Stbl3甘油菌

信裕生物生產(chǎn)的Stbl3甘油菌，是收集生長(zhǎng)在對(duì)數(shù)期的Stbl3菌，加入含有甘油的細(xì)菌凍存液制備而成?？梢灾苯觿澠桨寤蛐×?、大量培養(yǎng)。特別適合作為慢病毒(lentivirus)載體和其它逆轉(zhuǎn)錄病毒載體等含有重復(fù)序列的載體或其它較大并且不太穩(wěn)定的載體的宿主菌以進(jìn)行質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化、克隆和擴(kuò)增。
大腸桿菌Stbl3菌株來(lái)源于HB101 E. coli 菌株，其基因組含有重組酶recA13突變，可以抑制長(zhǎng)片段末端重復(fù)區(qū)的重組，所以能有效轉(zhuǎn)化、克隆和擴(kuò)增含有重復(fù)序列的慢病毒載體和其它逆轉(zhuǎn)錄病毒載體。
本菌株非常穩(wěn)定，和常見的大抽桿菌菌株相比，對(duì)于慢病毒載體等較大質(zhì)?；蚱渌环€(wěn)定載體的轉(zhuǎn)化效率以及克隆和擴(kuò)增的穩(wěn)定性有顯著提高。
Stbl3菌株的基因型：F^- mcrB mrr hsdS20 (rB^-, mB^-) recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2rpsL20(Str^R) xyl-5 
λ^- leu mtl-1 endA1+。
本菌株具有鏈霉素抗性，并且不能用于質(zhì)粒的藍(lán)白斑篩選。
本菌株可以使用常規(guī)的LB培養(yǎng)基或SOC培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
包裝清單：

保存條件：
-20℃保存，一年有效。-80℃可以長(zhǎng)期保存。
注意事項(xiàng)：
使用本甘油菌時(shí)可以不必完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或進(jìn)行液體培養(yǎng)即可。也可以完全融解后使用，但隨著凍融次數(shù)的增加，細(xì)菌的活力會(huì)逐漸下降。在沒有結(jié)凍的情況下，菌體會(huì)逐漸沉淀至管底，請(qǐng)務(wù)必注意適當(dāng)混勻后使用。
為保證菌種純正，避免其它細(xì)菌污染，盡量先劃平板然后再挑取單克隆菌落進(jìn)行后續(xù)操作。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用說(shuō)明：
1. 劃平板接種：
取出Stbl3甘油菌置于冰上，并置于超凈臺(tái)內(nèi)，后續(xù)操作都在超凈臺(tái)內(nèi)操作。
a. 用鑷子和塑料槍頭操作：鑷子的頂端在70%酒精中蘸一下，并且在酒精燈上略略燒一下，使鑷子的頂端處于無(wú)菌狀態(tài)。用鑷子夾取一個(gè)無(wú)菌的200微升塑料槍頭，蘸取少量Stbl3甘油菌，然后把蘸有菌液的塑料槍頭，以盡量和LB平板接近平行的角度，在不含抗生素的LB平板上連續(xù)作S形或Z形劃動(dòng)，再用一無(wú)菌的200微升塑料槍頭，在原先的劃線上以90或120度角，再在LB平板上 連續(xù)作S形或Z形劃動(dòng)。通常換槍頭重復(fù)操作2-3次即可。37℃倒置培養(yǎng)過(guò)夜。
b. 用接種環(huán)操作：將接種環(huán)在酒精燈上略略燒一下，使接種環(huán)處于無(wú)菌狀態(tài)。微冷后，蘸取少量Stbl3甘油菌，在不含抗生素的LB平板上連續(xù)作S形或Z形劃動(dòng)。把接種環(huán)再燒一下，微冷后，在原先的劃線上以90或120度角，再在LB平板上連續(xù)作S形或Z形劃動(dòng)。通常用接種環(huán)重復(fù)操作2-3次即可。37℃倒置培養(yǎng)過(guò)夜。
2. 直接培養(yǎng)：
a. 取出Stbl3甘油菌置于冰上，并置于超凈臺(tái)內(nèi)，后續(xù)操作都在超凈臺(tái)內(nèi)操作。把鑷子的頂端在70%酒精中蘸一下，并且在酒精燈上略略燒一下，使鑷子的頂端處于無(wú)菌狀態(tài)。用鑷子夾取一個(gè)無(wú)菌的塑料槍頭或牙簽，蘸取少量Stbl3甘油菌，然后把蘸有菌液的塑料槍頭或牙簽放到裝有3毫升LB的細(xì)菌培養(yǎng)試管內(nèi)或裝有100毫升或更大體積LB的細(xì)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。37℃，約200rpm培養(yǎng)過(guò)夜。
3. Stbl3感受態(tài)細(xì)菌的制備
可以使用碧云天的步法感受態(tài)細(xì)菌制備試劑盒(D0301)、超級(jí)感受態(tài)細(xì)菌制備試劑盒(D0302)或其它方法進(jìn)行感受態(tài)細(xì)菌的制備。

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