"SW579 Cell:人甲狀腺鱗癌細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長:貼壁 細(xì)胞背景資料:在裸鼠中成瘤(產(chǎn)生三級惡性紡錘狀巨細(xì)胞瘤)。 MCF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MONO-MAC 6細(xì)胞、NCIH1436細(xì)胞、LS 513細(xì)胞 KCL22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC9811-P細(xì)胞、EC-GI細(xì)胞、Hs27F細(xì)胞 SuDHL 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DH 82細(xì)胞、Ly7細(xì)胞、H378細(xì)胞 PANC403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFM223細(xì)胞、Hs294T細(xì)胞、H-929細(xì)胞 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 SW579 Cell:人甲狀腺鱗癌細(xì)胞系 如何把細(xì)胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細(xì)胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細(xì)胞生長的空間密度問題。有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點細(xì)胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞,這樣細(xì)胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細(xì)胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細(xì)胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細(xì)胞,如果細(xì)胞形態(tài)不好,(或者細(xì)胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進(jìn)行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進(jìn)行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細(xì)胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細(xì)胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細(xì)胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細(xì)胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細(xì)胞,易生長的細(xì)胞加少一點培養(yǎng)基細(xì)胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細(xì)胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細(xì)胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細(xì)胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細(xì)胞如果想要更漂亮的細(xì)胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細(xì)胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細(xì)胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復(fù)蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 VMM5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CX-1細(xì)胞、Fox/NY細(xì)胞、7860細(xì)胞 MPC 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLE細(xì)胞、H1105細(xì)胞、SEG-1細(xì)胞 HCC38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2171細(xì)胞、Hs 766.T細(xì)胞、MGC803細(xì)胞 293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-IE8細(xì)胞、JIII細(xì)胞、C8161細(xì)胞 SL-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB39細(xì)胞、LED-WiDr細(xì)胞、E0771細(xì)胞 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 SW579 Cell:人甲狀腺鱗癌細(xì)胞系 正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項:細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時收獲細(xì)胞,計數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實,細(xì)胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣 NCI-H1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCCSUP細(xì)胞、H1703細(xì)胞、LYR細(xì)胞 hFOB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H.Ep. No. 2細(xì)胞、NCI-446細(xì)胞、COV 504細(xì)胞 NBL-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PT-K75細(xì)胞、GM-637細(xì)胞、WI 38細(xì)胞 T-98G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320DM細(xì)胞、TC7細(xì)胞、MV-522細(xì)胞 Tn-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97H細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞、16-HBE細(xì)胞 P3JHR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMC7細(xì)胞、ECC-10細(xì)胞、JB6Cl30細(xì)胞 NCI522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-kb2細(xì)胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、OCI-LY-19細(xì)胞 SW579 Cell:人甲狀腺鱗癌細(xì)胞系 hRMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAS4細(xì)胞、LSECs細(xì)胞、NCI-H1672細(xì)胞 UCH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC10RGB細(xì)胞、LA-N-5細(xì)胞、H1944細(xì)胞 BC-019細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 8細(xì)胞、VMRC-RCZ細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞 U-251 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-EOL-1細(xì)胞、AMO1細(xì)胞、PC615.3細(xì)胞 Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:451Lu細(xì)胞、BNL CL.2細(xì)胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞 253JB-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV2008細(xì)胞、HSC-6細(xì)胞、NCI-HUT-520細(xì)胞 JB 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1417細(xì)胞、16-HBE細(xì)胞、FC33細(xì)胞 HAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞、A-72細(xì)胞、DU4475細(xì)胞 Porcine Kidney-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801C細(xì)胞、LS-1034細(xì)胞、8305C_1細(xì)胞 Porcine Kidney-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801C細(xì)胞、LS-1034細(xì)胞、8305C_1細(xì)胞 MDAPCa2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE3細(xì)胞、JM1細(xì)胞、Lieming Xu-2細(xì)胞 Okayama University Medical School-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC-316細(xì)胞、H-2108細(xì)胞、ELD-1細(xì)胞 SW620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta 519細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、Vero-76細(xì)胞 SNU-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSC-34細(xì)胞、751-NA-15細(xì)胞、CPA 47細(xì)胞 MC-3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-4細(xì)胞、Mo 59J細(xì)胞、NCI-SNU-182細(xì)胞 OCI-AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0078細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞 HD11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05887細(xì)胞、RPMI-6666細(xì)胞、SKNDZ細(xì)胞 T-98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKml2細(xì)胞、MKN-28細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞 DHBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW900細(xì)胞、Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞、Hep 3B2_1-7細(xì)胞 BIU-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT 28細(xì)胞、COLO320DM細(xì)胞、MDA-MB-468-RED細(xì)胞 T-98G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320DM細(xì)胞、TC7細(xì)胞、MV-522細(xì)胞 OCUM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-157細(xì)胞、NCI-H1666細(xì)胞、HEK (AD293)細(xì)胞 MLFC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Carcinoma-38細(xì)胞、Karpas422細(xì)胞、MM1細(xì)胞 NCI H2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF-21細(xì)胞、Human podocyte細(xì)胞、TE671/RD細(xì)胞 PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HRI細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞、HOP 62細(xì)胞 HLEB3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH 7777細(xì)胞、2780CP細(xì)胞、NRK-52E細(xì)胞 T24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KCL22S細(xì)胞、GA-10細(xì)胞、UCLA-RO 81細(xì)胞 Huh 7.5.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM(TK-)細(xì)胞、SuDHL 2細(xì)胞、UM2細(xì)胞 Hs 746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:APRE-19細(xì)胞、KHYG1細(xì)胞、EnCa1細(xì)胞 YAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-2細(xì)胞、SUDHL5細(xì)胞、MCA-205細(xì)胞 AMO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO-AS-45-1細(xì)胞、MHCC 97-L細(xì)胞、OPM2細(xì)胞 CAL 33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO1-N1細(xì)胞、HOP 92細(xì)胞、KM932細(xì)胞 WERI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV3121細(xì)胞、AHH1細(xì)胞、HAC-84細(xì)胞 TE14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、OVCAR10細(xì)胞、7404細(xì)胞 Kuramochi細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-4細(xì)胞、OP9細(xì)胞、SNU-C1細(xì)胞 COLO 320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 72細(xì)胞、OV90細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞 A375mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLMS-1細(xì)胞、SGC-7901細(xì)胞、JHH2細(xì)胞 CAL85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-684細(xì)胞、GM03569D細(xì)胞、SGC-7901/DDP細(xì)胞 A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-763細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞、NPA87細(xì)胞 KYSE-50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs604T細(xì)胞、Calu 3細(xì)胞、SW 620細(xì)胞 KYSE-50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs604T細(xì)胞、Calu 3細(xì)胞、SW 620細(xì)胞 Eph4 1424細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDMEC細(xì)胞、RBMVEC細(xì)胞、LC-2-Ad細(xì)胞 HCC-1187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:High 5細(xì)胞、Wistar Institute-38細(xì)胞、OCI-Ly8細(xì)胞 SW579 Cell:人甲狀腺鱗癌細(xì)胞系 SNU-449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2347細(xì)胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、TPC1細(xì)胞 A-704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM C7細(xì)胞、HCV29細(xì)胞、NCI-H676B細(xì)胞 CCRF-SB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-BM 1細(xì)胞、NS1-1 Ag4.1細(xì)胞、C12細(xì)胞 SW-780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251 MG細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞、ID8細(xì)胞 P-36細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT_116細(xì)胞、Chinese Hamster Ovary細(xì)胞、VM-CUB-1細(xì)胞 P-36細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT_116細(xì)胞、Chinese Hamster Ovary細(xì)胞、VM-CUB-1細(xì)胞 B 95-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-4細(xì)胞、HR8348細(xì)胞、OCI-Ly 8細(xì)胞 L5178Y-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mIMCD3細(xì)胞、RT-BM細(xì)胞、HK2細(xì)胞 LN 382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-FI細(xì)胞、T98G細(xì)胞、HuNS1細(xì)胞 OKT 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-638細(xì)胞、ROS17/2.8細(xì)胞、SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞 LP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE520細(xì)胞、Colon26細(xì)胞、HIBEC細(xì)胞 CT26-clone 25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRCV細(xì)胞、K299細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞 "
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