pET-Trx表達載體采用蛋白質工程改造的硫氧還蛋白即將其中兩個氨基酸突變成His,使硫氧還蛋白在空間立體結構上形成三個組氨酸位點(His-patch),便于采用chelating sepharose親和層析。該表達載體采用T7啟動子和(His-patch)Thioredoxin融合表達,同時選用人鼻病毒14亞型3C蛋白酶專一性切割位點。硫氧還蛋白作為分子內伴侶可以幫助許多基因在E.coli胞內正確折疊如IL-3、IL-6、IL-11等。
Thioredoxinmut(His-patch) (E.coli)編碼氨基酸序列如下(含多克隆位點):
MSDKIIHLTDDSFDTDVLKADGAILVDFWAHWCGPCKMI APILDEIADEYQGKLTVAKLNIDHNPGTAPKYGIRGIPTLLLFKNGEVAATKVGALSKG QLKEFLDANLAGSSMPDSLEVLFQGPAGSAEFSAS
133 AMINO ACIDS
MW 14KD
3 個His形成立體His-patch
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