小鼠促血小板生成素酶聯(lián)免疫試劑盒
英文名稱
Mouse Thrombopoietin ELISA KIT
中文名稱
小鼠促血小板生成素酶聯(lián)免疫試劑盒
別 名
c mpl ligand; C-mpl ligand; Megakaryocyte Colony Stimulating Factor; Megakaryocyte colony-stimulating factor; Megakaryocyte growth and development factor; Megakaryocyte stimulating factor; MGDF; MKCSF; ML; MPL ligand; MPLLG; Myeloproliferative Leukemia Virus Oncogene Ligand; THPO; Thrombopoietin; Thrombopoietin nirs variant 1; TPO
適用樣品基質(zhì)
cell culture supernates, serum, and plasma.
保存條件
Store at 4°C for 6 months, at -20°C for 12 months. Avoid multiple freeze-thaw cycles (Shipped with wet ice.)
產(chǎn)品介紹
Megakaryocytopoiesis is the cellular development process that leads to platelet production. The protein encoded by this gene is a humoral growth factor that is necessary for megakaryocyte proliferation and maturation, as well as for thrombopoiesis. This protein is the ligand for MLP/C_MPL, the product of myeloproliferative leukemia virus oncogene. Mutations in this gene are the cause of thrombocythemia 1. Alternate splicing results in multiple transcript variants of this gene.[provided by RefSeq, Jun 2012].
Important Note:
This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications
方法:雙抗夾心法
保質(zhì)期:12個月
測定長度: 1-4.5小時 1-3.5小時
優(yōu)點:
有競爭力的價格。 預(yù)稀釋的檢測試劑A和B
高靈敏度。 減少進行測試時的步驟數(shù)
高穩(wěn)定性。 所有試劑均可在4℃下保存
保質(zhì)期12個月。 與其他品牌相比反應(yīng)更快
保質(zhì)期12個月
包裝描述:
測定步驟總結(jié)
1.準(zhǔn)備所有試劑,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品;
2.向每個孔中添加100µL標(biāo)準(zhǔn)液或樣品。在37℃下孵育2小時;
3.吸出并加入100µL準(zhǔn)備好的檢測試劑A。在37℃孵育1小時;
4.吸凈并清洗3次;
5.加入100µL制備的檢測試劑B。在37℃孵育1小時;
6.吸氣并清洗5次;
7.添加90µL底物溶液。在37℃下孵育15-25分鐘;
8.添加50µL終止液。立即在450nm處讀取。
需自備的設(shè)備及試劑
450±10nm濾光片的酶標(biāo)儀(建議儀器使用前提前預(yù)熱)
單道或多道微量加液器及吸頭
稀釋樣品的EP管
蒸餾水或去離子水
吸水紙
盛放洗液的容器
試劑盒的儲存及有效期
未開封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存。請注意,收到試劑盒后請盡快將TMB 洗滌液,終止液保存于4℃,其他試劑保存于-20℃。
使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存,開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。
穩(wěn)定性
經(jīng)測定,試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。
注意:
試劑盒內(nèi)酶標(biāo)條可拆卸,按實驗需求可分多次使用;使用后的剩余試劑盒建議在首次實驗后 1個月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過期時間以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn),保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。
ELISA實驗常見問題分析
ELISA實驗因靈敏度高,特異性強在生物科研上得到了廣泛的認可,但對初學(xué)者而言,如不注意實驗操作過程中的各個環(huán)節(jié),可能會對最終的實驗結(jié)果產(chǎn)生比較大的影響,比如實驗出現(xiàn)白板,顯色弱靈敏度低,花板無梯度背景高等現(xiàn)象。下面對以上實驗現(xiàn)象進行一一解析。
1.白板現(xiàn)象
在完成所有實驗步驟進行底物TMB溶液顯色后,酶標(biāo)板中所有孔的顏色均為無色,即無信號呈現(xiàn)。
出現(xiàn)該現(xiàn)象的可能原因:
a.試劑已過保質(zhì)期,不同批次稀釋液交叉使用。
b.錯加漏加檢測A,檢測B或者底物溶液TMB。
c.洗板或者加樣過程中,酶標(biāo)記物被污染失活,稀釋液中含有酶抑制劑如疊氮吶等。
d.配置稀釋液的蒸餾水可能被污染。
e.洗滌液是濃縮型的,沒有按比例進行稀釋。
f.酶標(biāo)記物的活性和效價比較低。
g.溶液的PH值不正確,一般稀釋液的PH值應(yīng)保持在7.2-7.4。
2.顯色弱靈敏度低
在完成所有實驗步驟進行底物TMB溶液顯色后,酶標(biāo)板中孔的顯色比較淺,即只有微弱的信號呈現(xiàn)。
出現(xiàn)該現(xiàn)象的可能原因:
a.產(chǎn)品過有效期,試劑沒有按規(guī)定進行適當(dāng)?shù)谋4妗?/p>
b.試劑,標(biāo)準(zhǔn)品或者樣品在使用前沒有平衡到室溫。
c.少加了試劑的量或者加入試劑的稀釋比例不當(dāng)。
d.洗板或者加樣過程中,酶標(biāo)物受污染失活。
e.孵育時間和孵育溫度未達到實驗要求。
f.洗滌液稀釋倍數(shù)不符合要求,洗板次數(shù)過多,洗板沖擊力過大,洗板浸泡時間過長。
g.底物溶液TMB顯色時間太短。
3.花板無梯度背景高
在完成所有實驗步驟進行底物TMB溶液顯色后,酶標(biāo)板中的孔有顏色但沒有梯度,背景也可能較高.
出現(xiàn)該現(xiàn)象的可能原因:
a.底物溶液TMB未置于陰涼避光處保存,實驗前溶液已經(jīng)變藍。
b.孵育溫度過高或者孵育時間過長,發(fā)生了較強的非特異性吸附。
c.沒有按說明書要求洗板,特別是洗板時洗滌液的量少加了。
d.加樣時沒有換槍頭造成交叉污染。
e.花板現(xiàn)象:低濃度或者低活性的包被抗體或者檢測抗體,封閉不足導(dǎo)致的本底不穩(wěn)定,洗板不充分,包被板子的問題。
綜上所述:在ELISA實驗中應(yīng)注意以下問題:
1.在實驗前應(yīng)該按相關(guān)要求將實驗試劑平衡至室溫。
2.包被抗體和檢測抗體應(yīng)該是有高活性的且都針對同一抗原。
3.試劑保存:蛋白抗體類試劑保存于-20攝氏度,顯色液洗滌液保存于2-8攝氏度。
4.各試劑在使用前應(yīng)充分混勻,以保證試劑的均一性和準(zhǔn)確性。
5.嚴(yán)格控制反應(yīng)溫度和反應(yīng)試劑。
6.洗板次數(shù),洗板液的量,洗板液浸泡時間的長短,洗板的力度都是應(yīng)該注意的問題。
7.相關(guān)濃縮液應(yīng)按要求稀釋到相應(yīng)比例方可使用,PH值要保持在7.2-7.4之間。
8.在終止反應(yīng)時盡量避免微孔中存有氣泡。
9.終止反應(yīng)完成后應(yīng)該在2min內(nèi)完成酶標(biāo)儀讀數(shù)。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
關(guān)鍵字: Thrombopoietin ;小鼠促血小板生成素酶聯(lián)免疫試劑盒;Mouse Thrombopoietin ELISA KIT;c mpl ligand; C-mpl ligand; Megakaryocyte Colony Stimulating Factor; Megakaryocyte colony-stimulating factor; Megakaryocyte growth and development factor; Megakaryocyte stimulating factor; MGDF; MKCSF; ML; MPL ligand; MPLLG; Myeloproliferative Leukemia Virus Oncogene Ligand; THPO; Thrombopoietin; Thrombopoietin nirs variant 1; TPO
上??道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)于一體的一家生物科技企業(yè),專營生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細胞生物學(xué),分子生物學(xué)等高生物產(chǎn)品。總部位于上海,并在北京、廣東,江西,吉林等全國30多個省市設(shè)有分公司和代理機構(gòu)。涉及的產(chǎn)品被中國科學(xué)院、清華、北大、復(fù)旦,上海交大,復(fù)旦醫(yī)學(xué)院,上海中醫(yī)藥大學(xué),華東師范大學(xué),第二軍醫(yī)大學(xué),曙光醫(yī)院,浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用,可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和完善的售后服務(wù)確。