"OVCAR-8:人卵巢癌傳代細胞
細胞背景資料:卵巢癌;女性
COLO679細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EPC細胞、Hs-940細胞、SCH細胞
CFPAC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMK1細胞、ACT-1細胞、JeKo-1細胞
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
OVCAR-8:人卵巢癌傳代細胞
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
H-295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-182細胞、HCMEC細胞、UCH1細胞
HEK (AD293)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI 38細胞、HT 1197細胞、BAEC細胞
HPAF II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、Caki-1細胞、NUGC2細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
可以這樣說,對于需要消化傳代的細胞,每一次的消化都是對這個細胞存活與否,狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的,他們受到了差別待遇當然會有脾氣的,大家爭取做到因材施教,比如試試下面的“四步消化法”。(以難消化細胞為例),具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍(目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉)。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了)3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實際情況把握)。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
OVCAR-8:人卵巢癌傳代細胞
細胞生長特性:貼壁
GLC-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLCMK2細胞、INS-1E細胞、He-La細胞
CDC/EU.HMEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2227細胞、SKN-SH細胞、NCI-H209細胞
SW 839細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL 4細胞、TT細胞、FU-97細胞
NCI-BL1339細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neuro-2a細胞、Tb 1-Lu細胞、NCTC1469細胞
細胞傳代時消化的問題:可以這樣說,對于需要消化傳代的細胞,每一次的消化都是對這個細胞存活與否,狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非常肯定地說,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的,他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。(以難消化細胞為例);具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為步,目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。)3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比。)這是第三步。4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實際情況你自己把握)。這是第四步。其實還可以有第五步,對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低,保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了,如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞,像RAW264.7,僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較,去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步,除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外,還有一個更重要的作用就是,可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài),不成片不連體。
PCI-4.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22-R1細胞、D-283細胞、DMS114細胞
NTERA-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCMK1細胞、FD-LSC-1細胞、NCI-H378細胞
LLC-WRC 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuNS1細胞、HEEpiC細胞、MHCC-LM3細胞
V79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCKII-WT細胞、SW-948細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞
MDAMB330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sarcoma OSteogenic-2細胞、OsA-CL細胞、MADISON LUNG TA-109細胞
HSC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMC細胞、COLO 679細胞、SK-N-BE細胞
NCI-H889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 88 D1細胞、MCF.10A細胞、BCAP37細胞
CW-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2066細胞、C-4 I細胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細胞
NCI/ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FM-88細胞、DC 2.4細胞、L-cell細胞
JB-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H322細胞、NCIH740細胞、COLO 824細胞
Colo320細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC/PRF/5細胞、RBL-I細胞、TERT-RPE1細胞
PA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Becker細胞、NUGC-2細胞、NCIH1819細胞
GM02219D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMa-bm細胞、WSU-DLCL2細胞、HFT8810細胞
HCC0015細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV434細胞、IBMF-7細胞、IMCD-3細胞
Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2107細胞、NCI-H1581細胞、NFS-60細胞
PC3M-1E8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMx721.174.T2細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞、Hs839.T細胞
PC3M-1E8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMx721.174.T2細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞、Hs839.T細胞
TE5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN-9D細胞、NCI-H2066細胞、TE-5細胞
RKOE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 190PT細胞、BCECs細胞、BC-3-H-I細胞
PK136細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFS60細胞、Vero-76細胞、Institute for Medical Research-90細胞
Clone M-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB435細胞、MOPC細胞、SNU-368細胞
Jurkat-FHCRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK-1細胞、SKLMS1細胞、H-508細胞
LN 382細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-FI細胞、T98G細胞、HuNS1細胞
HEK 293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs870T細胞、KYSE510細胞、PLA801-95C細胞
HT 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC5細胞、H2171細胞、KYSE520細胞
MOLM-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-643細胞、OCI-Ly07細胞、PANC0203細胞
OVCAR-8:人卵巢癌傳代細胞
NCIH1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC-JF細胞、D283細胞、SK-OV-433細胞
NCI-H510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1755細胞、BE(2)M17細胞、BI-Mel細胞
C4I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V 79-4細胞、SL-1細胞、MUM2B細胞
JROECL 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KATOIII細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、MeT5A細胞
H-1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2023細胞、MIN6細胞、NCIH1568細胞
KM12 SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin Darby Bovine Kidney細胞、SCH細胞、GAK細胞
SGC-996細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 604.T細胞、HCET細胞、LAN1細胞
Ly1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、Sp2/0細胞、NCIH847細胞
A-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co-115細胞、CF-PAC1細胞、SJ-RH30細胞
NFS60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT-125細胞、PLC PRF 5細胞、P1-Raji細胞
Hs822T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL6細胞、HR-1細胞、HLE細胞
VeroC1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、CEMO-1細胞、EST81細胞
H1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-CA 432細胞、KCL22S細胞、YAC細胞
CCD 841 CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320HSR細胞、CHP212細胞、C3H-10T1/2細胞
LAN-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10細胞、HCC941122細胞、HEM-L細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeWo細胞、HCC-9724細胞、H-520細胞
HEK-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTPA細胞、VAESBJ細胞、NCIH747細胞
NCI-H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8.653細胞、HS-940-T細胞、MCMEC細胞
MS 751細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA5細胞、BALB 3T3 clone A31細胞、NCI-H520細胞
SCC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ls-174-T細胞、TU 686細胞、A2780/CP70細胞
A549/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2029細胞、SW 948細胞、COLO320 DM細胞
Caco-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-1 myeloid leukemia細胞、HLF細胞、J774細胞
PK (15)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM07404D細胞、Hs-578T細胞、NCIH2286細胞
SKO3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:143 B細胞、NCIH460細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞
NCIH2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-382細胞、OVTOKO細胞、NCIH1581細胞
MDA 435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP2細胞、A-375.S2細胞、T47D細胞
3AA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、LN299細胞、F9細胞
CAL-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-51細胞、My-La 2059細胞、NCI-747細胞
G401細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu-8988s細胞、GM03571細胞、H322細胞
MonoMac1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-3細胞、95C細胞、C38細胞
NB-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-125細胞、HCC-1438細胞、HT clone H9細胞
H441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHL5細胞、H748細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞
FRO81-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m細胞、SW1088細胞、NCI-H196細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AGS細胞、P388.D1細胞、P3X63 AG8-653細胞
OVCAR-8:人卵巢癌傳代細胞
COLO-320細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-12細胞、LLCMK2細胞、SSP-25細胞
H22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 70細胞、Hs 895 T細胞、HEC1B細胞
hRMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAS4細胞、TYK-nu細胞、NS-1細胞
LLC-WRC 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuNS1細胞、T98G細胞、Hs578Bst細胞
WM-2664細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 BL6細胞、TGBC11TKB細胞、T.T細胞
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上海弘順生物科技有限公司長期為高校和科研單位等提供優(yōu)良的科研產(chǎn)品,在生物化學行業(yè)內(nèi)獲得良好的客戶口碑。目前,公司提供近十萬余種科研產(chǎn)品,其中涵蓋化學、細胞生物學、分子生物學、免疫學、生物醫(yī)學等相關(guān)領(lǐng)域。同時,我司不斷拓展產(chǎn)品種類,為用戶提供質(zhì)量更優(yōu)、價格更實惠的科研產(chǎn)品。 上海弘順生物科技有限公司 主營產(chǎn)品有: 1.生化試劑:上海弘順生物科技有限公司 在上?;瘜W工業(yè)區(qū)設(shè)有生產(chǎn)研發(fā)基地。目前,我司生化試劑產(chǎn)品已達60000多種,并呈不斷增長態(tài)勢。經(jīng)過不斷的創(chuàng)新與發(fā)展,上海弘順生物科技有限公司創(chuàng)立了公司自主試劑品牌(品牌:HonSun),為廣大科研工作者提供了高品質(zhì)的實驗試劑。我司生化試劑種類涵蓋氨基酸類、蛋白質(zhì)