"FRhK-4：恒河猴胚腎傳代細(xì)胞
細(xì)胞背景資料：胚胎；腎；自發(fā)永生；雌性
HHFK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEMCSS細(xì)胞、MDA-MB-134細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞
PCI:SG-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES1細(xì)胞、Hs 27細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項(xiàng)操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
FRhK-4：恒河猴胚腎傳代細(xì)胞
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
EFM-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES細(xì)胞、RD-ES細(xì)胞、HT-115細(xì)胞
DCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM16136細(xì)胞、KMS-26細(xì)胞、DU_145細(xì)胞
CCD966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-150細(xì)胞、Hs821T細(xì)胞、YD38細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細(xì)胞器脫水，細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細(xì)胞逐步脫水，細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序：采用細(xì)胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時，5~10℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細(xì)胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細(xì)胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細(xì)胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細(xì)胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細(xì)胞/ml）。3.加入1ml細(xì)胞于凍存管中，密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細(xì)胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細(xì)胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細(xì)胞對冷凍保護(hù)劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護(hù)劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
FRhK-4：恒河猴胚腎傳代細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
ROS1728細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T_T_細(xì)胞、SW962細(xì)胞、SW 954細(xì)胞
HCT_116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4-D6P2T細(xì)胞、Hs-675-T細(xì)胞、WB F344細(xì)胞
D324細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR32細(xì)胞、NCI-H211細(xì)胞、RMC-1細(xì)胞
P3 NS1 Ag4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 706.T細(xì)胞、National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞、RCC-10細(xì)胞
因?yàn)榧?xì)胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細(xì)胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細(xì)胞，單個細(xì)胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話，傳代后細(xì)胞是不能貼壁的，這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細(xì)胞消化成單個單個的獨(dú)立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因?yàn)樗麤]有受力點(diǎn)了。很難找到受力點(diǎn)讓你對他吹打的力分散開細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開，受力點(diǎn)就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點(diǎn)分散開。這個是很重要的一點(diǎn)。尤其是對于某些細(xì)胞這一點(diǎn)就是他活去死的致命點(diǎn)。像Caco-２細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點(diǎn)就是一定不能等到細(xì)胞長滿的時候才去消化傳代。要在細(xì)胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細(xì)胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點(diǎn)。先補(bǔ)充這么多，還會后續(xù)更新。再補(bǔ)充一點(diǎn)：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細(xì)胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細(xì)胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細(xì)胞，細(xì)胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細(xì)胞。
SW13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1436細(xì)胞、WERI-Rb1細(xì)胞、hTERT-HME-1細(xì)胞
H1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211細(xì)胞、NCIH1694細(xì)胞、H-676細(xì)胞
Hs578Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10 RGB細(xì)胞、A427細(xì)胞、EFM192C細(xì)胞
LM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1500細(xì)胞、UCLA-SO-M14細(xì)胞、H-35細(xì)胞
alpha TC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Namalva細(xì)胞、H-1688細(xì)胞、NCIH2228細(xì)胞
HMC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ML-2細(xì)胞、NCI-H711細(xì)胞、H35 Reuber細(xì)胞
HCC15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO81-2細(xì)胞、YD-38細(xì)胞、MOLT.4細(xì)胞
L132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 579細(xì)胞、UCLA SO M14細(xì)胞、SK-LMS-1細(xì)胞
CESS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-19細(xì)胞、B16 melanoma細(xì)胞、CaSki細(xì)胞
NCI-H1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT3細(xì)胞、P 3 HR 1細(xì)胞、CCD 1112SK細(xì)胞
LI7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BxPC-3細(xì)胞、3T3 J2細(xì)胞、T173細(xì)胞
Hs27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K299細(xì)胞、OS-732細(xì)胞、HCC-44細(xì)胞
HGBEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS-2B細(xì)胞、MGH-U1 (EJ)細(xì)胞、LNCaP C4-2B細(xì)胞
OVCAR.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM細(xì)胞、BeWo細(xì)胞、MDCC MSB1細(xì)胞
FTC-133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C1細(xì)胞、SNU-251細(xì)胞、NSC34細(xì)胞
SBC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC4006細(xì)胞、NCIH716細(xì)胞、RM-1細(xì)胞
SBC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC4006細(xì)胞、NCIH716細(xì)胞、RM-1細(xì)胞
McA-RH8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN1細(xì)胞、PL-45細(xì)胞、Mel624細(xì)胞
BEL-7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1793細(xì)胞、OSKM-1細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞
MDCC-MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA10細(xì)胞、CHO Lec1細(xì)胞、KE-37細(xì)胞
NCI-BL2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO31細(xì)胞、H3255_DA細(xì)胞、HO8910/PM細(xì)胞
HPB/ALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP-2/0-AG14細(xì)胞、H-1299細(xì)胞、HGBEC細(xì)胞
TE-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS-3細(xì)胞、Hs 675.T細(xì)胞、SNT-8細(xì)胞
MV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1672細(xì)胞、Caco-2/BBe細(xì)胞、TGBC-11-TKB細(xì)胞
D324 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞
UM-RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNEC30細(xì)胞、B95.8細(xì)胞、Hs832T細(xì)胞
FRhK-4：恒河猴胚腎傳代細(xì)胞
MV4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30OHK細(xì)胞、K1細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞
MDCK II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SC1細(xì)胞、G-292細(xì)胞、130 T細(xì)胞
BALB 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG-63細(xì)胞、PL45細(xì)胞、TM-3細(xì)胞
P-388細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC-3細(xì)胞、SKNBE2細(xì)胞、HLF細(xì)胞
IPLB-Sf21-AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU1細(xì)胞、H-1648細(xì)胞、MT-2J細(xì)胞
HET-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM3190細(xì)胞、Caco2-BBE細(xì)胞、LX-2細(xì)胞
HPB-ALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca 109細(xì)胞、H3396細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞
Li-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC clone 929細(xì)胞、Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞、VM-CUB-I細(xì)胞
PK (15)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM07404D細(xì)胞、Hs-578T細(xì)胞、NCIH2286細(xì)胞
Hs 600.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B 95.8細(xì)胞、SuDHL 1細(xì)胞、H1963細(xì)胞
LLC-PK(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞、mRTEC細(xì)胞、HLMVEC細(xì)胞
PTK 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 699細(xì)胞、NS1-Ag4/1細(xì)胞、hCMEC/D3細(xì)胞
BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L363細(xì)胞、OVISE細(xì)胞、H-358細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeWo細(xì)胞、HCC-9724細(xì)胞、H-520細(xì)胞
CC-LP-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA Dx5細(xì)胞、NCIH2052細(xì)胞、OVHM細(xì)胞
JJN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC1細(xì)胞、CW2細(xì)胞、UMUC14細(xì)胞
H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD-4細(xì)胞、MDA MB 231細(xì)胞、SUM-52PE細(xì)胞
KLM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE1細(xì)胞、KALS1細(xì)胞、MEL細(xì)胞
G402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP2細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞
Hs819T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-766-T細(xì)胞、U2OS細(xì)胞、INS1-E細(xì)胞
RS411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2-D1細(xì)胞、LAN-5細(xì)胞、HEK293-FT細(xì)胞
A549/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2029細(xì)胞、SW 948細(xì)胞、COLO320 DM細(xì)胞
MESSA/Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12-SM細(xì)胞、HLEC-B3細(xì)胞、MEG01細(xì)胞
SHP77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-683細(xì)胞、PFSK細(xì)胞、TE-10細(xì)胞
U-373-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC 3T3-E1細(xì)胞、WSU-DLCL-2細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 766細(xì)胞、H-676細(xì)胞、RPVSMC細(xì)胞
SK-RC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT 26細(xì)胞、L 1210細(xì)胞、TE 32.T細(xì)胞
SHI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAG細(xì)胞、U266 Bl細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞
PC-3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞、NCIH128細(xì)胞、8226/S細(xì)胞
HMC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1Sq細(xì)胞、CG-4細(xì)胞、HConEpic細(xì)胞
MB 157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC090細(xì)胞、Z-138細(xì)胞、Hepatoma 22細(xì)胞
Anip-973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D 407細(xì)胞、HR-8348細(xì)胞、RKOE6細(xì)胞
HPAF II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞、Caki-1細(xì)胞、NUGC2細(xì)胞
H1341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T47D:A細(xì)胞、TE354.T細(xì)胞、H-1666細(xì)胞
FRhK-4：恒河猴胚腎傳代細(xì)胞
C8166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T 84細(xì)胞、Pa17C細(xì)胞、L-929細(xì)胞
ARO81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C細(xì)胞、SR-786細(xì)胞、SK-ChA1細(xì)胞
H2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-6(OAN)細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞、SW 1783細(xì)胞
Hs-578Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN 60細(xì)胞、JTC-39細(xì)胞、MLA-144細(xì)胞
OVCAR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera 2細(xì)胞、SUM 102細(xì)胞、NCTC 1469細(xì)胞
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