檢測原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。特異性抗人IL-6抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本和生物素化的檢測抗體,經(jīng)過孵育,樣本中存在的IL-6與固相抗體和檢測抗體結(jié)合,形成免疫復(fù)合物。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素 (Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物,避光顯色。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm波長 (參考校正波長540 nm或570 nm) 測定吸光度值。
檢測類型:雙抗夾心法
形式:預(yù)包被96孔板
檢測樣本類型:細(xì)胞上清液,血清,血漿
上樣量:100ul
試劑盒組分:
預(yù)包被96孔板、標(biāo)準(zhǔn)品、IL-6檢測抗體、稀釋用緩沖液、顯色液(A、B)、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說明書一份。
靈敏度:1.56 pg/mL
檢測范圍: 9.38 - 600 pg/mL
回收率范圍:94%-111%
保存方法:2-8℃
標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
背景:
白細(xì)胞介素-6(IL-6)是一個(gè)具有α螺旋結(jié)構(gòu)、22-28 kDa的磷酸化和不同程度糖基化的多功能細(xì)胞因子,它在疾病急性期反應(yīng)、炎癥、造血、骨代謝以及癌癥惡化等方面起重要。
成熟的人IL-6有183個(gè)氨基酸,與小鼠和大鼠IL-6有41%的同源性。IL-6內(nèi)部的選擇性剪接而產(chǎn)生多種異構(gòu)體,有些剪接體表現(xiàn)出拮抗特性。已知表達(dá)IL-6的細(xì)胞包括CD8+T細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、滑膜細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、巨核細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞(在內(nèi)皮素的影響下)、交感神經(jīng)元、大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞、腎上腺髓質(zhì)嗜鉻細(xì)胞、視網(wǎng)膜色素細(xì)胞、肥大細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞、朗格漢斯細(xì)胞、胎兒和成人呈形膠質(zhì)細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、結(jié)腸上皮細(xì)胞、B1 B細(xì)胞和胰島β細(xì)胞。IL-6的產(chǎn)生通常是在糖皮質(zhì)激素、兒茶酚胺和第二性類固醇控制在下,一般與細(xì)胞激活相關(guān)。正常人血液中的IL-6在1 pg/mL范圍內(nèi),在月經(jīng)期略有升高、在某些癌癥的中晚期有重度增高、在大型手術(shù)后有顯著提高。
IL-6通過細(xì)胞表面受體引發(fā)細(xì)胞信號,該受體是在由配體結(jié)合亞單位(IL-6受體)和信號轉(zhuǎn)到亞單位gp130組成的異二聚體復(fù)合物。IL-6結(jié)合到IL-6受體上,引發(fā)了IL-6受體與gp130的結(jié)合及gp130的二聚體化。gp130也是CLC、CNTF、CT-1、IL-11、IL-27、LIF和OSM受體的組成部分??扇苄?span lang="EN-US">IL-6受體是有由選擇性剪接和蛋白酶切割產(chǎn)生的。通過反式信號傳導(dǎo)機(jī)制,可溶性IL-6和IL-6受體復(fù)合物可引發(fā)表面缺乏IL-6受體但表達(dá)gp130細(xì)胞的應(yīng)答。IL-6受體的表達(dá)主要局限于肝細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和靜息淋巴細(xì)胞,由于gp130分子表達(dá)非常廣泛,反式信號轉(zhuǎn)導(dǎo)實(shí)現(xiàn)了更廣泛的細(xì)胞類型對IL-6的響應(yīng)??扇苄?span lang="EN-US">gp130剪接體阻止了IL-6/IL-6R的反式信號轉(zhuǎn)導(dǎo),但不能阻止其他細(xì)胞因子利用gp130分子作為共同受體的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。IL-6與腫瘤壞死因子α(TNF α)和IL-1一道,所引起的急性炎癥反應(yīng),在發(fā)熱和肝臟急性炎癥反應(yīng)中幾乎起著獨(dú)一無二的作用,它在急性炎癥到獲得性免疫或者慢性炎癥疾病的轉(zhuǎn)化中也發(fā)揮重要作用。IL-6失調(diào)可促進(jìn)慢性炎癥,如肥胖、胰島素抵抗、炎癥性腸道疾病、炎性關(guān)節(jié)炎以及敗血癥,往往涉及IL-6的反式信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。在轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β存在的條件下,IL-6在幼稚型T細(xì)胞向Th17炎性細(xì)胞分化的過程中其中起重要作用。IL-6調(diào)節(jié)骨吸收,并且通過促進(jìn)Th17炎性細(xì)胞的活性,成為類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中造成炎性關(guān)節(jié)損傷的主要因素。IL-6參與動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成和非穩(wěn)定性。然而,IL-6也有抗炎癥作用,如體育鍛煉時(shí)骨骼肌分泌IL-6。它作為造血干細(xì)胞的生長因子促進(jìn)、誘導(dǎo)B細(xì)胞成熟為漿細(xì)胞、多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞的永生。IL-6也促進(jìn)但可能不會啟動(dòng)其他 炎癥相關(guān)的癌癥發(fā)生,如結(jié)腸炎相關(guān)癌癥。
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