pCMV-C-BFP (藍(lán)色熒光蛋白)

pCMV-C-BFP是信裕生物自行研發(fā)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)質(zhì)粒，用于表達(dá)C端含BFP(Blue FluorescentProtein,藍(lán)色熒光蛋白)標(biāo)
簽的融合蛋白。該質(zhì)粒含有CMV啟動(dòng)子，可以高效啟動(dòng)目的蛋白在細(xì)胞中的表達(dá)。在多克隆位點(diǎn)的后面有一個(gè)BFP的完整編碼序列，因此在多克隆位點(diǎn)根據(jù)閱讀框插入目的基因就可以表達(dá)C端含有BFP標(biāo)簽的融合蛋白。利用BFP的熒光特性可以比較容易地觀察融合蛋白的表達(dá)水平和細(xì)胞內(nèi)定位，也可以利用BFP抗體來(lái)檢測(cè)或免疫沉淀融合蛋白。BFP與GFP高度相似，可以嘗試用GFP抗體檢測(cè)BFP。該質(zhì)粒為卡那霉素抗性。轉(zhuǎn)染細(xì)胞后，可以使用G418篩選穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株。
pCMV-C-BFP質(zhì)粒的主要信息如下：

pCMV-C-BFP質(zhì)粒(5010bp)的圖譜如下：

pCMV-C-BFP的多克隆位點(diǎn)的詳細(xì)圖譜如下：

pCMV-C-BFP中沒(méi)有的酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-BFP)包括：

pCMV-C-BFP中的單酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that cut pCMV-C-BFP once)包括：

pCMV-C-BFP質(zhì)粒中推薦使用的測(cè)序引物序列如下：
T3 primer (620-639): 5′-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3′
C-BFP primer (852-873): 5′- GGGTCAGCTTGCCGTAGGTGGC -3′
pCMV-C-BFP的全序列信息：D2621 pCMV-C-BFP-seq.txt
pCMV-C-BFP質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后的表達(dá)效果請(qǐng)參考圖1。

  
圖1. pCMV-C-BFP質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后的表達(dá)效果圖。左側(cè)為明場(chǎng)照片，右側(cè)為熒光照片。

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