生物素標(biāo)記EMSA探針－ARE (0.2μM)

生物素標(biāo)記EMSA探針－ARE是用于EMSA(也稱gel shift)研究的并經(jīng)生物素(Biotin)標(biāo)記的ARE consensus
oligonucleotide。這個(gè)生物素標(biāo)記的雙鏈寡核苷酸含有公認(rèn)的ARE位點(diǎn)，可以用作EMSA研究時(shí)的探針。
ARE consensus oligo的序列如下：
5'-ACT GAG GGT GAC TCA GCA AAA TC-3'
3'-TGA CTC CCA CTG AGT CGT TTT AG-5'
ARE即Antioxidant Response Element(抗氧化響應(yīng)元件)，該順式作用元件含有AP1結(jié)合位點(diǎn)，可以和AP1結(jié)合，但Nrf2是其更專一性結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子。例如NQO1(NAD(P)H:quinone oxidoreductase)和HO-1(Heme Oxygenase-1)都受Nrf2通過ARE元件進(jìn)行轉(zhuǎn)錄調(diào)控。
本生物素標(biāo)記EMSA探針已經(jīng)過純化，可以直接用于EMSA結(jié)合反應(yīng)。
本生物素標(biāo)記EMSA探針可以和康朗生物的化學(xué)發(fā)光法EMSA試劑盒(GS009)配套使用。
一個(gè)包裝的生物素標(biāo)記探針可以進(jìn)行約200-400個(gè)樣品的EMSA檢測。
包裝清單：

保存條件：
-20℃保存，一年有效。
注意事項(xiàng)：
避免加熱到40℃以上，溫度過高會(huì)導(dǎo)致雙鏈DNA探針解聚成單鏈。而單鏈無法用于EMSA研究。
對于基于生物素標(biāo)記的EMSA檢測的詳細(xì)操作可以參考康朗生物的化學(xué)發(fā)光法EMSA試劑盒(GS009)的使用說明。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 

使用說明：
1. 本生物素標(biāo)記EMSA探針用于EMSA結(jié)合反應(yīng)時(shí)，參考如下步驟進(jìn)行：
A. 如下設(shè)置EMSA結(jié)合反應(yīng)：

注：生物素標(biāo)記EMSA探針的推薦用量為每個(gè)反應(yīng)0.5微升，如果檢測出來的目的蛋白的EMSA條帶偏弱，可以適當(dāng)加大生物素標(biāo)記EMSA探針的用量至0.75微升或1微升。
注2：對于冷競爭時(shí)使用的未標(biāo)記的探針或未標(biāo)記的突變探針，使用量可以根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整使用的體積。推薦的用于冷競爭的未標(biāo)記的探針或突變探針的用量為生物素標(biāo)記探針的50-100倍。
B.按照上述順序依次加入各種試劑，在加入標(biāo)記好的探針前先混勻，并且室溫(20-25℃)放置10分鐘，從而消除可能發(fā)生的探針和蛋白的非特異性結(jié)合，或者讓冷探針優(yōu)先反應(yīng)。然后加入標(biāo)記好的探針，混勻，室溫(20-25℃)放置20分鐘。
C.加入1μl EMSA/Gel-Shift上樣緩沖液(無色，10X)，混勻后立即上樣。注意：有些時(shí)候溴酚藍(lán)會(huì)影響蛋白和DNA的結(jié)合，建議盡量使用無色的EMSA/Gel-Shift上樣緩沖液。如果對于使用無色上樣緩沖液在上樣時(shí)感覺到無法上樣，可以在無色上樣緩沖液里面添加極少量的藍(lán)色的上樣緩沖液，至可以觀察到藍(lán)顏色即可。
2.對于基于生物素標(biāo)記的EMSA檢測的更多詳細(xì)操作可以參考康朗生物的化學(xué)發(fā)光法EMSA試劑盒(GS009)的使用說明。