pRL 家族是野生型海腎螢光素酶(Rluc) 報告基因?qū)φ蛰d體。pRL 載體提供組成型表達(dá)的海腎螢光素酶,可與一個螢火蟲螢光素酶載體聯(lián)合共轉(zhuǎn)染哺乳動物細(xì)胞。海腎螢光素酶的表達(dá)為實驗的螢火蟲螢光素酶報告基因正態(tài)化提供內(nèi)對照值。pRL 載體包含一個編碼海腎螢光素酶(Rluc) 的cDNA, 這個cDNA 從珊瑚蟲類腔腸動物海腎(Renilla reniformis) 中克隆而來。目前有四個不同的啟動子構(gòu)造。其中HSV- 胸腺嘧啶核苷激酶啟動子(pRL-TK) 相對較弱, 更適用于海腎螢光素酶報告基因載體的中性組成型表達(dá)。早期SV40 增強子/ 啟動子區(qū)域(pRL-SV40) 和CMV 極早期增強子/ 啟動子區(qū)域(pRL-CMV)一般提供高水平轉(zhuǎn)錄,因此可能不適于作為實驗載體帶有強調(diào)控元件的共報告基因。一般我們建議在將要應(yīng)用的目標(biāo)細(xì)胞中驗證某一個特定共報告基因的性能。除了經(jīng)過修飾的Rluc 報告基因外,所有pRL載體均是從dam–/dcm– E. coli K 宿主菌株分離而來,這樣可以使用對dam 或 dcm 甲基化敏感的限制性內(nèi)切酶進(jìn)行消化。
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