"HIEC-6:正常人腸上皮傳代細胞
細胞背景資料:腸;上皮細胞
KYSE-510細胞系相關產品:OVCAR432細胞、KE37細胞、B78細胞
NCIH1836細胞系相關產品:WM-451Lu細胞、HUT-125細胞、OVCAR 433細胞
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
造成實驗室細胞污染常見情況總結:細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HIEC-6:正常人腸上皮傳代細胞
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
RTMC細胞系相關產品:PL 45細胞、J-111細胞、KMH-2細胞
WTRL1細胞系相關產品:AAV-293細胞、H-920細胞、DanG細胞
HCC1500細胞系相關產品:OEC33細胞、HTR-8/SV neo細胞、H1417細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
可以這樣說,對于需要消化傳代的細胞,每一次的消化都是對這個細胞存活與否,狀態(tài)好與不好至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的,他們受到了差別待遇當然會有脾氣的,大家爭取做到因材施教,比如試試下面的“四步消化法”。(以難消化細胞為例),具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍(目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉)。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了)3)吸干凈瓶內剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實際情況把握)。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HIEC-6:正常人腸上皮傳代細胞
細胞生長特性:貼壁
Panc 05.04細胞系相關產品:KMST6細胞、CMEC/D3細胞、NUGC-4細胞
HS-294-T細胞系相關產品:HSAEC1-KT細胞、TC-1[JHU-1]細胞、TALL1細胞
Metastatic Variant 522細胞系相關產品:ZR-75-30細胞、MV3細胞、MKN-74細胞
PA-TU S細胞系相關產品:NCI-H322T細胞、IMR 32細胞、NCI-ADR-RES細胞
細胞消化過程總結:其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經消失了,細胞之間的附著也已經消失了,細胞已經獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
NCIH647細胞系相關產品:Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞
SW.620細胞系相關產品:GM-215細胞、MCCAR細胞、SK-NMC細胞
CL 1-0細胞系相關產品:HFT-8810細胞、U373-MG細胞、NCI-H292細胞
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CV-1細胞系相關產品:CCD 1112SK細胞、HCPEpiC細胞、WiDrTC細胞
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SUNE-1細胞系相關產品:D10G41細胞、SCC 15細胞、Hs822T細胞
MDCK.2細胞系相關產品:Michigan Cancer Foundation-10A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、Hep G2-Luc細胞
A 549細胞系相關產品:HLEC-SRA 01/04細胞、MMAc-SF細胞、MSB1細胞
SCL2細胞系相關產品:MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、4175細胞、TFK-1細胞
DHBE細胞系相關產品:SW900細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞、Hep 3B2_1-7細胞
YD38細胞系相關產品:AG06814-J細胞、OVCAR-8/ADR細胞、143B細胞
U251-MG細胞系相關產品:Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞
LS 174T細胞系相關產品:HS 445T細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞、L 540細胞
HCC-1438細胞系相關產品:LN229細胞、PA I細胞、BpRcl細胞
AMJ2-C8細胞系相關產品:ANA1細胞、CHO K1細胞、SGC 7901細胞
AMJ2-C8細胞系相關產品:ANA1細胞、CHO K1細胞、SGC 7901細胞
MeT 5A細胞系相關產品:SW1783細胞、IPI-2I細胞、Panc 02.03細胞
COLO-357細胞系相關產品:SNU449細胞、S91細胞、MM1.S細胞
NCI H508細胞系相關產品:NB9細胞、NK-92.05細胞、J45.01細胞
SKBr3細胞系相關產品:Hs-281-T細胞、HFTF細胞、OAW 42細胞
HcaF細胞系相關產品:H8細胞、YD-15細胞、RT-112細胞
Ly18細胞系相關產品:NCIH28細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞
211H細胞系相關產品:Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、TO175T細胞、HSC 3細胞
RCC10細胞系相關產品:LAPC4細胞、H2108細胞、P116細胞
OS-RC-2細胞系相關產品:NUGC2細胞、SF-767細胞、3T6細胞
HIEC-6:正常人腸上皮傳代細胞
PANC1005細胞系相關產品:H-2198細胞、N-87細胞、MOLM-16細胞
MiaPaCa2細胞系相關產品:HEC151細胞、CA 46細胞、KM12SM細胞
HCC1008細胞系相關產品:HCC1588細胞、REC細胞、SNU-16細胞
NKL細胞系相關產品:Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、C4-2 B細胞、SW 1222細胞
ReNcell CX細胞系相關產品:HM06.A1細胞、U251MG細胞、P3-x63-Ag8 653細胞
DI-TNC1細胞系相關產品:SN12CPM6細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、hEM15A細胞
Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞系相關產品:THP 1細胞、IGR-OV1細胞、BHK-21細胞
MN-60細胞系相關產品:Wien133細胞、H-838細胞、HCC1599細胞
H-510A細胞系相關產品:HUT28細胞、Line 207細胞、McCoy細胞
T-HSC細胞系相關產品:SNU-119細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、ROS17/2.8細胞
MLE-12細胞系相關產品:MDA361細胞、Sp 2817細胞、TMK1細胞
SGC-7901/DDP細胞系相關產品:CCD-841CoTr細胞、DHL5細胞、LLCPK1細胞
S16細胞系相關產品:MS751細胞、Hep 3B2細胞、BEL-7404細胞
Epstein-Barr-2細胞系相關產品:HK2細胞、MLTC-1細胞、SKMES細胞
MC3T3-E1 Subclone 24細胞系相關產品:H1666_DA細胞、526mel細胞、Lung cancer-1/squamous細胞
H8細胞系相關產品:SNU-354細胞、HCC-78細胞、Jurkat Clone E6-1細胞
MV4:11細胞系相關產品:P30OHK細胞、K1細胞、BXPC3細胞
MIA-PaCa-2細胞系相關產品:Dakiki細胞、HSC3細胞、HCPEpiC細胞
ACC2細胞系相關產品:SUDHL-8細胞、GM637細胞、EFO27細胞
COLO-680N細胞系相關產品:HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞
HIBEpiC細胞系相關產品:HEK 293A細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞、H2107細胞
HIBEpiC細胞系相關產品:HEK 293A細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞、H2107細胞
G-361細胞系相關產品:U-118MG細胞、U-87MG細胞、HCMEC細胞
AD-293細胞系相關產品:C4-2 Bone metastatic細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞、Hs 888Lu細胞
NCI-H2081細胞系相關產品:NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞
H2081細胞系相關產品:hFOB細胞、NCI-H2171細胞、CP70細胞
MMAc.SF細胞系相關產品:PIEC細胞、NCIH2452細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞
U-937細胞系相關產品:MPC 11細胞、JM細胞、Epstein-Barr-2細胞
MBVP細胞系相關產品:COLO-16細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、SK-N-DZ細胞
MIMVEC細胞系相關產品:A2780細胞、CCLP1細胞、SW-780細胞
COLO 684細胞系相關產品:NCI-SNU-620細胞、AtT-20細胞、SKMEL2細胞
343 MG細胞系相關產品:SUD6細胞、alpha-TC1.6細胞、H-747細胞
HME1細胞系相關產品:MC 116細胞、LNCaP clone FGC細胞、NCIH1666細胞
HARAB細胞系相關產品:EA. hy 926細胞、Jurkat FHCRC細胞、FUOV1細胞
HIEC-6:正常人腸上皮傳代細胞
MCF7-GFP細胞系相關產品:P3/NS-1細胞、SW 1353細胞、CCRF-CEM C1細胞
RERF-LCMS細胞系相關產品:NCI-H1882細胞、SK-N-BE(2C)細胞、PTK 1細胞
LICR-LON-HN6-R細胞系相關產品:751細胞、BC-024細胞、EA. hy 926細胞
CL 1-0細胞系相關產品:HFT-8810細胞、SNU-1040細胞、FDCP1細胞
MADISON LUNG TA-109細胞系相關產品:P19細胞、H2108細胞、HET1A細胞
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關鍵字: HIEC-6:正常人腸上皮傳代細胞;
上海弘順生物科技有限公司長期為高校和科研單位等提供優(yōu)良的科研產品,在生物化學行業(yè)內獲得良好的客戶口碑。目前,公司提供近十萬余種科研產品,其中涵蓋化學、細胞生物學、分子生物學、免疫學、生物醫(yī)學等相關領域。同時,我司不斷拓展產品種類,為用戶提供質量更優(yōu)、價格更實惠的科研產品。 上海弘順生物科技有限公司 主營產品有: 1.生化試劑:上海弘順生物科技有限公司 在上海化學工業(yè)區(qū)設有生產研發(fā)基地。目前,我司生化試劑產品已達60000多種,并呈不斷增長態(tài)勢。經過不斷的創(chuàng)新與發(fā)展,上海弘順生物科技有限公司創(chuàng)立了公司自主試劑品牌(品牌:HonSun),為廣大科研工作者提供了高品質的實驗試劑。我司生化試劑種類涵蓋氨基酸類、蛋白質