"GES-1 Cell:人胃黏膜上皮細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 SCI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC11 Mammary Epithelium細胞、SK-NSH細胞、PIGI細胞 SW 1463細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC202細胞、H-345細胞、GT38細胞 PL-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT-3細胞、NCIH747細胞、NIE-115細胞 NCI-H1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H748細胞、L363細胞、Hs 870.T細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 GES-1 Cell:人胃黏膜上皮細胞系 如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2傳代 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 HCC-1187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High 5細胞、Wistar Institute-38細胞、OCI-Ly8細胞 Transformed Human Liver Epithelial-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKT3細胞、MOLM-13細胞、RAW264細胞 LS411細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2195細胞、NCI-H1668細胞、HCC1954細胞 B16 F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-704細胞、253JBV細胞、LNCaP subline C4-2細胞 OVMANA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-5細胞、LIXC-002細胞、PA317細胞 細胞生長特性:貼壁生長 GES-1 Cell:人胃黏膜上皮細胞系 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 MES-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSK-1細胞、CTLL(2)細胞、Calu3細胞 Panc 4.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-3細胞、RTE細胞、NCI-H2452細胞 VSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hce8693細胞、Calu3細胞、IGROV 1細胞 NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THC-8307細胞、LA-N-6細胞、HEK 293 EBNA細胞 MC9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD1112Sk細胞、KYSE-180細胞、0V-1063細胞 BJ1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、T241細胞、NCI-H510A細胞 NCIH508細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC893細胞、SUM-52PE細胞、Evsa T細胞 GES-1 Cell:人胃黏膜上皮細胞系 TMD8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH/DF-1細胞、H-1915細胞、SNU387細胞 NCI-H2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC-5細胞、OVCAR.4細胞、NTera2/D1細胞 P3HR1-BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pan02細胞、MCA-205細胞、SK-ES-1細胞 HO8910/PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac12F5細胞、U-118-MG細胞、MUS-M1細胞 NCI-H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE1-hTERT細胞、B16 subline B78細胞、22Rv-1細胞 RL-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266S細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞、MDA468細胞 MDBK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC10細胞、U-hth74細胞、HBZY1細胞 MES23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-1040細胞、L Wnt-3A細胞、SN12CPM6細胞 MV-4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159-PT細胞、FHs74 Int細胞、H-1755細胞 MV-4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159-PT細胞、FHs74 Int細胞、H-1755細胞 4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR433細胞、MDCK II細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞 Ramos (RA)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 clone A31細胞、H19-7細胞、Nb-2細胞 MADB 106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT FET細胞、KMS18細胞、KMS18細胞 MCF-12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-741細胞、FHL 124細胞、GRSL細胞 C26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS123細胞、TNC-1B12B4細胞、H9c2細胞 SJRH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEL細胞、SKOV3細胞、WEHI 164 TC細胞 CAMA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Microglia Clone 3細胞、PC3M-IE8細胞、WERI細胞 HS-766-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuCCT-1細胞、COLO 394細胞、ONS-76細胞 SNU407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL6細胞、SNU251細胞、OVCAR.4細胞 BT474細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-727細胞、McA-RH8994細胞、MS-751細胞 HP615細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 8.13細胞、HPASMC細胞、PIG1細胞 Human Microglia Clone 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2108細胞、SCL2細胞、32Dcl3細胞 BHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TEC細胞、I90細胞、H2085細胞 SKRC20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32 mel細胞、SV40-HCEC細胞、CCD-112CoN細胞 NPA-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC92A細胞、H-4細胞、SUPT-1細胞 H35 Reuber細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1 in Origin Simian-1細胞、RN細胞、MMAc-SF細胞 HCCC9810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 840.T細胞、MEL細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞 U-251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1116細胞、EC-GI-10細胞、P 3 HR 1細胞 WSU-HN13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8402細胞、H2073細胞、DAN-G細胞 3T3-Swiss細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 24細胞、LIPF155C細胞、DMS-79細胞 HFTF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa細胞、AX-Mel細胞、NCIH1048細胞 SCL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC clone 1469細胞、HTR-8細胞、RWPE1細胞 IOSE-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、LO2細胞、H1781細胞 95D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCUM-1細胞、C4-2細胞、NTHY-ORI3.1細胞 DHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 BL6細胞、HCC-366細胞、PL-12細胞 2V6.11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-Sf21AE細胞、NCIH1299細胞、WC00044細胞 HT29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 962細胞、OVCA-432細胞、HCT_116細胞 BC-020細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-8161細胞、Vero E6細胞、B-16細胞 SCLC-21H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPCA-1細胞、NCIH2107細胞、231-luc細胞 H-2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA433_Bast細胞、RKO-AS-45-1細胞、Panc 02細胞 KYSE-70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK/293細胞、NCI-H82細胞、Nthy-ori 3.1細胞 GM-637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL1339細胞、CHAGOK1細胞、AsPC-1細胞 GI-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-10細胞、SW-1088細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞 GES-1 Cell:人胃黏膜上皮細胞系 RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 266-4細胞、H-2195細胞、CCD-112 CoN細胞 HEK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0366細胞、SUM-102細胞、Namalva細胞 HL-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-813細胞、CX-1細胞、KNS62細胞 University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 375細胞、RLE-6TN細胞、NCM-460細胞 PAMC82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mousepodocyte細胞、RIN14B細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞 HCoEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P36細胞、C8D1A細胞、HONE-1細胞 T. T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Experimental Mammary Tumour-6細胞、FDC-P1細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞 TCam 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320-HSR細胞、OCI-Ly 7細胞、LNT-229細胞 SUM-159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs683細胞、OCI-LY-3細胞、LC2/Ad細胞 TCMK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-02細胞、LM1細胞、NCIH28細胞 MBT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9/GR細胞、M-14細胞、MHCC97H細胞 Hep-G2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha TC1-6細胞、SNU-16細胞、HUSMC細胞 "
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