Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (20U/μl, 進口分裝)

Terminal Deoxynucleotidyl Transferase，簡稱TdT，中文名稱為末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶，是一種非模板依賴的DNA聚合酶，可以催化在寡核苷酸、單鏈或雙鏈DNA的3'羥基端加上dNTP?？梢源呋墓押塑账岬淖疃涕L度為3個核苷酸。
本產(chǎn)品為進口分裝。
用途：寡核苷酸或DNA 3'羥基末端標記；DNA末端加尾(DNA tailing)；5'-RACE；合成同一種脫氧核苷酸的寡聚鏈等。
來源：由大腸桿菌表達，表達基因的來源為小牛胸腺。
活性定義：37℃60分鐘內(nèi)，催化1nmol dNTP加入到多聚核苷酸3'羥基末端中所需的酶量定義為1個活性單位。
酶活性檢測條件：200mM potassium cacodylate(pH7.2),1mM CoCl₂,0.1mM DTT,0.01%(v/v)Triton X-100,10μM 
oligo(dT)10,1mM dTTP and 0.4MBq/ml[³H]-dTTP。
純度：不含DNA內(nèi)切酶和外切酶，不含RNase。
酶儲存溶液：100mM KAc(pH6.8),2mM 2-mercaptoethanol,0.01%(v/v)Triton X-100 and 50%(v/v)glycerol 。
Reaction Buffer(5X)：0.125M Tris(pH7.2 at 25℃),1M potassium cacodylate,0.05%(v/v)Triton X-100,5mM 
CoCl₂。
失活或抑制：70℃加熱10分鐘或加入適量EDTA均可導致Terminal Deoxynucleotidyl Transferase失活。金屬離子螯合劑，較高濃度的銨根離子、氯離子、碘離子和磷酸根均對Terminal Deoxynucleotidyl Transferase有抑制作用。
包裝清單：

保存條件：
-20℃保存。
注意事項： 
酶使用時宜放在冰盒內(nèi)或冰浴上，使用完畢后宜立即放置于-20℃保存。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。 

使用說明：
1. DNA 3'末端標記：
a. 參考如下表格設置反應體系：

b. 按上表設置好反應體系后，輕輕混勻(可以用移液器吹打混勻或用Vortex在最低速度輕輕混勻)，隨后離心沉淀液體。
c. 37℃孵育15分鐘。
d. 70℃孵育15分鐘或加入5μl 0.5M EDTA終止反應。
說明：標記的效率和3'羥基末端的類型有關，3'突出末端的標記效率要顯著高于3'縮進末端或平末端的標記效率。
2. DNA末端加尾(DNA Tailing)：
a. 參考下表格設置反應體系：

b. 按上表設置好反應體系后，輕輕混勻(可以用移液器吹打混勻或用Vortex在最低速度輕輕混勻)，隨后離心沉淀液體。
c. 37℃孵育15分鐘。
d. 70℃孵育15分鐘或加入5μl 0.5M EDTA終止反應。
說明：在上述反應條件下，每個3'羥基末端可以加上100-130個dA或dT，或20-30個dC或dG。
3. 其他用途可以參考上述用途或適當?shù)奈墨I資料進行。