pET-Trx表達(dá)載體采用蛋白質(zhì)工程改造的硫氧還蛋白即將其中兩個(gè)氨基酸突變成His,使硫氧還蛋白在空間立體結(jié)構(gòu)上形成三個(gè)組氨酸位點(diǎn)(His-patch),便于采用chelating sepharose親和層析。該表達(dá)載體采用T7啟動(dòng)子和(His-patch)Thioredoxin融合表達(dá),同時(shí)選用人鼻病毒14亞型3C蛋白酶專一性切割位點(diǎn)。硫氧還蛋白作為分子內(nèi)伴侶可以幫助許多基因在E.coli胞內(nèi)正確折疊如IL-3、IL-6、IL-11等。
Thioredoxinmut(His-patch) (E.coli)編碼氨基酸序列如下(含多克隆位點(diǎn)):
MSDKIIHLTDDSFDTDVLKADGAILVDFWAHWCGPCKMI APILDEIADEYQGKLTVAKLNIDHNPGTAPKYGIRGIPTLLLFKNGEVAATKVGALSKG QLKEFLDANLAGSSMPDSLEVLFQGPAGSAEFSAS
133 AMINO ACIDS
MW 14KD
3 個(gè)His形成立體His-patch
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