"NCI-H460 Cell:人大細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：該細胞１９８２年由A.F.Gazdar建系，源自一位患有大細胞肺癌的男性的胸腔積液。該細胞角蛋白、波形蛋白陽性。
UMC11細胞系相關產品：U-373-MG細胞、KRC/Y細胞、NTERA-2 cl.D1細胞
NCIH661細胞系相關產品：YTMLC-90細胞、H1618細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞
HUT125細胞系相關產品：MLE 12細胞、P3X63Ag8653細胞、32D clone3細胞
HTR-8/SVneo細胞系相關產品：DV-90細胞、hCMEC/D3細胞、PC-12細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H460 Cell:人大細胞肺癌細胞系
細胞消化過程總結：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經消失了，細胞之間的附著也已經消失了，細胞已經獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
QGY 7701細胞系相關產品：NCI H23細胞、HOPC細胞、MS1細胞
H1836細胞系相關產品：H-1581細胞、MUGCHOR1細胞、GM00215A細胞
Human Melanoma Cell Bowes細胞系相關產品：Jeko1細胞、hEM15A細胞、Ca 9-22細胞
T47D:A細胞系相關產品：PL-45細胞、FLC7細胞、OACP4 C細胞
TK10細胞系相關產品：KY70細胞、SK HEP-1細胞、NCI-H1651細胞
細胞生長特性：貼壁生長
NCI-H460 Cell:人大細胞肺癌細胞系
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題。總結２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
J 774A.1細胞系相關產品：Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞
NCI-H650細胞系相關產品：SK 1細胞、COLO394細胞、Hs 600.T細胞
ECC-1細胞系相關產品：3T3 Swiss Albino細胞、Neuro2a細胞、H2126細胞
CALU1細胞系相關產品：LUDLU1細胞、NCI-HUT-69細胞、H1770細胞
H1651細胞系相關產品：OVSAHO細胞、LC-2-Ad細胞、SkChA1細胞
CEM clone 7細胞系相關產品：NKM-1細胞、BTI-TN5B1-4細胞、SW-620細胞
LA-N-6細胞系相關產品：NCIH1781細胞、HLEC-SRA 01/04細胞、KLN 205細胞
NCI-H460 Cell:人大細胞肺癌細胞系
SKMEL-31細胞系相關產品：NOMO1細胞、EST81細胞、b.End3細胞
Lu-65細胞系相關產品：LO2細胞、NCIH661細胞、MDAMB175細胞
Hs821T細胞系相關產品：ATC241細胞、HCC2279細胞、MZ-CRC-1細胞
EBNA-293細胞系相關產品：SKNBE(1)細胞、QBC(939)細胞、GP5d細胞
CAOV3細胞系相關產品：CEL細胞、ACHN細胞、B16-F1細胞
H920細胞系相關產品：HG2855細胞、SPCA-1細胞、MA-c細胞
HCCLM3細胞系相關產品：HAEC細胞、Panc_03_27細胞、EB-3細胞
CEK細胞系相關產品：BEAS 2B細胞、HS 445T細胞、Calu-1細胞
GM02132細胞系相關產品：SNU-620細胞、VMM5A細胞、A549ATCC細胞
GM02132細胞系相關產品：SNU-620細胞、VMM5A細胞、A549ATCC細胞
PANC0327細胞系相關產品：3T3 L1細胞、EU-2細胞、Granta-519細胞
AC16 [Human hybrid]細胞系相關產品：SU86.86細胞、L2細胞、L23/P細胞
Melan-a細胞系相關產品：HCC15細胞、HNE1細胞、HPAF-2細胞
JIMT細胞系相關產品：HECV細胞、OCILY19細胞、SUPB15細胞
T98G細胞系相關產品：RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞
87 MG細胞系相關產品：Hs888 Lu細胞、KU.812細胞、HSC-T6細胞
mIMCD-3細胞系相關產品：NIH:OVCAR4細胞、BJA-B細胞、H1882細胞
WPMY1細胞系相關產品：TJ905細胞、SNU-C1細胞、KYSE 140細胞
SCC-1395細胞系相關產品：mREC細胞、HCC-1500細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞
8305-C細胞系相關產品：CDC/EU.HMEC-1細胞、TGHAVSMC細胞、MCF12F細胞
HLE-B3細胞系相關產品：2PK-3細胞、HTSMC細胞、RPE-hTERT細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞系相關產品：RINm-5F細胞、3T3-Swiss albino細胞、EBC1細胞
CHG-5細胞系相關產品：SW1573細胞、A375.S2細胞、CL 1-5細胞
B16 F10細胞系相關產品：A-704細胞、253JBV細胞、LNCaP subline C4-2細胞
Panc 08.13細胞系相關產品：AZ 521細胞、HKF細胞、HSAS1細胞
Cor L51細胞系相關產品：NU-GC-3細胞、8305C細胞、MeSoTheliOma-211H細胞
3T3-Swiss albino細胞系相關產品：RPTEC/TERT1細胞、SVG(P12)細胞、ANA-1細胞
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MOLT 16細胞系相關產品：R.K.13細胞、HANK1細胞、NS20-Y細胞
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HOMEC細胞系相關產品：SK-MES細胞、KYSE-510細胞、BEL 7404細胞
SK-N-BE(2)-C細胞系相關產品：HOS (TE85)細胞、HCC 2185細胞、PL9細胞
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