"JEG-3 Cell:人絨毛膜癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:這是一株超三倍體人類細胞株 CD-18細胞系相關產品:B16 melanoma F10細胞、NCIH1573細胞、RAEC細胞 GB-1細胞系相關產品:DLD-1細胞、RPVSMC細胞、MOLT3細胞 SW13細胞系相關產品:NCIH1436細胞、WERI-Rb1細胞、hTERT-HME-1細胞 HCE細胞系相關產品:HEC-1-A細胞、SMA560細胞、LUDLU-1細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 JEG-3 Cell:人絨毛膜癌細胞系 細胞的凍存:目前,細胞凍存最常用的技術是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數)。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:消化3-5分鐘,1:2,3天內可長滿 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當地溫度,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 OVCAR.3細胞系相關產品:Vero C1008細胞、SKNEP1細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞 H2085細胞系相關產品:Epstein-Barr-1細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、H1618細胞 16-HBEo細胞系相關產品:Normal Rat Kidney-49F細胞、OSC-19細胞、NCIH1915細胞 COLO-205細胞系相關產品:NCI-H1105細胞、COV 434細胞、NMCG-1細胞 CCRF CEM細胞系相關產品:ARO81-1細胞、MKN 7細胞、2PK-3細胞 細胞生長特性:貼壁生長 JEG-3 Cell:人絨毛膜癌細胞系 細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題。總結2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 細胞形態(tài)特性:上皮樣 L-cells細胞系相關產品:UPCI-SCC-090細胞、HCT 116細胞、Hopkins-92細胞 B16/F10細胞系相關產品:Panc_05_04細胞、CAL 39細胞、HCC366細胞 NBL-1細胞系相關產品:LC-1 sq細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、KU19-19細胞 SKNEP-1細胞系相關產品:HuLEC-5a細胞、KM-12細胞、786-O細胞 NEC-8細胞系相關產品:TE-10細胞、Panc2_03細胞、KTA7細胞 GM02132C細胞系相關產品:HR-8348細胞、GLC82細胞、MC57G細胞 PL5細胞系相關產品:PSN-1細胞、JM-Jurkat細胞、SK-N-FI細胞 JEG-3 Cell:人絨毛膜癌細胞系 COC1/CDDP細胞系相關產品:UCLA RO-81A-1細胞、IFRS1細胞、DHL-6細胞 MDCK.2細胞系相關產品:Michigan Cancer Foundation-10A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、Hep G2-Luc細胞 HOP-92細胞系相關產品:L-WRN細胞、SCC25細胞、LA-N-6細胞 LNT-229細胞系相關產品:H1435細胞、MAVER-1細胞、C-33A細胞 IALM細胞系相關產品:DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞 IPEC1細胞系相關產品:SKNBE2C細胞、hFOB細胞、Mel526細胞 OEC33細胞系相關產品:ZR-75-1細胞、HPF細胞、Wien133細胞 NMCG-1細胞系相關產品:GM00215細胞、TE-32細胞、CAL 62細胞 SUM 159細胞系相關產品:C8-D1A細胞、IALM細胞、NCI-H2066細胞 SUM 159細胞系相關產品:C8-D1A細胞、IALM細胞、NCI-H2066細胞 LS513細胞系相關產品:OCI Ly1細胞、A-10細胞、NCI-H102細胞 FDC-P1細胞系相關產品:CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞 SKNMC細胞系相關產品:KU812-F細胞、BC-028細胞、CAL 39細胞 T-ALL-1細胞系相關產品:NCI-H716細胞、NCIH2342細胞、ReNcell CX細胞 MES-SA細胞系相關產品:MCF-12A細胞、SUNE 1細胞、6-10B細胞 RT112細胞系相關產品:RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞 OVCA432細胞系相關產品:KU 19-19細胞、REC-1細胞、H-838細胞 MBdSMC細胞系相關產品:NCIH810細胞、MC3T3-E細胞、HCT.116細胞 H-II-E-C3細胞系相關產品:beta-TC6細胞、MDCK-2細胞、NE1細胞 V79-4細胞系相關產品:LAN5細胞、Tissue Culture-1細胞、HPAFII細胞 MH7A細胞系相關產品:HOK細胞、BHP-10細胞、H1793細胞 H-929細胞系相關產品:C3H/10T1/2 CL8細胞、ZR751細胞、NCI-H661細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞系相關產品:GM17219細胞、UACC-812細胞、D-324 Med細胞 Centre Antoine Lacassagne-51細胞系相關產品:LWnt-3A細胞、HT 1197.T細胞、SRA01/04細胞 SW626細胞系相關產品:XWLC-05細胞、VMRC-LCD細胞、HCV29細胞 H522細胞系相關產品:HUASMC細胞、JHH-2細胞、Daudi細胞 PE/CA-PJ34細胞系相關產品:HIT-T15細胞、NS20-Y細胞、Hce8693細胞 SCaBER細胞系相關產品:QGY7703細胞、RGC6細胞、L 428細胞 BJAB-1細胞系相關產品:SF767細胞、SkMel31細胞、Hs739T細胞 HEK 293 c18細胞系相關產品:HBEpiC細胞、OVCAR 420細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞 beta TC6細胞系相關產品:RPMI1788細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞、STTG1細胞 NHRF細胞系相關產品:D-341 Med細胞、MB 157細胞、IOSE 29細胞 P3J-HR-1細胞系相關產品:HFF1細胞、HIEC6細胞、MCF7-GFP細胞 Eca109細胞系相關產品:H283細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞、H1341細胞 FRO81-2細胞系相關產品:RIN-m細胞、SW1088細胞、NCI-H196細胞 HCFB(HCF)細胞系相關產品:WEHI-231細胞、MG63細胞、OVCAR 420細胞 SK-Mel 1細胞系相關產品:Hs 683細胞、KYSE 140細胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞 ZR-75-1細胞系相關產品:H-522細胞、G-Olig2細胞、DMS-114細胞 CCD33Co細胞系相關產品:T-47D細胞、U118-MG細胞、Leukemia L1210細胞 SF 763細胞系相關產品:GM2131細胞、RD細胞、HT-29細胞 Panc3_27細胞系相關產品:PG13細胞、Hs 746.T細胞、SVG p12細胞 HNE3細胞系相關產品:GM04678細胞、KYSE-410細胞、LM-TK-細胞 GM03573細胞系相關產品:L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、GM03320細胞、H-2141細胞 JEG-3 Cell:人絨毛膜癌細胞系 U-87-MG細胞系相關產品:MFHL-2細胞、A375細胞、T98 G細胞 LPC-H12細胞系相關產品:SK-RC 42細胞、MCF7/WT細胞、Kuramochi細胞 SKCO1細胞系相關產品:PC3M-1E8細胞、NG108-15細胞、RBVEC細胞 OV1-P細胞系相關產品:H740細胞、SK-ChA-1細胞、UPCI:SCC154細胞 HCC-366細胞系相關產品:NCIH2591細胞、A 549細胞、LC-1細胞 F98細胞系相關產品:MC-CAR細胞、YES 2細胞、YAC-1細胞 WB-F344細胞系相關產品:NCI-H211細胞、Kit225/K6細胞、WM239A細胞 COLO 680N細胞系相關產品:SVG(P12)細胞、J45.01細胞、5637細胞 Hs 604.T細胞系相關產品:H2073細胞、L(TK-)細胞、U266-B1細胞 Calu 3細胞系相關產品:MV-1-Lu細胞、SW780細胞、RT4-D6-P2T細胞 SW403細胞系相關產品:V-79細胞、no-11細胞、6T-CEM細胞 H211細胞系相關產品:UCLA-SO-M21細胞、OCI-Ly1細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞 "
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