系相關產品:WB F344細胞、786.O細胞、OVCAR-420細胞 H-510細胞系相關產品:LC-2 ad細胞、FHL124細胞、SK-BR3細胞 UMR-106細胞系相關產品:NK 10a細胞、T8細胞、HOS-TE85細胞 MDAMB175VII細胞系相關產品:HCV-29細胞、CT-26細胞、WM451細胞 BC-024細胞系相關產品:MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞 B16/F0細胞系相關產品:P3/ag細胞、SW-839細胞、ATN1細胞 95D細胞系相關產品:OCUM-1細胞、C4-2細胞、NTHY-ORI3.1細胞 MADB 106細胞系相關產品:HCT FET細胞、KMS18細胞、KMS18細胞 Mel-MeWo細胞系相關產品:UK Pan-1細胞、K562細胞、P3HR1-BL細胞 Mel-MeWo細胞系相關產品:UK Pan-1細胞、K562細胞、P3HR1-BL細胞 NOZC-1細胞系相關產品:F442A細胞、MFE-280細胞、Hs 636.T細胞 PK15細胞系相關產品:WM 2664細胞、HEC151細胞、Mel RM細胞 QSG-7701細胞系相關產品:SW 626細胞、Y3-Ag1.2.3細胞、RPTC細胞 A-375.S2細胞系相關產品:LN-229細胞、H35細胞、HCT 15細胞 OCI-Ly18細胞系相關產品:HCC9724細胞、C-643細胞、LoVo細胞 ZR75-1細胞系相關產品:MSB-1細胞、SF126細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞 U-2932細胞系相關產品:Hs 839.T細胞、P3HR1細胞、NRK52E細胞 MyLa 2059細胞系相關產品:B16 melanoma細胞、KYSE 520細胞、mRTEC細胞 GOS-3細胞系相關產品:SW-837細胞、8305C_1細胞、OV-90細胞 H1869細胞系相關產品:PA12細胞、SW900細胞、H283細胞 COLO 829細胞系相關產品:F81細胞、Swiss3T3細胞、SK-UT-1細胞 RASMCs細胞系相關產品:U2932細胞、JIMT1細胞、SKNBE2C細胞 L M (TK-)細胞系相關產品:UT-7細胞、FRTL-5細胞、58F細胞 H1105細胞系相關產品:CHP 126細胞、SW579細胞、D-324MED細胞 SK.MEL.5細胞系相關產品:Co 115細胞、HCT.116細胞、PLA801C細胞 Ls-174-T細胞系相關產品:H87細胞、MC-CAR細胞、RMS13細胞 Hela-Ap-1細胞系相關產品:LC-2/ad細胞、HSKMC細胞、MKN1細胞 JJN3細胞系相關產品:DrG細胞、SK-RC 39細胞、MiaPaca.2細胞 NCIH2073細胞系相關產品:BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞 NCI-H1355細胞系相關產品:NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞 MPC-5細胞系相關產品:NCI-SNU-886細胞、NCIH1703細胞、MOLM-14細胞 H1623細胞系相關產品:OCILY7細胞、HO-8910PM細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞 NCI-HUT-596細胞系相關產品:675T細胞、A 253細胞、CWR22Rv1細胞 HCC1806細胞系相關產品:OVCA420細胞、GM03569細胞、COV-434細胞 HCC1419細胞系相關產品:Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、LC-1Sq細胞、SK-RC 52細胞 HCT 8細胞系相關產品:KNS42細胞、P-388D1細胞、WEHI 231細胞 RH30SJ細胞系相關產品:End1/E6E7細胞、TCC-SUP細胞、HT22細胞 H2405細胞系相關產品:BALL-1細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞、P3 NS1 Ag4細胞 H748細胞系相關產品:MJ細胞、H-2009細胞、CAL 27細胞 H711細胞系相關產品:IMCD-3細胞、SW 982細胞、MGHU3細胞 UPCI:SCC090細胞系相關產品:alpha-TC1.6細胞、HP615細胞、EFM-19細胞 H2087細胞系相關產品:MIN6細胞、HCC0827細胞、CCD-33Co細胞 RAW264細胞系相關產品:TYK-nu細胞、CD18細胞、HIEC6細胞 HMEC-1 Cell:人微血管內皮細胞系 T98G細胞系相關產品:RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞 CHL/IU細胞系相關產品:NCI-747細胞、DoTc2細胞、MOLP8細胞 MV-1-Lu細胞系相關產品:BIU-87/Adr細胞、NOZC-1細胞、T 98 G細胞 BIC-1細胞系相關產品:BALB/c 3T3 clone A31細胞、SW-756細胞、ONS76細胞 MT2細胞系相關產品:HS-294-T細胞、BIU87細胞、DMS273細胞 Tu-212細胞系相關產品:SNU-475細胞、NCI-H526細胞、V79-4細胞 LX-2細胞系相關產品:MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞 HPAF-II細胞系相關產品:Reh細胞、DMS114細胞、A375-SM細胞 WERI-Rb1細胞系相關產品:GCT細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、CAOV3細胞 Mouse podocyte細胞系相關產品:PANC 813細胞、MEC-1細胞、L5178Y-R細胞 HCC-2108細胞系相關產品:Human Embryonic Skin細胞、N-9細胞、KYSE-520細胞 HCC1419細胞系相關產品:Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、SUM-149PT細胞、NCI-A549細胞 "
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