"HCC827 Cell:人非小細胞肺癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:這株細胞建于1994年三月。這株肺腺癌在EGFR酪酸激酶區(qū)域有一個獲得性突變(E746-A750缺失)?;颊咴冢玻禋q到26歲時每個月抽1包煙。在診斷前12年不再抽煙。 SJRH 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H498細胞、GA-10(Clone 4)細胞、HVSMC細胞 3T3NIH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LX-2細胞、HCC1395細胞、OV1-P細胞 RPMI1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE50細胞、RSC-96細胞、HASMC細胞 NCI-SNU-886細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJSA-1細胞、MGC-803細胞、R 2 C細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 HCC827 Cell:人非小細胞肺癌細胞系 細胞培養(yǎng)相關(guān)問題總結(jié):冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37°C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管之爆裂;細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時,是否應馬上去除DMSO?除少數(shù)特別注明對DMSO敏感之細胞外,絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞),在解凍之后,應直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中,待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活;培養(yǎng)細胞時應使用5%或10%CO2?或根本沒有影響?一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細胞培養(yǎng)時應使用的CO2濃度。當培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7g時,細胞培養(yǎng)時應使用10%CO2;當培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時,則應使用5%CO2培養(yǎng)細胞。何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。培養(yǎng)基中是否須添加抗生素?除于特殊篩選系統(tǒng)中外,一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,培養(yǎng)基中不應添加任何抗生素。 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:消化5分鐘。1:2。4-5天長滿。 培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 NCI-H82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VSC4.1細胞、PT67細胞、H2108細胞 BRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293細胞、LAD 2細胞、Hs 445細胞 T-CAM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52PE細胞、Clone Y1細胞、H1993細胞 Vx-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT3細胞、GL-261細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞 RH35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs606T細胞、SK-N-BE(2)C細胞、HCE-T細胞 細胞生長特性:貼壁生長 HCC827 Cell:人非小細胞肺癌細胞系 細胞復蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 J82 COT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-1細胞、Namalva細胞、NCIH196細胞 SCC-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 28細胞、SK-MEL-1細胞、OB2細胞 Lu-99A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 Ag8細胞、HPAF II細胞、CHO K1細胞 HEK293-FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC 4-10細胞、LM2-4175細胞、PL12細胞 LuCL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD 18細胞、BC-025細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞 SCCVII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-373MG ATCC細胞、Vx-2細胞、SiHa細胞 Hs1.Tes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hCMEC/D3細胞、UT7細胞、RPTEC/TERT 1細胞 HCC827 Cell:人非小細胞肺癌細胞系 BEL7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GDM1細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞、CAL33細胞 SK-MEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV173細胞、ACC-M細胞、MDA-436細胞 293-EBNA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-1-Ag4-1細胞、RAW264.7細胞、Blotchy fibroblast-11細胞 TGW細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y-1細胞、ARO細胞、RCC-JF細胞 H-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPC-Y5細胞、H727細胞、VMRC-LCD細胞 NK-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPMY1細胞、CAL-62細胞、MDA-MB-361細胞 NCIH2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190細胞、RCF細胞、MN 60細胞 MMVECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE 280細胞、MOLT16細胞、JIMT1細胞 SHG44細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293S細胞、SGC-7901/DDP細胞、T24(ECV304)細胞 MDA-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JCA1細胞、CHP-100細胞、Caco-2/BBe 1細胞 NCI-H748細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARH 77細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞、COR-L26細胞 SCCVII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-373MG ATCC細胞、Vx-2細胞、SiHa細胞 HCC9204細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL 7402細胞、RKO_AS45細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞 NCTC-3960細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM-2細胞、HuT102細胞、TPC-1細胞 Wien 133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1404細胞、KLM-1細胞、MNNG細胞 OCI-LY-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEC-1細胞、SKml2細胞、HIT細胞 Tb 1-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL-HCC細胞、NCIH1688細胞、GM07404D細胞 NPC-TW-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB231細胞、OV433細胞、LWnt3A細胞 AMO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO-AS-45-1細胞、MHCC 97-L細胞、OPM2細胞 GTL 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FO [Mouse myeloma]細胞、UPCISCC154細胞、MDAMB436細胞 BC3H1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T9細胞、OC 316細胞、NS-20Y細胞 MCFs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK (AD293)細胞、PG-4 S+L-細胞、Ramos.G6.C10細胞 SCC90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO.205細胞、U-373MG ATCC細胞、W256細胞 Earles's cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC3 H1細胞、OCI-LY-8細胞、NCI-SNU-C2B細胞 LM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV 304細胞、PK-13細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞 TEV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4175細胞、Pan02細胞、Normal fibroblast-10細胞 MKN 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCAEC細胞、COR-L279細胞、JEG-3細胞 138 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-9724細胞、A-204細胞、C2BBe1細胞 CDC/EU.HMEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2227細胞、SKN-SH細胞、NCI-H209細胞 CNE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 3細胞、HuPT3細胞、ECV細胞 NCI-H1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L23細胞、Madison 109細胞、C643細胞 H-526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEC-1細胞、GM05384細胞、Mono-Mac-1細胞 SP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD1095Sk細胞、SW 13細胞、HPB-ALL細胞 SVG(P12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BPH1細胞、NCI-SNU-886細胞、COLO320-DM細胞 A-172MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEpiC細胞、SKG IIIa細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞 MKN74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AtT20細胞、NCI-H838細胞、VeroC1008細胞 NB1-RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10.G4.1細胞、SW 1116細胞、C-4 I細胞 LS 174T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 445T細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞、L 540細胞 HTR-8/SV neo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BDCM細胞、RMa-bm細胞、NCI-H747細胞 MS751細胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1細胞、EJ 138細胞、HEK-293 c18細胞 SUM-102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1651細胞、NRK 49F細胞、SKN-AS細胞 JROECL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOCF細胞、BHK細胞、C3H10T1/2CL8細胞 HEL92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLMEC細胞、MDA157細胞、GM05372細胞 HCC827 Cell:人非小細胞肺癌細胞系 Lewis-Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH187細胞、CCRF細胞、HCC-1954細胞 OP-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADB-106細胞、RERF-LCMS細胞、Y3-Ag1.2.3細胞 COLO 201細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin Darby Canine Kidney細胞、HuP-T3細胞、Bovine Turbinate細胞 RPMI-8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Epithelioma-2細胞、CCRF-CEM細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞 RPVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-149細胞、NCI-H1651細胞、NCIH1975細胞 SW1088細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63NS1細胞、SUDHL-2細胞、SW-1573細胞 MCF-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM6細胞、Human Embryo Kidney-2細胞、MCF7-CTRL細胞 DH 82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549/DDP細胞、MEG01細胞、IMR 32細胞 MRC 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2-C細胞、PE CA PJ34細胞、RC-4B細胞 Opossum Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK RC 52細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、NHA細胞 LICCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Emory University-3細胞、DB細胞、EJ1細胞 PCI-4B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GDM-1細胞、HT 1376.T細胞、NCI-H165細胞 "
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