當(dāng)培養(yǎng)的大腸桿菌的溫度充分降低,幾乎暫時(shí)停止生長(zhǎng)大部分的蛋白表達(dá)減少,而此時(shí)一組蛋白質(zhì)稱為“冷休克蛋白”被專門誘導(dǎo)表達(dá)。 冷休克表達(dá)載體,pCold I-IV,是利用冷休克基因CSPA啟動(dòng)子設(shè)計(jì)高效率蛋白質(zhì)表達(dá)載體。 CSPA的啟動(dòng)子的下游處,插入了lac操縱子,以便嚴(yán)格控制表達(dá)。此外,5'非翻譯區(qū)(5'UTR),翻譯增強(qiáng)元件(TEE),His標(biāo)簽序列,Xa因 子切割位點(diǎn)和多克隆位點(diǎn)(MCS)位于在CSPA啟動(dòng)子的下游的。由于該產(chǎn)品采用了大腸桿菌的啟動(dòng)子,大多數(shù)大腸桿菌菌株可被用作表達(dá)宿主。有四種類型的 pCold載體,他們的下列原件的位置稍有不同,TEE,His標(biāo)簽序列和Factor XA酶切位點(diǎn)。
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