"NCI-H460 Cell:人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞１９８２年由A.F.Gazdar建系，源自一位患有大細(xì)胞肺癌的男性的胸腔積液。該細(xì)胞角蛋白、波形蛋白陽性。
UMC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373-MG細(xì)胞、KRC/Y細(xì)胞、NTERA-2 cl.D1細(xì)胞
NCIH661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YTMLC-90細(xì)胞、H1618細(xì)胞、HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞
HUT125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLE 12細(xì)胞、P3X63Ag8653細(xì)胞、32D clone3細(xì)胞
HTR-8/SVneo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DV-90細(xì)胞、hCMEC/D3細(xì)胞、PC-12細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H460 Cell:人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞消化過程總結(jié)：其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞（絕大部分１min不到）。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動(dòng)了，多半呈沙壯移動(dòng)，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動(dòng)了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會(huì)聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性，無論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個(gè)細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個(gè)小時(shí)就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液（不要笑，這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開）。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個(gè)時(shí)候即使是成片的（比如Calu-３細(xì)胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個(gè)細(xì)胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時(shí)間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過５min，即可見細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
QGY 7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H23細(xì)胞、HOPC細(xì)胞、MS1細(xì)胞
H1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1581細(xì)胞、MUGCHOR1細(xì)胞、GM00215A細(xì)胞
Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jeko1細(xì)胞、hEM15A細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞
T47D:A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-45細(xì)胞、FLC7細(xì)胞、OACP4 C細(xì)胞
TK10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY70細(xì)胞、SK HEP-1細(xì)胞、NCI-H1651細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
NCI-H460 Cell:人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題。總結(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單，而且死板。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個(gè)問題，太長的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會(huì)死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見得太多了，別不當(dāng)會(huì)事。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
J 774A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc4.03細(xì)胞、SKCol1細(xì)胞、KBM-5細(xì)胞
NCI-H650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK 1細(xì)胞、COLO394細(xì)胞、Hs 600.T細(xì)胞
ECC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 Swiss Albino細(xì)胞、Neuro2a細(xì)胞、H2126細(xì)胞
CALU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU1細(xì)胞、NCI-HUT-69細(xì)胞、H1770細(xì)胞
H1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVSAHO細(xì)胞、LC-2-Ad細(xì)胞、SkChA1細(xì)胞
CEM clone 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKM-1細(xì)胞、BTI-TN5B1-4細(xì)胞、SW-620細(xì)胞
LA-N-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1781細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞
NCI-H460 Cell:人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
SKMEL-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOMO1細(xì)胞、EST81細(xì)胞、b.End3細(xì)胞
Lu-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LO2細(xì)胞、NCIH661細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞
Hs821T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATC241細(xì)胞、HCC2279細(xì)胞、MZ-CRC-1細(xì)胞
EBNA-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(1)細(xì)胞、QBC(939)細(xì)胞、GP5d細(xì)胞
CAOV3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEL細(xì)胞、ACHN細(xì)胞、B16-F1細(xì)胞
H920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HG2855細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞、MA-c細(xì)胞
HCCLM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAEC細(xì)胞、Panc_03_27細(xì)胞、EB-3細(xì)胞
CEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS 2B細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞、Calu-1細(xì)胞
GM02132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-620細(xì)胞、VMM5A細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞
GM02132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-620細(xì)胞、VMM5A細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞
PANC0327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 L1細(xì)胞、EU-2細(xì)胞、Granta-519細(xì)胞
AC16 [Human hybrid]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86.86細(xì)胞、L2細(xì)胞、L23/P細(xì)胞
Melan-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC15細(xì)胞、HNE1細(xì)胞、HPAF-2細(xì)胞
JIMT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HECV細(xì)胞、OCILY19細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞
T98G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4:11細(xì)胞、130T細(xì)胞、NSI/1-Ag4-1細(xì)胞
87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs888 Lu細(xì)胞、KU.812細(xì)胞、HSC-T6細(xì)胞
mIMCD-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR4細(xì)胞、BJA-B細(xì)胞、H1882細(xì)胞
WPMY1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TJ905細(xì)胞、SNU-C1細(xì)胞、KYSE 140細(xì)胞
SCC-1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mREC細(xì)胞、HCC-1500細(xì)胞、Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞
8305-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞、TGHAVSMC細(xì)胞、MCF12F細(xì)胞
HLE-B3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2PK-3細(xì)胞、HTSMC細(xì)胞、RPE-hTERT細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm-5F細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞、EBC1細(xì)胞
CHG-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1573細(xì)胞、A375.S2細(xì)胞、CL 1-5細(xì)胞
B16 F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-704細(xì)胞、253JBV細(xì)胞、LNCaP subline C4-2細(xì)胞
Panc 08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AZ 521細(xì)胞、HKF細(xì)胞、HSAS1細(xì)胞
Cor L51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NU-GC-3細(xì)胞、8305C細(xì)胞、MeSoTheliOma-211H細(xì)胞
3T3-Swiss albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC/TERT1細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞
NRK-49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL 28細(xì)胞、SK-N-BE細(xì)胞、MCCAR細(xì)胞
NCI-SNU-761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293細(xì)胞、KM12細(xì)胞、SNU-182細(xì)胞
MDCC-MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA10細(xì)胞、CHO Lec1細(xì)胞、KE-37細(xì)胞
MLE-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA361細(xì)胞、Sp 2817細(xì)胞、TMK1細(xì)胞
CMT-167細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCLC21H細(xì)胞、Hs-578-T細(xì)胞、SU8686細(xì)胞
MOLT 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R.K.13細(xì)胞、HANK1細(xì)胞、NS20-Y細(xì)胞
3LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-22細(xì)胞、PA-TU S細(xì)胞、SH-SY5Y Parental細(xì)胞
BRL-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu-6細(xì)胞、Hi5細(xì)胞、KM.12細(xì)胞
E0771細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、BC-3-H-I細(xì)胞、kms 11細(xì)胞
PL 45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RK 13細(xì)胞、HC-11細(xì)胞、Human Embryo Lung-1細(xì)胞
HOMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES細(xì)胞、KYSE-510細(xì)胞、BEL 7404細(xì)胞
SK-N-BE(2)-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS (TE85)細(xì)胞、HCC 2185細(xì)胞、PL9細(xì)胞
A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-763細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞、NPA87細(xì)胞
KPNRTBM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D clone3細(xì)胞、H 9細(xì)胞、CP-70細(xì)胞
JB6 Cl 30-7b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL-1細(xì)胞、Jurkat-77細(xì)胞、NCI-H2030細(xì)胞
ketr 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTSMC細(xì)胞、Granta-519細(xì)胞、OVCAR 4細(xì)胞
NCI-H460 Cell:人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
SPC-A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H548細(xì)胞、NCIH1793細(xì)胞、HMEC-1細(xì)胞
STC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu-686細(xì)胞、P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞、NIH/3T3細(xì)胞
HCT GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ISHI細(xì)胞、Rainbow Trout Embryo細(xì)胞、T_T_細(xì)胞
YH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NL-20細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞、NCIH596細(xì)胞
HuH-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-C7細(xì)胞、4-1st細(xì)胞、M-1 myeloid leukemia細(xì)胞
HS940細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_02_03細(xì)胞、Anip-973細(xì)胞、A-9細(xì)胞
GM04678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388細(xì)胞、L cells (TK-)細(xì)胞、GCT細(xì)胞
NCIH716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03573A細(xì)胞、3D4/21細(xì)胞、AMJ2C8細(xì)胞
HEC151細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Monomac-1細(xì)胞、LN-382細(xì)胞、253J細(xì)胞
SKNBE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞、IMCD3細(xì)胞、SCL I細(xì)胞
Z-138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H838細(xì)胞、LNCaP-FGC細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞
NCI-H510A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292 clone A141B1細(xì)胞、Eph4 1424細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞
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