"PLA-802 Cell:人惡性橫紋肌肉瘤細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 RPMI 2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIMT細胞、HuLEC-5a細胞、H-735細胞 VP 267細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、ELD-1細胞、GM03190細胞 CHAGOK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caov-3細胞、NCIH1417細胞、H322T細胞 J774 A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-1040細胞、F-81細胞、MCA205細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 PLA-802 Cell:人惡性橫紋肌肉瘤細胞系 如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復(fù)蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2傳代 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 NCI-H1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK 1細胞、HuH-6細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞 Malme-3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H920細胞、HEK-EBNA細胞、Hs 343.T細胞 AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly7細胞、NCI-H1755細胞、C-28I2細胞 COLO 320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1.2細胞、R2C細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞 J45.01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-87細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、KYSE0030細胞 細胞生長特性:貼壁生長 PLA-802 Cell:人惡性橫紋肌肉瘤細胞系 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 B-cell with DC Morphology細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL2細胞、Caco-2/ATCC細胞、CA46細胞 A549/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2029細胞、SW 948細胞、COLO320 DM細胞 COS-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87MG細胞、HS-695T細胞、TE-9細胞 H-146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1359細胞、H64細胞、KALS1細胞 CDC/EU.HMEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2227細胞、SKN-SH細胞、NCI-H209細胞 J774.A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS114細胞、UMR 106細胞、RGC-6細胞 CAL62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2405細胞、NCI-H-82細胞、AgC11x3A細胞 PLA-802 Cell:人惡性橫紋肌肉瘤細胞系 NCIADR.RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUNE 1細胞、SU-DHL-5細胞、3LL細胞 SC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU145細胞、HT 115細胞、H87細胞 CEM/C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2106細胞、DH-82細胞、NK-92.05細胞 NCI-H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92細胞、H676細胞、VSMC細胞 HLE B-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞、Ly1細胞、CZ-1細胞 RIN-14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Uhth-74細胞、TE11細胞、TE10細胞 HT-1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMJ2C8細胞、Capan-2細胞、U266細胞 MH-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、PC12(高分化)細胞、KE39細胞 U251-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞 U251-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞 BNL-CL.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW-MEL-38細胞、HSF細胞、P31-FUJ細胞 LX-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞 MV4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed Human Liver Epithelial-2細胞、LICR-HN6細胞、PA1細胞 Ramos.G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞 S180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)細胞、HT clone H9細胞、NCI-H1975細胞 T-47-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-TN5B1-4細胞、Panc_08_13細胞、KMST6細胞 Hs888T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4 I細胞、LPC-H12細胞、GOS3細胞 Sp 2/0-Ag 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHP77細胞、MC3T3E1細胞、MX1細胞 MFE 280細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C57 Mouse Tumor 64細胞、SK ES 01細胞、HCC-1833細胞 A-375SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCa/16A3-F細胞、NCIH1355細胞、NR8383細胞 Me Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB453細胞、SUM 159PT細胞、SW 1417細胞 Mv1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-361細胞、H1975細胞、P3X63細胞 C-28/I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-32細胞、L-5178-Y-R細胞、BNCL-2細胞 B-cell with DC Morphology細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL2細胞、Caco-2/ATCC細胞、CA46細胞 JG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC9細胞、High5細胞、MFE-296細胞 NCIH520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-16細胞、A 172細胞、DC2.4細胞 T/GHA-VSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-7901細胞、NCIH441細胞、KOSC2細胞 PC 61 5.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE1-E6E7細胞、ST2細胞、HT 1197細胞 HG2855細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P116細胞、H-735細胞、MLE-12細胞 HCT-GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 126細胞、H460細胞、NALM6細胞 SK.MEL.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Strain KB細胞、NIH-3T3-L1細胞、95-D細胞 CV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVISE細胞、HSC細胞、H-2110細胞 Y3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN205細胞、MuM-2B細胞、hRMECs細胞 Hs870T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JG細胞、NCI-H748細胞、SK-MEL-1細胞 MCF-7/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 62細胞、CRFK細胞、SCC9細胞 PF382細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL-5 Cl 2細胞、RWPE1細胞、PC 61 5.3細胞 CPA47細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2細胞、U251-MG細胞、AR4IP細胞 SU-DHL-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-020細胞、Rat-2細胞、NCIH2170細胞 CCD19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kasumi-1細胞、McA-RH7777細胞、Kit-225細胞 Hela-mock細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-123細胞、HCV 29細胞、Hs 578.Bst細胞 RT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRFCEM細胞、HPDE6c7細胞、ASH-3細胞 SK-RC 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BLO11細胞、McCoy細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞 FL83B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H847細胞、SW 837細胞、WM266-4細胞 PLA-802 Cell:人惡性橫紋肌肉瘤細胞系 NCI-H1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30/0HK細胞、Normal fibroblast-10細胞、SKRC-42細胞 T-98G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320DM細胞、TC7細胞、MV-522細胞 EAC-E2G8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR3細胞、TM-3細胞、A9 (Hamprecht)細胞 NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293GP細胞、KY70細胞、CHO-ori細胞 A-101D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-3細胞、FRTL-5 Cl 2細胞、TE-15細胞 MDCK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812F細胞、HS578T細胞、Swiss/3T3細胞 NCI-H838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-RPE-1細胞、R1610細胞、Okayama University Medical School-23細胞 H1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2171細胞、PLB-985細胞、HCCLM6細胞 OPM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-YN細胞、SKRC 39細胞、RSC-364細胞 CAL39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-UT-1細胞、RBE細胞、BT-20細胞 PANC 1005細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEP2D細胞、Psi-2-DAP細胞、JVM-3細胞 Karpas422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 12細胞、IPLB-Sf21AE細胞、HCC0366細胞 "
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