pIL-6-promoter-luc (報告基因質(zhì)粒)
pIL-6-promoter-luc(報告基因質(zhì)粒)是信裕生物自行研發(fā)的用于檢測IL-6 promoter轉(zhuǎn)錄活性水平的報告基因質(zhì)粒。
pIL-6-promoter-luc是以信裕生物的pGL6質(zhì)粒為模板，在其多克隆位點插入了human IL-6的啟動子序列(-637bp～+53bp)，可以高靈敏度地檢測IL-6 promoter的激活水平。
IL-6(Interleukin-6)，中文名為白細胞介素-6，簡稱白介素6，是一種非常重要的炎性細胞因子，在炎性疾病的發(fā)生發(fā)展過程中起重要作用，常作為炎癥反應(yīng)的重要指標。
pGL6質(zhì)粒是用于在哺乳動物細胞中進行螢火蟲螢光素酶(firefly luciferase)報告基因檢測的新一代質(zhì)粒。該報告基因質(zhì)粒比
Promega公司的pGL3系列有了全面的改進，一方面對于luciferase的編碼進行了改進，確保能更好地在哺乳動物細胞中進行表達，同時對整個質(zhì)粒中所有可以被預(yù)測出的可能的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點全部進行了適當?shù)耐蛔兲幚?，在保持原有功能不變的情況下，使各種轉(zhuǎn)錄因子在質(zhì)粒上的非特異性結(jié)合降到最低。
螢光素、螢光素酶、螢火蟲螢光素酶和海腎螢光素酶也經(jīng)常被稱作熒光素、熒光素酶、螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶。
pIL-6-promoter-luc質(zhì)粒的主要信息如下：
luc2 reporter gene
753-2405
SV40 late poly(A) signal
2440-2661
SV40 early enhancer/promoter
2709-3127
Synthetic neomycin phosphotransferase (Neor) coding region
3152-3946
Synthetic poly(A) signal
3971-4019
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region
4086-4105
ColE1-derived plasmid replication origin
4343
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region
5134-5994
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site
6099-6252
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region
6201-6220
pIL-6-promoter-luc質(zhì)粒的圖譜如下：
pIL-6-promoter-luc的多克隆位點及IL-6 promoter的詳細圖譜如下：
1
GGCCTAACTG
GGAGACGCCT
TGAAGTAACT
GCACGAAATT
CCGGATTGAC
CCTCTGCGGA
ACTTCATTGA
CGTGCTTTAA
51
TGAGGGTGGC
CAGGCAGTTC
TACAACAGCC
GCTCACAGGG
AGAGCCAGAA
ACTCCCACCG
GTCCGTCAAG
ATGTTGTCGG
CGAGTGTCCC
TCTCGGTCTT
101
CACAGAAGAA
CTCAGATGAC
TGGTAGTATT
ACCTTCTTCA
TAATCCCAGG
GTGTCTTCTT
GAGTCTACTG
ACCATCATAA
TGGAAGAAGT
ATTAGGGTCC
151
CTTGGGGGGC
TGCGATGGAG
TCAGAGGAAA
CTCAGTTCAG
AACATCTTTG
GAACCCCCCG
ACGCTACCTC
AGTCTCCTTT
GAGTCAAGTC
TTGTAGAAAC
201
GTTTTTACAA
ATACAAATTA
ACTGGAACGC
TAAATTCTAG
CCTGTTAATC
CAAAAATGTT
TATGTTTAAT
TGACCTTGCG
ATTTAAGATC
GGACAATTAG
251
TGGTCACTGA
AAAAAAAAAT
TTTTTTTTTT
CAAAAACCAT
AGCTTTAGCT
ACCAGTGACT
TTTTTTTTTA
AAAAAAAAAA
GTTTTTGGTA
TCGAAATCGA
301
TATTTTTTTT
CTCTTTGTAA
AACTTCGTGC
ATGACTTCAG
CTTTACTCTT
ATAAAAAAAA
GAGAAACATT
TTGAAGCACG
TACTGAAGTC
GAAATGAGAA
351
TGTCAAGACA
TGCCAAAGTG
CTGAGTCACT
AATAAAAGAA
AAAAAGAAAG
ACAGTTCTGT
ACGGTTTCAC
GACTCAGTGA
TTATTTTCTT
TTTTTCTTTC
401
TAAAGGAAGA
GTGGTTCTGC
TTCTTAGCGC
TAGCCTCAAT
GACGACCTAA
ATTTCCTTCT
CACCAAGACG
AAGAATCGCG
ATCGGAGTTA
CTGCTGGATT
451
GCTGCACTTT
TCCCCCTAGT
TGTGTCTTGC
GATGCTAAAG
GACGTCACAT
CGACGTGAAA
AGGGGGATCA
ACACAGAACG
CTACGATTTC
CTGCAGTGTA
501
TGCACAATCT
TAATAAGGTT
TCCAATCAGC
CCCACCCGCT
CTGGCCCCAC
ACGTGTTAGA
ATTATTCCAA
AGGTTAGTCG
GGGTGGGCGA
GACCGGGGTG
551
CCTCACCCTC
CAACAAAGAT
TTATCAAATG
TGGGATTTTC
CCATGAGTCT
GGAGTGGGAG
GTTGTTTCTA
AATAGTTTAC
ACCCTAAAAG
GGTACTCAGA
601
CAATATTAGA
GTCTCAACCC
GATGTCTGAG
GTTATAATCT
CAGAGTTGGG
GGTTATTTAT
ATCCTGACCT
CTACAGACTC
651
CCCTCGAGCC
CACCGGGAAC
GAAAGAGAAG
CTCTATCTCC
CGAGTAAGAC
GGGAGCTCGG
GTGGCCCTTG
CTTTCTCTTC
GAGATAGAGG
701
TCTGCAGAAG
CTTGGCAATC
CGGTACTGTT
GGTAAAGCCA
AGACGTCTTC
GAACCGTTAG
GCCATGACAA
CCATTTCGGT
pIL-6-promoter-luc中沒有的酶切位點(Restriction enzymes that do not cut pIL-6-promoter-luc)包括：
Afl II
Asc I
Ase I
Bsa I
BsaA I
BsiW I
BspM II
BssH II
Eco72 I
EcoR I
EcoR V
Mlu I
Nde I
Nru I
PflM I
Pme I
Pml I
Psp1406 I
PspA I
Rsr II
Sac I
Sma I
SnaB I
Spl I
Srf I
Tth111 I
Vsp I
Xcm I
Xma I
Xmn I
pIL-6-promoter-luc中的單酶切位點(Restriction enzymes that cut pIL-6-promoter-luc once)包括：
Sfi I
GGCCN,NNN`NGGCC
9
BsiC I
TT`CG,AA
4022
Bgl I
GCCN,NNN`NGGC
9
BstB I
TT`CG,AA
4022
Acc65 I
G`GTAC,C
15
Sal I
G`TCGA,C
4036
Asp718
G`GTAC,C
15
Afl III
A`CRYG,T
4286
Kpn I
G,GTAC`C
19
ApaL I
G`TGCA,C
4600
Nhe I
G`CTAG,C
430
HgiE II
ACCNNNNNNGGT
-1/134865
Aat II
G,ACGT`C
496
Not I
ACCNNNNNNGGT
5106
PaeR7 I
C`TCGA,G
664
BstX I
CCAN,NNNN`NTGG
5130
Xho I
C`TCGA,G
664
BstE II
G`GTNAC,C
5133
Bgl II
A`GATC,T
709
Ahd I
GACNN,N`NNGTC
5208
Hind III
A`AGCT,T
719
Bsu36 I
CC`TNA,GG
5564
BsrG I
T`GTAC,A
1244
Pvu I
CG,AT`CG
5578
Dra III
CAC,NNN`GTG
1900
Sac II
CC,GC`GG
5602
Mun I
C`AATT,G
2580
Bst1107 I
GTA|TAC
5718
BamH I
G`GATC,C
2673
Xca I
GTA|TAC
5718
Stu I
AGG|CCT
3106
Spe I
A`CTAG,T
6037
EcoN I
CCTNN`N,NNAGG
3627
pIL-6-promoter-luc質(zhì)粒中推薦使用的測序引物序列如下：
RVprimer3(6201-6220):
CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
pIL-6-promoter-luc的全序列信息： D2386 pIL-6-promoter-luc-seq.txt
包裝清單：
KL-2386-1μg
pIL-6-promoter-luc(報告基因質(zhì)粒)
1μg
KL-2386-100μg
pIL-6-promoter-luc(報告基因質(zhì)粒)
100μg
保存條件：
-20℃保存。
注意事項：
本質(zhì)粒未經(jīng)信裕生物書面許可不得用于任何商業(yè)用途，也不得移交給訂貨人所在實驗室外的任何個人或單位。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。使用說明：
1. 首次使用1μg包裝的本產(chǎn)品時，請先取少量本質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，進行質(zhì)粒小量、中量或大量抽提后再用于后續(xù)用途。抽提獲得的質(zhì)粒可以通過酶切電泳進行鑒定，或通過測序進行鑒定。
2. 100μg包裝的本產(chǎn)品質(zhì)粒濃度為0.1μg/μl，共1ml?？梢灾苯佑糜诿盖谢蛘咿D(zhuǎn)染細胞。
3. pIL-6-promoter-luc可以用常規(guī)的細胞轉(zhuǎn)染方法轉(zhuǎn)染細胞。檢測時可以采用信裕生物的螢火蟲螢光素酶報告基因檢測試劑盒(RG005/RG006)或雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒(RG027/RG028)。
4. LPS等常見的可以激活I(lǐng)L-6 promoter的試劑，可以用作pIL-6-promoter-luc報告基因檢測時的陽性對照。
關(guān)鍵字： pIL-6-promoter-luc (報告基因質(zhì)粒)說明書；pIL-6-promoter-luc (報告基因質(zhì)粒)廠家
上海康朗生物科技有限公司是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)于一體的一家生物科技企業(yè)，專營生化試劑、標準品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細胞生物學，分子生物學等高生物產(chǎn)品?？偛课挥谏虾?，并在北京、廣東，江西，吉林等全國30多個省市設(shè)有分公司和代理機構(gòu)。涉及的產(chǎn)品被中國科學院、清華、北大、復(fù)旦，上海交大，復(fù)旦醫(yī)學院，上海中醫(yī)藥大學，華東師范大學，第二軍醫(yī)大學，曙光醫(yī)院，浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用，可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和完善的售后服務(wù)確。