Stbl3甘油菌

信裕生物生產的Stbl3甘油菌，是收集生長在對數(shù)期的Stbl3菌，加入含有甘油的細菌凍存液制備而成?？梢灾苯觿澠桨寤蛐×?、大量培養(yǎng)。特別適合作為慢病毒(lentivirus)載體和其它逆轉錄病毒載體等含有重復序列的載體或其它較大并且不太穩(wěn)定的載體的宿主菌以進行質粒的轉化、克隆和擴增。
大腸桿菌Stbl3菌株來源于HB101 E. coli 菌株，其基因組含有重組酶recA13突變，可以抑制長片段末端重復區(qū)的重組，所以能有效轉化、克隆和擴增含有重復序列的慢病毒載體和其它逆轉錄病毒載體。
本菌株非常穩(wěn)定，和常見的大抽桿菌菌株相比，對于慢病毒載體等較大質?；蚱渌环€(wěn)定載體的轉化效率以及克隆和擴增的穩(wěn)定性有顯著提高。
Stbl3菌株的基因型：F^- mcrB mrr hsdS20 (rB^-, mB^-) recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2rpsL20(Str^R) xyl-5 
λ^- leu mtl-1 endA1+。
本菌株具有鏈霉素抗性，并且不能用于質粒的藍白斑篩選。
本菌株可以使用常規(guī)的LB培養(yǎng)基或SOC培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
包裝清單：

保存條件：
-20℃保存，一年有效。-80℃可以長期保存。
注意事項：
使用本甘油菌時可以不必完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或進行液體培養(yǎng)即可。也可以完全融解后使用，但隨著凍融次數(shù)的增加，細菌的活力會逐漸下降。在沒有結凍的情況下，菌體會逐漸沉淀至管底，請務必注意適當混勻后使用。
為保證菌種純正，避免其它細菌污染，盡量先劃平板然后再挑取單克隆菌落進行后續(xù)操作。
本產品僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用說明：
1. 劃平板接種：
取出Stbl3甘油菌置于冰上，并置于超凈臺內，后續(xù)操作都在超凈臺內操作。
a. 用鑷子和塑料槍頭操作：鑷子的頂端在70%酒精中蘸一下，并且在酒精燈上略略燒一下，使鑷子的頂端處于無菌狀態(tài)。用鑷子夾取一個無菌的200微升塑料槍頭，蘸取少量Stbl3甘油菌，然后把蘸有菌液的塑料槍頭，以盡量和LB平板接近平行的角度，在不含抗生素的LB平板上連續(xù)作S形或Z形劃動，再用一無菌的200微升塑料槍頭，在原先的劃線上以90或120度角，再在LB平板上 連續(xù)作S形或Z形劃動。通常換槍頭重復操作2-3次即可。37℃倒置培養(yǎng)過夜。
b. 用接種環(huán)操作：將接種環(huán)在酒精燈上略略燒一下，使接種環(huán)處于無菌狀態(tài)。微冷后，蘸取少量Stbl3甘油菌，在不含抗生素的LB平板上連續(xù)作S形或Z形劃動。把接種環(huán)再燒一下，微冷后，在原先的劃線上以90或120度角，再在LB平板上連續(xù)作S形或Z形劃動。通常用接種環(huán)重復操作2-3次即可。37℃倒置培養(yǎng)過夜。
2. 直接培養(yǎng)：
a. 取出Stbl3甘油菌置于冰上，并置于超凈臺內，后續(xù)操作都在超凈臺內操作。把鑷子的頂端在70%酒精中蘸一下，并且在酒精燈上略略燒一下，使鑷子的頂端處于無菌狀態(tài)。用鑷子夾取一個無菌的塑料槍頭或牙簽，蘸取少量Stbl3甘油菌，然后把蘸有菌液的塑料槍頭或牙簽放到裝有3毫升LB的細菌培養(yǎng)試管內或裝有100毫升或更大體積LB的細菌培養(yǎng)瓶內。37℃，約200rpm培養(yǎng)過夜。
3. Stbl3感受態(tài)細菌的制備
可以使用碧云天的步法感受態(tài)細菌制備試劑盒(D0301)、超級感受態(tài)細菌制備試劑盒(D0302)或其它方法進行感受態(tài)細菌的制備。

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