pCMV-C-DsRed (紅色熒光蛋白)
pCMV-C-DsRed是信裕生物自行研發(fā)的哺乳動物細胞表達質(zhì)粒，用于表達C端含DsRed (Discosoma sp. red fluorescent protein，香菇珊瑚紅色熒光蛋白)標簽的融合蛋白。該質(zhì)粒含有CMV啟動子，可以高效啟動目的蛋白在細胞中的表達。在多克隆位點的后面有一個DsRed的完整編碼序列，因此在多克隆位點根據(jù)閱讀框插入目的基因就可以表達C端含有DsRed標簽的融合蛋白。利用DsRed的熒光特性可以比較容易地觀察融合蛋白的表達水平和細胞內(nèi)定位，也可以利用DsRed抗體來檢測或免疫沉淀融合蛋白。DsRed與GFP沒有序列同源性，不能使用GFP抗體檢測DsRed。該質(zhì)粒為卡那霉素抗性。轉(zhuǎn)染細胞后，可使用G418篩選穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株。
pCMV-C-DsRed質(zhì)粒的主要信息如下：
Feature Nucleotide
Position
T3 promoter and T3 primer binding site
620-639
Multiple cloning site
651-740
T7 promoter and T7 primer binding site
1478-1499
SV40 polyA signal
1511-1894
f1 origin of ss-DNA replication
2032-2338
Neomycin/kanamycin resistance ORF
2869-3661
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal
3662-4130
pCMV-C-DsRed質(zhì)粒(4969bp)的圖譜如下：
pCMV-C-DsRed的多克隆位點的詳細圖譜如下：
SacI SacII NotI XmaI BamHI HindIII
651
GAGCTCCACC
GCGGTGGCGG
CCGCTCTAGC
CCGGGCGGAT
CCAAGCTTCT
CTCGAGGTGG
CGCCACCGCC
GGCGAGATCG
GGCCCGCCTA
GGTTCGAAGA
EcoRI EcoRV SalI XhoI XbaI DsRed
701
GCAGGAATTC
GATATCGTCG
ACAGATCTCT
CGAGTCTAGA
ATGGACAACA
CGTCCTTAAG
CTATAGCAGC
TGTCTAGAGA
GCTCAGATCT
TACCTGTTGT
751
CCGAGGACGT
CATCAAGGAG
TTCATGCAGT
TCAAGGTGCG
CATGGAGGGC
GGCTCCTGCA
GTAGTTCCTC
AAGTACGTCA
AGTTCCACGC
GTACCTCCCG
801
TCCGTGAACG
GCCACTACTT
CGAGATCGAG
GGCGAGGGCG
AGGGCAAGCC
AGGCACTTGC
CGGTGATGAA
GCTCTAGCTC
CCGCTCCCGC
TCCCGTTCGG
851
CTACGAGGGC
ACCCAGACCG
CCAAGCTGCA
GGTGACCAAG
GGCGGCCCCC
GATGCTCCCG
TGGGTCTGGC
GGTTCGACGT
CCACTGGTTC
CCGCCGGGGG
901
TGCCCTTCGC
CTGGGACATC
CTGTCCCCCC
AGTTCCAGTA
CGGCTCCAAG
ACGGGAAGCG
GACCCTGTAG
GACAGGGGGG
TCAAGGTCAT
GCCGAGGTTC
951
GCCTACGTGA
AGCACCCCGC
CGACATCCCC
GACTACATGA
AGCTGTCCTT
CGGATGCACT
TCGTGGGGCG
GCTGTAGGGG
CTGATGTACT
TCGACAGGAA
1001
CCCCGAGGGC
TTCACCTGGG
AGCGCTCCAT
GAACTTCGAG
GACGGCGGCG
GGGGCTCCCG
AAGTGGACCC
TCGCGAGGTA
CTTGAAGCTC
CTGCCGCCGC
1051
TGGTGGAGGT
GCAGCAGGAC
TCCTCCCTGC
AGGACGGCAC
CTTCATCTAC
ACCACCTCCA
CGTCGTCCTG
AGGAGGGACG
TCCTGCCGTG
GAAGTAGATG
1101
AAGGTGAAGT
TCAAGGGCGT
GAACTTCCCC
GCCGACGGCC
CCGTAATGCA
TTCCACTTCA
AGTTCCCGCA
CTTGAAGGGG
CGGCTGCCGG
GGCATTACGT
1151
GAAGAAGACT
GCCGGCTGGG
AGCCCTCCAC
CGAGAAGCTG
TACCCCCAGG
CTTCTTCTGA
CGGCCGACCC
TCGGGAGGTG
GCTCTTCGAC
ATGGGGGTCC
1201
ACGGCGTGCT
GAAGGGCGAG
ATCTCCCACG
CCCTGAAGCT
GAAGGACGGC
TGCCGCACGA
CTTCCCGCTC
TAGAGGGTGC
GGGACTTCGA
CTTCCTGCCG
1251
GGCCACTACA
CCTGCGACTT
CAAGACCGTG
TACAAGGCCA
AGAAGCCCGT
CCGGTGATGT
GGACGCTGAA
GTTCTGGCAC
ATGTTCCGGT
TCTTCGGGCA
1301
GCAGCTGCCC
GGCAACCACT
ACGTGGACTC
CAAGCTGGAC
ATCACCAACC
CGTCGACGGG
CCGTTGGTGA
TGCACCTGAG
GTTCGACCTG
TAGTGGTTGG
1351
ACAACGAGGA
CTACACCGTG
GTGGAGCAGT
ACGAGCACGC
CGAGGCCCGC
TGTTGCTCCT
GATGTGGCAC
CACCTCGTCA
TGCTCGTGCG
GCTCCGGGCG
1401
CACTCCGGCT
GGCCCGGTAC
CTTAATTAAT
TAAGGTACCA
GTGAGGCCGA
CCGGGCCATG
GAATTAATTA
ATTCCATGGT
pCMV-C-DsRed中沒有的酶切位點(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-DsRed)包括：
AclI
AflII
AgeI
AscI
AsiSI
BaeI
BbvCI
BcgI
BlpI
BmgBI
Bpu10I
BsiWI
BsmBI
BspEI
BspQI
BssHII
BstZ17I
EarI
EcoNI
FseI
NruI
PmeI
PmlI
PpuMI
PshAI
PspXI
SapI
ScaI
SgrAI
SpeI
SwaI
XcmI
XmnI
pCMV-C-DsRed中的單酶切位點（Restriction enzymes that cut pCMV-C-DsRed once）包括：
NdeI
CA`TA,TG
240
BbsI
GAAGACNN`NNNN,
1161
SnaBI
TAC|GTA
346
BsrGI
T`GTAC,A
1279
CspCI
,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN`
380
PflMI
CCAN,NNN`NTGG
1319
NheI
G`CTAG,C
597
PspOMI
G`GGCC,C
1420
BmtI
G,CTAG`C
597
ApaI
G,GGCC`C
1420
SacI
G,AGCT`C
651
PvuI
GCAGTG,NN`
1500
Eco53kI
GAG|CTC
653
BclI
T`GATC,A
1656
BstXI
CCAN,NNNN`NTGG
659
MfeI
C`AATT,G
1749
SacII
CC,GC`GG
660
HpaI
GTT|AAC
1762
NotI
GC`GGCC,GC
668
BtsI
GCAGTG,NN`
1836
TspMI
C`CCGG,G
680
MluI
A`CGCG,T
1885
XmaI
C`CCGG,G
680
SfiI
GGCCN,NNN`NGGCC
2771
SmaI
CCC|GGG
682
ClaI
AT`CG,AT
2839
SrfI
GCCC|GGGC
682
BspDI
AT`CG,AT
2839
BamHI
G`GATC,C
687
KasI
G`GCGC,C
2998
HindIII
A`AGCT,T
693
NarI
GG`CG,CC
2999
EcoRI
G`AATT,C
705
PluTI
G,GCGC`C
2998
EcoRV
GAT|ATC
713
SfoI
GGC|GCC
3000
SalI
G`TCGA,C
717
MscI
TGG|CCA
3081
AccI
GT`MK,AC
718
Tth111I
GACN`N,NGTC
3117
XhoI
C`TCGA,G
729
PflFI
GACN`N,NGTC
3117
PaeR7I
C`TCGA,G
729
BsrDI
GCAATG,NN`
3230
XbaI
T`CTAG,A
735
RsrII
CG`GWC,CG
3515
BstEII
G`GTNAC,C
881
BstBI
TT`CG,AA
3681
AhdI
GACNN,N`NNGTC
919
BsaI
GGTCTCN`NNNN,
3988
AfeI
AGC|GCT
1023
ApaLI
G`TGCA,C
4603
SbfI
CC,TGCA`GG
1077
PciI
A`CATG,T
4917
pCMV-C-DsRed質(zhì)粒中推薦使用的測序引物序列如下：
T3 primer (620-639): 5′-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3′
C-DsRed primer (852-873): 5′- TGGCGGTCTGGGTGCCCTCGTA -3′
pCMV-C-DsRed的全序列信息：D2624 pCMV-C-DsRed-seq.txt
pCMV-C-DsRed質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細胞后的表達效果請參考圖1。
圖1. pCMV-C-DsRed質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細胞后的表達效果圖。左側(cè)為明場照片，右側(cè)為熒光照片。
包裝清單：
KL-2624-1μg
pCMV-C-DsRed (紅色熒光蛋白)
1μg
KL-2624-100μg
pCMV-C-DsRed (紅色熒光蛋白)
100μg
保存條件：
-20℃保存。
注意事項：
本質(zhì)粒未經(jīng)信裕生物書面許可不得用于任何商業(yè)用途，也不得移交給訂貨人所在實驗室外的任何個人或單位。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
關(guān)鍵字： pCMV-C-DsRed (紅色熒光蛋白)說明書；pCMV-C-DsRed (紅色熒光蛋白)廠家
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