"MDA-MB-415 Cell:人乳腺腺癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:這株細胞表達WNT7B癌基因。8168088].帶瘤患者來自巴拉圭,雖然填報的是白人,但細胞表型存在G6PDA型,顯示其屬于混血。細胞株形成平展延伸的上皮細胞樣,在電鏡下呈現(xiàn)結節(jié),伴隨著延伸的微管和微板。不容易用胰酶消化。 Reuber H-35細胞系相關產品:STO細胞、Hs940-T細胞、PL 5細胞 AsPC-1細胞系相關產品:MCF12A細胞、HCT-8/V細胞、LSECs細胞 KNS42細胞系相關產品:MV4II細胞、HCC0095細胞、NCI-H526細胞 NCI-H1703細胞系相關產品:LC1sq細胞、NH-6細胞、OVCAR3細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 MDA-MB-415 Cell:人乳腺腺癌細胞系 細胞的凍存:目前,細胞凍存最常用的技術是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數)。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:消化5-10分鐘。1:2。4-5天長滿。 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當地溫度,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 SKNBE2細胞系相關產品:PGBE1細胞、C26細胞、DHL-2細胞 OVCAR-5細胞系相關產品:R 1610細胞、Lieming Xu-2細胞、VSC4.1細胞 HPMC細胞系相關產品:FF-WT-BJ細胞、HEL-92_1_7細胞、RFL6細胞 KMY1022細胞系相關產品:OCILY-19細胞、CT26.CL25細胞、HCC0095細胞 343 MG細胞系相關產品:SUD6細胞、alpha-TC1.6細胞、H-747細胞 細胞生長特性:貼壁生長 MDA-MB-415 Cell:人乳腺腺癌細胞系 細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 細胞形態(tài)特性:上皮細胞 SW 780細胞系相關產品:Hs-695-T細胞、H82sclc細胞、H-1734細胞 KMB-17細胞系相關產品:TE354T細胞、IOSE-80細胞、Med 283細胞 143TK-細胞系相關產品:BE(2)C細胞、SK Hep1細胞、WRL-68細胞 U251-MG細胞系相關產品:Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞 HEK293-EBNA1細胞系相關產品:16HBE細胞、M21細胞、IPECJ2細胞 Panc_02_03細胞系相關產品:OCI-LY-19細胞、HCC1954-BL細胞、KU1919細胞 H2023細胞系相關產品:SUPT-1細胞、Hmy.2 CIR細胞、H1651細胞 MDA-MB-415 Cell:人乳腺腺癌細胞系 BC-021細胞系相關產品:Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、BRL細胞、MDA-MB 453細胞 B104 [Rat neuroblastoma]細胞系相關產品:C57/B6-L細胞、HHL5細胞、C166細胞 H2405細胞系相關產品:BALL-1細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞、P3 NS1 Ag4細胞 KMM1細胞系相關產品:RMS1598細胞、SACCLM細胞、Hs-578T細胞 WM35細胞系相關產品:A-172細胞、293F細胞、H-2286細胞 HuH28細胞系相關產品:IHH4細胞、LS 513細胞、PTK-2細胞 A7r5細胞系相關產品:SKCol1細胞、HuH6細胞、NCI-H64細胞 SUDHL-5細胞系相關產品:MX-1細胞、NCI-H929細胞、SKml2細胞 HIMEC細胞系相關產品:NCI-157細胞、2V6.11細胞、SCL-2細胞 HIMEC細胞系相關產品:NCI-157細胞、2V6.11細胞、SCL-2細胞 LS174T細胞系相關產品:Rat Lung-65細胞、Ra #1細胞、P3/X63/Ag8細胞 HSC1細胞系相關產品:PC 61 5.3細胞、HLMVEC細胞、HT1376細胞 L cells細胞系相關產品:HMC3細胞、M619細胞、MKN 28細胞 HCC1954 BL細胞系相關產品:Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、HPC-Y5細胞、SW 900細胞 KU-812-F細胞系相關產品:SEM細胞、Mevo細胞、OCIAML2細胞 Ku812F細胞系相關產品:159PT細胞、GC-2細胞、CD-18細胞 RA-FLSs細胞系相關產品:HCC0044細胞、ZR75-30細胞、L6細胞 Human Liver-7702細胞系相關產品:JiyoyeP-2003細胞、ATDC5細胞、LICR-HN-6細胞 UMNSAH/DF-1細胞系相關產品:NCM-460細胞、NCIH1666細胞、H-1993細胞 Balb/c3T3細胞系相關產品:IPLB-SF 21AE細胞、DLM8細胞、BL6細胞 HCC-2935細胞系相關產品:746T細胞、MOLT4細胞、253JBV細胞 HN4細胞系相關產品:LA4細胞、MDA361細胞、H-1618細胞 SNU-354細胞系相關產品:SK RC 20細胞、Ketr-3細胞、NCTC-1469細胞 NCIH146細胞系相關產品:NCI-H64細胞、A375SM細胞、293-F細胞 HFF1細胞系相關產品:BNL 1ME A.7R.1細胞、MB39細胞、H295R-S1細胞 SNU-761細胞系相關產品:HM1900細胞、MES 13細胞、769P細胞 MILE SVEN1細胞系相關產品:3T3-A31細胞、HuH7細胞、IFRS1細胞 H460細胞系相關產品:Karpas 299細胞、87MG細胞、MA 104細胞 COLO 320HSR細胞系相關產品:A 72細胞、OV90細胞、HHL-5細胞 HCC0078細胞系相關產品:HT144細胞、OVCAR-4細胞、HRCEC細胞 NCIH740細胞系相關產品:95C細胞、NCI-H3255細胞、CCC-HHM-2細胞 Hs-746T細胞系相關產品:NOZAWA細胞、CCRF/CEM-C7細胞、EAhy926細胞 NCI-H847細胞系相關產品:Namalwa細胞、NCI-H-128細胞、IPLB-SF 21AE細胞 EM-3細胞系相關產品:WERI-Rb-1細胞、SUP T1細胞、CNE-2細胞 C-33-A細胞系相關產品:PVEC細胞、293c18細胞、NCI-H2107細胞 EBTr細胞系相關產品:RWPE2細胞、SNU869細胞、TSU-Pr1細胞 NCM356細胞系相關產品:MDCK II細胞、REC1細胞、AK細胞 SK-N-BE(1)細胞系相關產品:AZ-521細胞、NOR-10細胞、RAMOS2G64C10細胞 WM-239A細胞系相關產品:KYSE 410細胞、BRL-3A細胞、Mel-624細胞 BC3H-1細胞系相關產品:769P細胞、ETCC007細胞、GEO細胞 PC3M-IE8細胞系相關產品:NWA細胞、SW-1417細胞、X63.Ag8.653細胞 SW 1990細胞系相關產品:MLE12細胞、NB19細胞、R2C細胞 Ramos 1細胞系相關產品:HBE 135-E6/E7細胞、SK-N-BE-2c細胞、Sc-1細胞 MDA-MB-415 Cell:人乳腺腺癌細胞系 U-251細胞系相關產品:Hs 606細胞、293E細胞、CT26-clone 25細胞 Ku812F細胞系相關產品:159PT細胞、GC-2細胞、CD-18細胞 L6細胞系相關產品:SKCO 1細胞、DU4475細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞 CL-40細胞系相關產品:HNE-3細胞、HIBEC細胞、NG108-15細胞 C918細胞系相關產品:BNL CL.2細胞、HCT-15細胞、MDA435細胞 ROS-17/2.8細胞系相關產品:MDA2B細胞、COLO 824細胞、GM03570E細胞 LAD 2細胞系相關產品:GC-1細胞、SN4741細胞、Hs 746T細胞 SGC996細胞系相關產品:HEI-193細胞、HDF-a細胞、SNU-407細胞 IMCD3細胞系相關產品:P560細胞、MKN-1細胞、NCI-H2052細胞 PL9細胞系相關產品:Centre Antoine Lacassagne-78細胞、CAKI1細胞、MDA-MB-231-GFP細胞 Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關產品:HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞系相關產品:Hep-3B細胞、HCC-1954BL細胞、GM03320細胞 "
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